主题:【已应助】用水乙腈(3:2)溶解的样品,遇到纯乙腈会析出沉淀,这种情况下可以进样制备吗?

浏览 |回复18 电梯直达
Insp_7c71347b
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
洗脱程序水乙腈,70%水到60%水,再冲5min乙腈后回到初始流动相。
最佳答案:叮叮当当回复于2021/07/17
时间长了会柱子会压力升高或者堵,血浆样品与乙腈1:2可以沉淀99%的蛋白,沉淀能力很强。而且一般洗脱条件中乙腈用不到100%,这样对色谱柱不太好,最高90%足矣。最保险的方法还是把样品再处理地干净一些。
为您推荐
通标小菜鸟
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
如果纯乙腈会析出沉淀,那程序洗脱设置能否不设置100%乙腈,稍微带点水,比如高有机相的时候90%乙腈+10%水,进完样后多用混合流动相冲洗冲洗柱子
该帖子作者被版主 v325530640积分, 2经验,加分理由:优质回复
叮叮当当
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
时间长了会柱子会压力升高或者堵,血浆样品与乙腈1:2可以沉淀99%的蛋白,沉淀能力很强。而且一般洗脱条件中乙腈用不到100%,这样对色谱柱不太好,最高90%足矣。最保险的方法还是把样品再处理地干净一些。
该帖子作者被版主 v325530650积分, 2经验,加分理由:优质回复
安平
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
最好多做一些溶解性的实验,不止是纯乙腈的。

多个比例的乙腈水,都实验一下。具体的溶解度最好测定一下。

液相的基本要求是样品可以溶解于流动相。

此外进样的初始时间内,色谱柱前部还存在有相当于浓缩的过程,如果组分的溶剂度低,不建议进样。
安平
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
Insp_7c71347b
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:如果纯乙腈会析出沉淀,那程序洗脱设置能否不设置100%乙腈,稍微带点水,比如高有机相的时候90%乙腈+10%水,进完样后多用混合流动相冲洗冲洗柱子
嗯嗯谢谢,我试试85%的乙腈会不会析出沉淀
Insp_7c71347b
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 叮叮当当(Insm_af467669) 发表:时间长了会柱子会压力升高或者堵,血浆样品与乙腈1:2可以沉淀99%的蛋白,沉淀能力很强。而且一般洗脱条件中乙腈用不到100%,这样对色谱柱不太好,最高90%足矣。最保险的方法还是把样品再处理地干净一些。
谢谢您的回复,不是血浆样品,这个皂苷样品很奇怪,遇到乙腈就会析出沉淀,加水后又会迅速溶解。我先把100%乙腈洗脱改掉
Insp_7c71347b
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 安平(byron1111) 发表:怎么知道是血浆样品?
不是血浆,是中药提取物,主要含皂苷类成分
lijing320323
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
Insp_7c71347b
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 安平(byron1111) 发表:最好多做一些溶解性的实验,不止是纯乙腈的。多个比例的乙腈水,都实验一下。具体的溶解度最好测定一下。液相的基本要求是样品可以溶解于流动相。此外进样的初始时间内,色谱柱前部还存在有相当于浓缩的过程,如果组分的溶剂度低,不建议进样。
应该是随着乙腈的增加溶解度降低。进样后,60%水之前绝大部分峰都跑出来了。剩下的就是纯乙腈冲出来的(猜测是一些疏水性强的物质)。
小维
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