主题:【已应助】内标异常升高问题

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wc89
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各位大侠,我们最近在使用ICP-MS中出现了内标异常的情况。寻求各位的帮助。情况交代如下:

实验室为药物研发类实验室,在对胞磷胆碱钠注射液和盐酸利多卡因注射液的元素杂质分析中出现Sc/Y/In浓度异常偏高,Bi元素相对稳定。异常偏高出现在进样品基质后。

样品基质均为液体注射液,规格为5ml/0.5g,上机溶液为原溶液用稀硝酸及加金标液稀释100倍,内标溶液浓度500ng/ml混标。

项目开发时,各方法学参数均正常,等上方法验证时,出现内标异常偏高,当时采用清洗两级椎体,浸泡矩管和雾化器的维护方法。维护后开机走标曲及空白溶液显示均正常。但一上样品基质,内标开始上涨。数据如下:

 45  Sc ( ISTD )  [ He ]89  Y ( ISTD )  [ He ]115  In ( ISTD )  [ He ]209  Bi ( ISTD )  [ He ]
Sample NameISTD Recovery %CPSISTD Recovery %CPSISTD Recovery %CPSISTD Recovery %CPS
Blk wash 41192.14 307826.7 513574.5 1697987
Blk wash 41108.48 307124.7 516443.1 1693373
Blk wash 41566.22 307867.6 519287.8 1704694
Blk wash 40662.85 309038.2 514030.1 1687415
Cal-110040351.99100309738100519149.21001716766
Cal-2102.341275.34100.130997899.1514645.9101.21737226
Cal-398.939926.6496297374.496.7501786.6991699120
Cal-495.738631.8493.4289229.492.7481313.496.41655451
Cal-59337531.0791.9284758.291.947733296.31652720
Cal-697.739431.5493.4289200.994.649124697.21668673
Blk wash89.436062.1386.6268082.785.9446137.488.11512451
Blk wash94.538123.4492.8287335.491.9476966.494.41620050
Blk wash9839535.3794.7293453.293.7486575.795.71643493
Blk wash97.739421.5396297426.694.3489586.895.71642677
Blk wash99.440094.498.2304289.196.8502675.997.41672719
Blank105.742671.18101.5314334.999.9518768.5100.51725137
Blank103.241623.34100.6311511.199.9518602.51001716281
Blank103.341673.53100.7312029.7100.1519566.11001716770
Blank105.942717.89102.6317754.3102529758.3100.71728553
Blank93.237618.6691.2282346.591.1472990.489.71540682
Blank106.442941.87103.5320496.1102.7533353.8101.41741371
Blank107.143217.45103.5320692101.7527900100.91732369
Blk wash96.338850.292.3285886.392477519.590.71556631
Blk wash107.543397.55103.6320962.5102.4531857.8101.11734927
Sample150.160588.48135.4419334.9127659213.4116.41998358
Sample162.565569.65144445913.1133.8694488.2117.62019140
Sample167.267473.86146.7454503.4135.8704999.1117.82022471
Blk wash174.570431.39153.3474972.8143.5744874.1128.42203481
Blk wash170.668845.83151.4468973.6142.2738017.8126.52172217
Blk wash167.667628.26148.2459080138.5719058.4124.82142096
Blk wash153.561930.25136.6423009.7127.1660081.8114.31962475
Blk wash172.669629.9150.5466288.3139.9726135.6125.62156883
Blk wash175.170669.76153.4475255.6141732019.41262162944
Blk wash179.472372.65158.3490308.8145.8756798.3130.32236337
Blk wash184.174308.04157486186.2145.1753322.8129.52222425
  后面的洗针完全下不来。

盐酸利多卡因注射液也是类似,一旦上了sp就会出现内标的升高。奇怪的是如果熄火后再次开始分析批(比如中午吃饭),In 115以下,包括它自己,cps值又能回到初始状态。

我们尝试过降低基质浓度,10倍甚至100倍,但内标CPS值不会降低,拔掉内标管,能降低到几百,但一旦插上内标管,依然稳定在比较高的数值。

也问过仪器厂家(安捷伦)的应用,怀疑过碳增敏,使用异丙醇依然没什么改变。

也怀疑过样品本底含内标的同质量数,但即使有应该也会随着不进样而冲洗下来,并且所测的目标元素采集的就是内标质量数附近的,通过检测cps值,最高不超过1000,基本在500左右,甚至部分在100以下。这种本底即含有高含量内标的可能也极低。

