主题:【已应助】寡核苷酸纯化

浏览 回复18 电梯直达
abin230
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歌名
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可以去纯化一下在上机,纯化的话可以参考核糖纯化,量少用AKTA也方便,看回帖说可能是同分异构,我倒觉得不一定是,本身做LCMS测核酸的源内裂解干扰会比较大,严重的能达到50%以上,所以干扰峰也可能是其他物质源内裂解引起,纯化的话说不定能避免一下引起源内裂解干扰的物质
艳儿
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事情经过是这样的。有一个引物,这个序列里也没有其他可变化或者形成异构体的结构。大概10mg。取1mg,加4000微升水之后进样(用的制备的仪器)。发现峰很差,如图1。但是进了剩下的样(剩下的样里面没有加水)峰型不是这样,如图2。我觉得可能是水有问题。测了一下水的PH,是6.5,我配流动相用的水的PH是5.5。好像差别也不是很大。所以也不知道是什么原因。
艳儿
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原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:可以去纯化一下在上机,纯化的话可以参考核糖纯化,量少用AKTA也方便,看回帖说可能是同分异构,我倒觉得不一定是,本身做LCMS测核酸的源内裂解干扰会比较大,严重的能达到50%以上,所以干扰峰也可能是其他物质源内裂解引起,纯化的话说不定能避免一下引起源内裂解干扰的物质
这个是做制备的时候发现的,做的LCMS很好,没有分叉
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