主题:【已应助】eps中DNA含量检测

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冰饼兵
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想请问大神们,现在都用什么方法测污泥EPS中DNA的含量啊,急!望老师不吝赐教
推荐答案:JOE HUI回复于2021/10/04
DNA的测定采用修正的Brunk方法[ ],主要试剂为:用100 mM NaCl中配制0.2 ppm DAPI试剂 (4, 6-二咪基-2-苯基吲哚),10 mM EDTA,10 mM TRIS,pH 7。步骤: 将100 μL的 EPS 提取液用吸液管装入试管中并加入2.5 ml上述试剂。直接测定样品(激发波长360nm、发射波长450 nm),Salmon实验采用标准方法。
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mingxiaoyan
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EPS中DNA的测定(二苯胺比色法)
1、二苯胺试剂:1g结晶二苯胺,溶于100ml分析纯冰醋酸中,加60%过氯酸10ml混匀,临用前加入1ml1.6%乙醛溶液。
2、测定步骤: 
  ① 取EPS样品2ml置于哈希管中; 
  ② 加入4ml二苯胺试剂; 
③ 60℃水浴1h;
  ⑤  冷却后,在595nm处测定吸光度,代入标线计算。
标线的配置使用小牛胸腺DNA。 
溶解态EPS是在污泥混合液中以悬浮态存在,沉淀上清液或者低速离心上清液即是;结合型EPS分为LB-EPS和TB-EPS,LB-EPS是通过高速离心提取(文献中是5000r/min),而TB-EPS需要化学试剂或者其他加热或者超声提取。我们采用的CER法是离心是10000r/min,所以两部分都包括了。 
JOE HUI
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DNA的测定采用修正的Brunk方法[ ],主要试剂为:用100 mM NaCl中配制0.2 ppm DAPI试剂 (4, 6-二咪基-2-苯基吲哚),10 mM EDTA,10 mM TRIS,pH 7。步骤: 将100 μL的 EPS 提取液用吸液管装入试管中并加入2.5 ml上述试剂。直接测定样品(激发波长360nm、发射波长450 nm),Salmon实验采用标准方法。