主题:HPLC样品组分分离不开怎么办

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Ins_1048f27a
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发酵液测组分用HPLC,标品打了,可以分开,但是打样品的时候峰就分不开了。用的C18反向色谱柱,流动相是甲醇:水:冰醋酸,试了流动相甲醇和水的配比,还是分不开。求高人指点!
图一是标品,图二是样品
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安平
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          发酵液的组成较为复杂,未必一定能够将目标物和杂质分离开。

          可以考虑调节一下流动相的组成,尽量改善分离度。

          如果是反相色谱系统,一般考虑提高流动相中水相的比例,增加保留,改善分离。

          只要杂质不会严重干扰目标组分的积分,那么就可以定量。
Ins_1048f27a
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原文由 安平(byron1111) 发表:                      发酵液的组成较为复杂,未必一定能够将目标物和杂质分离开。                      可以考虑调节一下流动相的组成,尽量改善分离度。                      如果是反相色谱系统,一般考虑提高流动相中水相的比例,增加保留,改善分离。                      只要杂质不会严重干扰目标组分的积分,那么就可以定量。
我是调整了流动相比例,减少甲醇,到达一定极限的时候,80min标品都出峰不完全了,而样品还是分离不开,挤在一起