主题:【已应助】在样品前处理前加入内标,内标会损失,那如何定量呢?

浏览0 回复14 电梯直达
砂锅粥
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原文由 Ins_8a335cbd(Ins_8a335cbd) 发表:

首先谢谢老师的解答,我再追问一下:

1.“前处理前加内标是为了校正整个前处理过程目标物的损失。”这句话我有点不是太明白,这个校正是通过内标的回收率进行校正嘛?也就是说默认其他目标物浓度与内标的去除率一致?但是他们文献中还是对每种目标物用标准品进行了回收率的计算,那这样内标作为回收率指示物的意义在哪?

2.“内标物上机可以测量浓度”这样的话不是还要对内标作一个标曲?才能知道内标物上机的浓度?

可以的话还请老师帮忙解答下,感谢!


有条件的话用各种化合物的同位素化合物是最优的,因为这样各种物理和化学行为跟目标化合物最接近,整个前处理过程的损失率一致性最好;达不到这种条件的话用合适的内标物替代也行。比如前处理目标物会损失10%作用,内标物也会损失10%左右,那么通过内标校正回来相当于不损失(当然这个前提是内标物的损失效率和目标化合物基本一致)。文献中对每种目标物用标准品进行了回收率的计算,这个是经过内标校正的回收率还是没经过内标校正的回收率?楼主方便上文献看看吗?我怕描述或者理解有偏差。
Ins_8a335cbd
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原文由 检测老菜鸟(v3295053) 发表:
各位老师,大家好,我是做环境样品中抗生素检测(用LC-MS/MS)的,看了许多文献,都是在样品前处理(过萃取柱)前加入了内标,之后定容的时候(上样前)就没在说过加内标的事情了,所以我产生了几个疑问:
1.这样的话不就是把内标当作了回收率指示物了嘛?
相当于是。

2.内标物在前处理加的话,处理过后会有损失,内标物就不准了,也就无法知道内标物浓度,如何定量?
内标物浓度以未损失的计算,前提是假设和目标物损失一致。

3.有些文章做的标准曲线是 纵坐标为峰面积比,横坐标为物质浓度,而不是浓度比,就是通过加内标样中样品峰面积和内标峰面积比来定量,这样真的能定量嘛?
峰面积就是浓度值,可以定量。


谢谢老师的解答,我再追问一个问题:

1.“内标物浓度以未损失的计算,前提是假设和目标物损失一致。”内标浓度按照未损失计算的话,响应值也没有原来的大吧?假设和目标物损失一致,也就是目标物和内标同比例损失,然后其峰面积比和浓度比不变吗?

麻烦老师再帮我解答下,感谢!
检测老菜鸟
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原文由 Ins_8a335cbd(Ins_8a335cbd) 发表: 谢谢老师的解答,我再追问一个问题:1.“内标物浓度以未损失的计算,前提是假设和目标物损失一致。”内标浓度按照未损失计算的话,响应值也没有原来的大吧?假设和目标物损失一致,也就是目标物和内标同比例损失,然后其峰面积比和浓度比不变吗?麻烦老师再帮我解答下,感谢!
你把前处理当做不损失计算就行了
DD_Rong
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只要内标选择合适或者对的,最好是同位素内标,那么内标和目标物的过程损失可以认为是一直的,具体可以通过模拟的样品或基质标准品实验对比数据
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