主题:【已应助】液相色谱问题

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Ins_83ef29b2
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出来的峰老是拖尾该怎么办  跪求
推荐答案:123回复于2022/05/06
可能的原因:

(1)定体积量管与阀连接处出现死区(死体积)

(2)进样针(阀)内有污染或不干净

(3)色谱柱老化、柱效低

(4)色谱柱选择不当,试样与固定相间有作用

(5)进样技术差

(6)样品在流动相中溶解度小

(7)进样量太大(过载)

(8)色谱柱进出口的连接管连接处出现死区(死体积)

(9)检查预柱(保护住)

(10)二级保留效应,反相模式
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JOE HUI
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楼主,可以参考如下资料:
拖尾原 因 解决方法
1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱
2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱
3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱
4、流动相PH选择错误 4、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰
5、样品与填料表面的溶化点发生反应图 5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱
F、 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
原 因 解决方法
1、柱外效应 1、a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路) b、使用小体积的流通池
G、 K’增加时,脱尾更严重
原 因 解决方法
1、二级保留效应,反相模式 1、a、加入三乙胺(或碱性样品) b、加入乙酸(或酸性样品) c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品) d、更换一支柱子
2、二级保留效应,正相模式 2、a、加入三乙胺(或碱性样品) b、加入乙酸(或酸性样品) c、加入水(或多官能团化合物) d、试用另一种方法
3、二级保留效应,离子对 3、加入三乙胺(或碱性样品)
H、 酸性或碱性化合物的峰拖尾
原 因 解决方法
1、缓冲不合适 1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液
I、 额外的峰
原 因 解决方法
1、样品中有其他组份 1、正常
2、前一次进样的洗脱峰 2、a、增加运行时间或梯度斜率 b、提高流速
3、空位或鬼峰 3、a、检查流动相是否纯净 b、使用流动相作为样品溶剂 c、减少进样体积
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mingxiaoyan
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拖尾峰原因分析及解决方案

①柱过载

当样品量过多时会出现超载现象,包括质量过载和体积过载。

可通过降低样品量或者增加柱直径,采用较高容量的固定相来解决。

②峰干扰

其他杂峰的出现也会导致拖尾峰。

可通过增加样品净化程序,减少干扰。也可通过调整流动相提高分离度来解决问题。

③硅羟基作用

大多数情况我们都会用到反相色谱。以常用的C18柱为例,C18是被键合在载体硅胶表面的,理想的状态是流动相中的样品只和固定相C18发生作用,而实际上一半以上的硅胶表面并没有被键合上C18,所以硅胶表面会裸露出大量的硅羟基(Si-OH)。而单独的自由的硅羟基会和流动相中的样品发生作用,形成拖尾。

当样品中出现了碱性化合物,碱性基团更容易与色谱柱中的硅羟基发生作用形成拖尾峰。

在最近的十几年中,色谱柱主要以高纯度的硅胶为载体,从而使得硅胶表面尽可能减少自由的硅羟基。用来减少拖尾峰的产生。

那么对于过去的自由硅羟基较多的色谱柱可加三乙胺,与硅醇基作用钝化色谱柱。对硅胶载体为主的新型色谱柱,可增加缓冲液或盐的浓度来降低流动相PH值,纯化样品来抑制硅胶的离子化,从而达到改善拖尾的效果。


⑤柱塌陷或形成短路通道

色谱柱经过较高的压力后,柱头会发生塌陷。这种塌陷是不可逆转的,我们只能直接更换色谱柱。

⑥死体积或柱外体积过大

接头不合适就会产生死体积,死体积或柱外体积过大,就会导致样品在死体积处发生了滞留和扩散。这时一般建议在液相色谱中正确安装并且使用与您的仪器匹配的管线接头,以减少死体积的产生。

⑦柱效下降

当色谱柱经历过高温,强酸,或者一些极端使用方法导致固定相流失较多后,色谱柱中的自由硅羟基也会变得越来越多,从而更加容易造成拖尾峰。

另外,色谱柱在长时间使用特别是纯水经过反相柱之后固定相易流失,或折叠,也会导致柱效降低的情况。在冲洗色谱柱无法复原后,建议直接更换色谱柱。为延长柱寿命也可增加保护柱。
123
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可能的原因:

(1)定体积量管与阀连接处出现死区(死体积)

(2)进样针(阀)内有污染或不干净

(3)色谱柱老化、柱效低

(4)色谱柱选择不当,试样与固定相间有作用

(5)进样技术差

(6)样品在流动相中溶解度小

(7)进样量太大(过载)

(8)色谱柱进出口的连接管连接处出现死区(死体积)

(9)检查预柱(保护住)

(10)二级保留效应,反相模式
安平
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具体问题具体分析为好。

楼主具体开展什么项目的分析?详细描述具体分析条件为好。有图为好。

所有组分峰均拖尾,还是某些物质峰拖尾?



一般情况下,可能与HPLC系统连接不良、色谱柱不良、分析条件不良、溶剂选择不良等诸多方面的问题有关。

有水有渝
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具体执行的方法是哪个,拖尾到什么程度,针对性的提出问题才好回复
Ins_83ef29b2
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Insm_88d88352
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dadgoh
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