紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】我们的岛津UV2450测的吸光度值为什么总是在变?

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huoyan2006
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我们实验室用的是岛津UV2450,进行样品吸光度检测的时候,吸光度值在总是在不停的变,一般都是短时间内缓慢或迅速地降低,这个时候如果用吸管吹打比色皿中的样品,吸光度值又会急骤升高(有时候还会降低),这是什么原因啊?小弟百思不得其解,请高手帮忙指点一下
推荐答案:zam0825回复于2007/07/26

你可以参比和样品都用参比液测一下基线,多测几次,看仪器有没有问题。若无问题应该是样品液有沉淀或反应,仔细观察一下,找出问题所在。
补充答案:

初学者&九点虎回复于2007/07/26

哦,这方面没有做过,你把谱图传上来,让大家帮你分析

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原文由 zhouyuhu 发表:
你们什么样品,测定什么?变化范围多少?


样品是大鼠PC12细胞提取的总蛋白,测其中巯基亚硝基化的DDAH-1(也是一种蛋白)吸光度是341nm.我所查到的文献没有提到它的变化范围.
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原文由 huoyan2006 发表:
我们实验室用的是岛津UV2450,进行样品吸光度检测的时候,吸光度值在总是在不停的变,一般都是短时间内缓慢或迅速地降低,这个时候如果用吸管吹打比色皿中的样品,吸光度值又会急骤升高(有时候还会降低),这是什么原因啊?小弟百思不得其解,请高手帮忙指点一下

你可以参比和样品都用参比液测一下基线,多测几次,看仪器有没有问题。若无问题应该是样品液有沉淀或反应,仔细观察一下,找出问题所在。
初学者&九点虎
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哦,这方面没有做过,你把谱图传上来,让大家帮你分析
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原文由 zam0825 发表:
原文由 huoyan2006 发表:
我们实验室用的是岛津UV2450,进行样品吸光度检测的时候,吸光度值在总是在不停的变,一般都是短时间内缓慢或迅速地降低,这个时候如果用吸管吹打比色皿中的样品,吸光度值又会急骤升高(有时候还会降低),这是什么原因啊?小弟百思不得其解,请高手帮忙指点一下

你可以参比和样品都用参比液测一下基线,多测几次,看仪器有没有问题。若无问题应该是样品液有沉淀或反应,仔细观察一下,找出问题所在。


我用去离子水测过,没有出现类似的问题,不知道是否能够说明是样品液发生了沉淀或反应?
huoyan2006
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原文由 zhouyuhu 发表:
哦,这方面没有做过,你把谱图传上来,让大家帮你分析


谱图是指这种蛋白在某个波长范围内的吸收光谱吗?我很外行
huoyan2006
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今天用参比液测了一下,不是仪器的问题,又用其它方法重新提了一次蛋白,吸光度值稳定多了,以前出现的问题可能是因为蛋白质溶解不充分,测吸光度时形成了沉淀,再加上比色皿清洗得不干净 非常感谢版主和zam0825的帮助!
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