主题:【已应助】稀释的问题

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冰饼兵
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增加稀释度的操作中,为什么移液枪的枪头不能接触稀释液面,是会担心有细菌污染吗,可是枪头是经过灭菌的,9毫升的生理盐水也是灭菌的,操作的环境也无菌环境呀?想不明白,求各位大神指点
最佳答案:dahua1981回复于2021/07/28
我认为主要还是为了避免污染,虽然枪头是灭菌的,但是枪体却无法完全灭菌,而且在操作过程中难免溶液接触枪体,故稀释过程不能接触稀释液面。
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JOE HUI
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主要是枪没灭菌,枪有影响:

实验中,需要用移液枪来移液,枪头灭菌了但枪不能灭菌,怎么实现无菌操作?要移的液体量只有几十微升用移液管不好实现,主要是担心枪里面的无菌情况,在吸打时那些空气是直接接触液体的呀。

支招:

1、有可以灭菌的移液枪,如果没有 还是用吸管好 别图省事~或者可以用紫外线进行照射,表面灭菌还可以。

2、枪头灭菌,移液枪70%酒精擦拭。移液时注意慢吸快打,移液量不超过枪头2/3即可。

3、你可以在枪头上部塞上脱脂棉再去灭菌,然后再使用。

4、我看用移液枪的问题关键在于你要求的无菌级别高低以及操作的规范和熟练程度。我现在做活菌计数就用移液枪做梯度稀释,没有问题,很少有杂菌污染。

体会:

移液枪可以浸泡在75%酒精中过夜,甚至更长时间;

移液时枪尽量不要碰到器皿壁;

最好在超净工作台上操作,超净工作台内的空气可以认为是无菌的,这样吸进枪管中的空气很少,可以认为样品不会被污染;

操作熟练程度关系实验成败,建议你先用普通肉汤培养基,和其他非实验菌进行操作练习,熟练后再进行你的正式试验。

关键是灭菌的tip头是要有脱脂棉的tip头,然后对移液枪进行表面消毒就行了。

其实不用那么麻烦,你可以将一般的移液枪放在超净台中,打开紫外灯灭菌半小时,使用时先将移液枪用(70%-75%)酒精棉擦拭表面,然后在酒精灯火焰上2cm左右处将移液枪反复吹打几次即可。有网友是这么操作的,也没有出现染菌的问题!

移液枪放置在超净台中和台子一起紫外灭菌半小时;枪身用75%酒精擦拭;枪头塞入脱脂棉一起灭菌;这样使用应该没问题,以网友实践经验来说。

枪头是经过高压消毒的,直接接触液体的是枪头又不是别的,网友觉得剩下的无非就是无菌操作的问题了,紫外线消毒移液枪就足够了,还泡啥泡,多余。
dahua1981
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我认为主要还是为了避免污染,虽然枪头是灭菌的,但是枪体却无法完全灭菌,而且在操作过程中难免溶液接触枪体,故稀释过程不能接触稀释液面。
冰饼兵
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原文由 JOE HUI(xurunjiao5339) 发表:主要是枪没灭菌,枪有影响:实验中,需要用移液枪来移液,枪头灭菌了但枪不能灭菌,怎么实现无菌操作?要移的液体量只有几十微升用移液管不好实现,主要是担心枪里面的无菌情况,在吸打时那些空气是直接接触液体的呀。支招:1、有可以灭菌的移液枪,如果没有 还是用吸管好 别图省事~或者可以用紫外线进行照射,表面灭菌还可以。2、枪头灭菌,移液枪70%酒精擦拭。移液时注意慢吸快打,移液量不超过枪头2/3即可。3、你可以在枪头上部塞上脱脂棉再去灭菌,然后再使用。4、我看用移液枪的问题关键在于你要求的无菌级别高低以及操作的规范和熟练程度。我现在做活菌计数就用移液枪做梯度稀释,没有问题,很少有杂菌污染。体会:移液枪可以浸泡在75%酒精中过夜,甚至更长时间;移液时枪尽量不要碰到器皿壁;最好在超净工作台上操作,超净工作台内的空气可以认为是无菌的,这样吸进枪管中的空气很少,可以认为样品不会被污染;操作熟练程度关系实验成败,建议你先用普通肉汤培养基,和其他非实验菌进行操作练习,熟练后再进行你的正式试验。关键是灭菌的tip头是要有脱脂棉的tip头,然后对移液枪进行表面消毒就行了。其实不用那么麻烦,你可以将一般的移液枪放在超净台中,打开紫外灯灭菌半小时,使用时先将移液枪用(70%-75%)酒精棉擦拭表面,然后在酒精灯火焰上2cm左右处将移液枪反复吹打几次即可。有网友是这么操作的,也没有出现染菌的问题!移液枪放置在超净台中和台子一起紫外灭菌半小时;枪身用75%酒精擦拭;枪头塞入脱脂棉一起灭菌;这样使用应该没问题,以网友实践经验来说。枪头是经过高压消毒的,直接接触液体的是枪头又不是别的,网友觉得剩下的无非就是无菌操作的问题了,紫外线消毒移液枪就足够了,还泡啥泡,多余。
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