主题:【已应助】葡聚糖凝胶色谱柱G10

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gaolingtan
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在采用G10凝胶色谱柱做头孢类聚合物检测过程中,依据药典方法,采用水做流动相进样葡聚糖2000时出现如下肩峰/峰分叉的情况;

期间有更换新色谱柱、采用0.5mol/L的NaOH及0.5mol/L的NaCl混合溶液对色谱柱进行再生处理、新配置葡聚糖2000、甚至尝试采用屈臣氏蒸馏水作为流动相均未得到改善。这会是什原因引起的呢?

推荐答案:初心回复于2021/12/01
柱效降低了,建议用温水冲洗1h,然后以水为流动相,低流速冲洗过夜试试
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mingxiaoyan
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mingxiaoyan
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柱容量下降也会造成这种情况,既然更换新柱子也没改观,主要还是考虑浓度的问题
歌名
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应该是有几个物质没分开,尝试梯度洗脱,乙腈和磷酸缓冲盐做流动相,流速稍微降低一点点,0.5-0.8ml/min左右
hujiangtao
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初心
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柱效降低了,建议用温水冲洗1h,然后以水为流动相,低流速冲洗过夜试试
gaolingtan
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原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
应该是有几个物质没分开,尝试梯度洗脱,乙腈和磷酸缓冲盐做流动相,流速稍微降低一点点,0.5-0.8ml/min左右
这个目前标准已定,且是药典方法。流速就是0.5ml/min,进的样品是葡聚糖2000,
gaolingtan
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原文由 初心(m3170710) 发表:
柱效降低了,建议用温水冲洗1h,然后以水为流动相,低流速冲洗过夜试试
这个我有试过,峰型没有得到改善  还换用新柱进样也是一样没有变化