主题:【原创】活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光染料的选择与成像

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瑞沃德
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上期文章中,我们介绍了活体成像实验中荧光蛋白的选择方法,荧光蛋白肿瘤细胞株筛选、病毒载体表达、转基因小鼠构建应用中被广泛使用链接。在药物分布、纳米颗粒示踪、干细胞追踪等实验中,往往需要使用荧光染料对材料或细胞进行标记。

本期将为大家介绍活体成像实验中常用的荧光染料!Cy5.5Ex/Em678/701 nmCy7Ex/Em749/776 nm对分子标记的最优选择之一;DiDEx/Em644/663 nmDiREx/Em748/780染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。

Cy5.5 Cy7避开可见光区在生物组织中的穿透深度较大。水和血红蛋白700900 nm吸收都很少,使得近红外光可以穿透组织内部多达15 cm。同时,这类染料还拥有紫外光区染料和同位素标记无法具备的生物安全性。




DiDDiR细胞膜荧光探针



DiD(红色荧光染料)是亲脂性荧光染料家族成员之一,它可以用来标记细胞膜和其它脂溶性生物结构。当DiD与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiD可以用来对活细胞进行成像和流式分析。

DiR(近红外荧光染料)是一个亲脂性花青染料。常用于标记细胞质膜。DiR 的两个18-碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。DiR和其他细胞膜荧光染料如 DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。




当我们对分子或细胞成功标记后,需要选择合适的仪器进行成像获取实验数据。
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