三、检测方法的灵敏度、检出限和测定下限
(一)试剂空白值
试剂空白是由检测操作中所用溶剂、试剂和仪器以及操作产生的测定值,它来自溶剂、试剂和仪器含有的微量或痕量待测物或干扰物,来自操作误差。
试剂空白值的大小和变异直接影响检测方法的检出限、测定下限及测定结果的准确度和精密度等。
(二)灵敏度
检测方法的灵敏度是指标准曲线的斜率,就是使待测物的浓度通过光信号、电信号等响应值表现出来,而待测物单位浓度(或量)所对应的响应值即为灵敏度。
1.比色法和分光光度法灵敏度
比色法和分光光度法以标准曲线回归后的斜率表示方法灵敏度,斜率倒数表示计算因子。
2.原子吸收光谱法的灵敏度
以标准曲线回归后的斜率表示方法灵敏度;
另一种表示方法为特征浓度,即以能产生1%吸收(相当于0.0044吸光度单位)时溶液中待测物的浓度(μg/ml)或含量(ng)。
可以从标准曲线上得到吸光度为0.1000时的待测物的浓度值c(μg/ml),然后用下式计算:
特征浓度 = c ? 0.0044 / 0.100 = c ? 0.044
3.离子选择电极法的灵敏度
离子选择电极法在能斯特线性范围内,待测物每变化10倍的浓度所引起电位差的值表示方法灵敏度。
在理论上灵敏度=(2.303RT)/ZiF,
式中: R为气体常数8.314J?℃-1;
T为绝对温度(273 t),K;
Zi为被测离子的电荷数,
F为法拉第常数,9.6485?104C/mol。
对于1价离子在25℃时为59.16mV。实测时,在半对数坐标纸上,以待测物的各浓度作对数格的横坐标,测量电位值(mV)作纵坐标,绘制标准曲线。
从标准曲线上得到每改变10倍浓度所对应的电位差(mV),即为离子选择电极的灵敏度。
4.色谱法的灵敏度
色谱法和其他仪器方法以单位响应值(mm或mm2;μA或mV)所对应的待测物含量或浓度μg或mg/m3来表示。
(三)检出限和测定下限:
检测方法的检出限是在给定的概率P=95%(显著水准为5%)时,能够定性区别于零的待测物的最低浓度或含量。
检测方法的测定下限是在给定的概率P=95%(显著水准为5%)时,能够定量检测待测物的最低浓度或含量。
1.比色法和分光光度法的检出限和测定下限
在最佳测试条件下,以重复多次(至少6次)测定的试剂空白吸光度的3倍标准差,或吸光度0.02处所对应的待测物浓度或含量作为检出限值,两者中取其最大值。
以试剂空白吸光度的10倍标准差,或吸光度0.03处所对应的待测物浓度或含量作为测定下限值,两者中取其最大值。
2.原子光谱法的检出限和测定下限
在最佳测试条件下,以重复多次(至少10次)测定的约等于5倍预期测定下限浓度的含基待测物标准溶液吸光度的3倍标准差,所对应的待测物浓度或含量作为检出限值; 标准溶液浓度?3?标准差
检出限(μg/ml)=——————————————
标准溶液测得的平均浓度
以10倍标准差所对应的待测物浓度或含量作为测定下限值。
标准溶液浓度?10?标准差
测定下限(μg/ml)=——————————————
标准溶液测得的平均浓度
若检测结果低于测定下限,而高于检出限时,可报告此值。
若低于检出限时,则报告为“未检出”,在作数据统计时,以1/2检出限值参加统计。
3.色谱法的检出限和测定下限
色谱法(包括气相色谱法和高效液相色谱法等)和其它仪器方法,在最佳测试条件下,以记录仪2格或2倍噪声所对应的待测物浓度或含量作为检出限值;
以记录仪5格或5倍噪声所对应的待测物浓度或含量作为测定下限值。