实验室还做过一次能力验证,样品是茶叶,采用微波消解最终测试的结果也出现内标异常升高,采用0.25g消解后到25ml,稀释100倍方法。碳含量理论上应该不高。

目前还没解决这个问题,想找大家帮忙出出主意。谢谢
最佳答案:timstoicpms回复于2021/05/27
(1)缩短 He钢瓶与 ICP-MS的距离,用厂家原配的6米、1/8英寸外径不锈钢管路 作为连接。 第一天傍晚设置 1.0 ml/min 过夜吹扫,第二天开始测试;如果你使用 1/4英寸管路、长距离管路 传输 He,那就意味着 管路中“陈旧He”很多,需要很长时间才能被吹扫、被“新鲜He”置换掉。

(2)测试调谐完成后,在“添加到队列”之前,把进样管/进样针 插入纯水或者稀硝酸,在调谐界面把 碰撞池He流量从 设定的流量(比如4.0~4.5ml/min),拖动到 最大12ml/min,保持5分钟。这段时间正好可以利用起来,清洗进样系统。5分钟后,把 He流量降回之前的设定值,保存批处理,发送到队列开始测试。



(3)测试时使用 HMI模式,雾化器载气 ~0.85 L/min,稀释气 0.30~0.40 L/min
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(1)缩短 He钢瓶与 ICP-MS的距离,用厂家原配的6米、1/8英寸外径不锈钢管路 作为连接。 第一天傍晚设置 1.0 ml/min 过夜吹扫,第二天开始测试;如果你使用 1/4英寸管路、长距离管路 传输 He,那就意味着 管路中“陈旧He”很多,需要很长时间才能被吹扫、被“新鲜He”置换掉。

(2)测试调谐完成后,在“添加到队列”之前,把进样管/进样针 插入纯水或者稀硝酸,在调谐界面把 碰撞池He流量从 设定的流量(比如4.0~4.5ml/min),拖动到 最大12ml/min,保持5分钟。这段时间正好可以利用起来,清洗进样系统。5分钟后,把 He流量降回之前的设定值,保存批处理,发送到队列开始测试。



(3)测试时使用 HMI模式,雾化器载气 ~0.85 L/min,稀释气 0.30~0.40 L/min
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2021/5/27 10:26:54 Last edit by timstoicpms
tuxlin
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最近有几个帖子都是在说内标上升的问题,好像都是安捷伦的仪器。
可能的问题,一是如楼上所说的,提前进行氦气吹扫,安捷伦氦气模式稳定时间比较长。二是不知此前是否清洗过锥,如果清洗了锥的话,仪器稳定的时间也要长一些。以前用过抛光粉清洗锥,确实可以擦得非常干净,但刚点火时灵敏度很低,要钝化很长一段时间灵敏度才会正常。
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原文由 tuxlin(tuxlin) 发表:
最近有几个帖子都是在说内标上升的问题,好像都是安捷伦的仪器。
可能的问题,一是如楼上所说的,提前进行氦气吹扫,安捷伦氦气模式稳定时间比较长。二是不知此前是否清洗过锥,如果清洗了锥的话,仪器稳定的时间也要长一些。以前用过抛光粉清洗锥,确实可以擦得非常干净,但刚点火时灵敏度很低,要钝化很长一段时间灵敏度才会正常。


Thermo iCAP ICP-MS 的碰撞He气,是用 1/16英寸内径(1.587mm)管路;

而 Agilent 使用 1/8英寸内径(3.175mm)管路,同等长度的话,安捷伦管路中的“陈旧He”是 Thermo的4倍,Agilent 需要更长时间吹扫
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原文由 wc89(v2714609) 发表:
意思是He可能纯度不够导致?


使用完毕,通常都会关闭 He气钢瓶(因为He很昂贵),那么周围空气中的 O2 N2 就会缓慢渗透进入 不锈钢管路。

二来,虽然使用 电抛光的不锈钢管,但其内表面仍然会脱落金属颗粒 融入He 气中。所以 ICPMS 碰撞反应池 在使用之前,一定得“吹扫 排空”,

我这儿 用的是8升He小钢瓶,就放在 仪器背后;1/4英寸的管路 也缩短到 2米。

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2021/5/28 16:10:15 Last edit by timstoicpms
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原文由 timstoicpms(timstoicpms) 发表:
(1)缩短 He钢瓶与 ICP-MS的距离,用厂家原配的6米、1/8英寸外径不锈钢管路 作为连接。 第一天傍晚设置 1.0 ml/min 过夜吹扫,第二天开始测试;如果你使用 1/4英寸管路、长距离管路 传输 He,那就意味着 管路中“陈旧He”很多,需要很长时间才能被吹扫、被“新鲜He”置换掉。

(2)测试调谐完成后,在“添加到队列”之前,把进样管/进样针 插入纯水或者稀硝酸,在调谐界面把 碰撞池He流量从 设定的流量(比如4.0~4.5ml/min),拖动到 最大12ml/min,保持5分钟。这段时间正好可以利用起来,清洗进样系统。5分钟后,把 He流量降回之前的设定值,保存批处理,发送到队列开始测试。



(3)测试时使用 HMI模式,雾化器载气 ~0.85 L/min,稀释气 0.30~0.40 L/min


感谢大侠提供的思路,用您的思路试了下。

运行前将He设成12ml/min,保持了20min左右。管路也是不锈钢。HMI稀释模式倒没去调它。因为我的理解是:HMI模式降低makeup气压,升高Dilution气压说白了,就是高基体Ar气稀释模式,和我用稀酸稀释本质上没什么区别,就没试。因为我稀酸打是没有内标异常上升的!

