主题:【第十三届原创】细胞传代注意事项

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细胞传代注意事项:

1、 避免污染肯定是首位的,包括,1.细胞间的灭菌,培养基和血清都要经过过滤,2每个操作都不能在未盖盖的培养皿上面进行。3.吸取吹打PBS或者培养基的枪头都不可以与废液缸直接接触。

2、 另一件重要的事情就是胰酶消化的程度了。消化太过会使细胞形态改变,消化不充分会使细胞会滞留在培养基上。

3、 当然离心的转速和时间也很重要,这要视细胞的种类而定。

具体操作步骤如下:1.用5%酒精擦试超净台和双手,

2.备好培养瓶,取出细胞,喷酒精,消毒后放入超净台

3.吸走旧培养基,用PBS清洗,加入适量 胰酶消化液,注意消化液的量, 最佳消化温度37% ,一般消化Imin.

4. 显微镜下观察消化细胞,若细胞质回缩,细胞之间连接成片,表明此时消化完成,

5.加入培养液终止消化,吹打均匀,放入15mL离人管,离心时1300rpm,5min,新的培养基加入培养液,植入新的培养皿, 吹打均匀,继续培养.
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dahua1981
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