目前项目周转,每天其实都有做样。也一直在用KED模式,理论上这个气也在不停的用。尽管这个用的很省。。。

另外稳定时间,实际上在正式上样前,我们是规定至少稳定15min,并且用稀释剂+在线内标三通平衡的。在正式做样前也会进至少10针wash,确保内标稳定,待测目标元素CPS本底正常才开始实验。

所以还是没找到问题
光哥
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原文由 wc89(v2714609) 发表:

感谢大侠提供的思路,用您的思路试了下。

运行前将He设成12ml/min,保持了20min左右。管路也是不锈钢。HMI稀释模式倒没去调它。因为我的理解是:HMI模式降低makeup气压,升高Dilution气压说白了,就是高基体Ar气稀释模式,和我用稀酸稀释本质上没什么区别,就没试。因为我稀酸打是没有内标异常上升的!

目前项目周转,每天其实都有做样。也一直在用KED模式,理论上这个气也在不停的用。尽管这个用的很省。。。

另外稳定时间,实际上在正式上样前,我们是规定至少稳定15min,并且用稀释剂+在线内标三通平衡的。在正式做样前也会进至少10针wash,确保内标稳定,待测目标元素CPS本底正常才开始实验。

所以还是没找到问题


  这里的稳定时间是指“从STD模式切换到He模式”的时间,并不是“点火之后”或者“进实际样品”的稳定时间。

从STD/Cool/H2等模式切换到He模式,管路、透镜、ICP条件都会有一些变换,这个时间并不是0秒
wc89
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原文由 光哥(xsh1234567) 发表:

  这里的稳定时间是指“从STD模式切换到He模式”的时间,并不是“点火之后”或者“进实际样品”的稳定时间。

从STD/Cool/H2等模式切换到He模式,管路、透镜、ICP条件都会有一些变换,这个时间并不是0秒


,这......He模式不就是碰撞气动态歧视去掉大部分质谱干扰么?在batch前方法编的时候这部分参数就从调谐文件中调用吧。batch提交前都已经提交参数到仪器了吧.....它相当于在我点火后,进实际样前,一直都是He模式啊

您说的稳定时间是从标准模式到He模式的切换时间???

这是核心操作吗?不说担心管路中的He“陈旧”吗?我让它大流速冲洗了呀???

您把我搞蒙了!
wc89
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我再更新下全扫的数据,对这个样品同体积稀释倍数下的半定量数据,短接三通,更换蠕动管后采集。

因为理论上说出现样品内标收率上升,一定是样品采集的时候采集到同质荷比才产生增加。

 45  Sc 72  Ge 89  Y 115  In 209  Bi 
Sample NameConc.CPSConc.CPSConc.CPSConc.CPSConc.CPS
Blk wash<388.068428.58<1.1010<79.015142.86<61.2111285.7752.364715.14
Blk wash<388.0680<1.1010<79.0150<61.211714.3<33.3141714.4
Blk wash<388.0680<1.1010<79.0150<61.211428.58<33.3141142.91
Blk wash<388.0680<1.1010<79.015142.86<61.211285.72<33.3141142.91
Blk wash<388.0680<1.1010<79.015142.86<61.2110<33.3141000.04
Blk wash<388.0680<1.101142.86<79.0150<61.211428.58<33.314571.44
Blk wash<388.0680<1.1010<79.0150<61.2111000.04<33.314571.44
Blk<388.0680<1.1010<79.0150<61.2110<33.3140
SP-1-1<388.0680<1.1010<79.0150<61.211142.86<33.314142.86
SP-1-1<388.0680<1.1010<79.0150<61.2110<33.314714.31
SP-1<388.0680<1.1010<79.0150<61.2110<33.314571.44
SP-1<388.0680<1.1010<79.0150<61.2110<33.3140
           
           
sp-1为0.3ml定容到10ml         
sp-1-1为sp-1再稀释10倍         

数据结果让我非常困惑,完全不知道哪里有问题。再下去变玄学了
               
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2021/6/3 10:46:54 Last edit by v2714609