主题:请问如何使用HPLC-ELSD,在使用过程中一般要注意什么?

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yandongmei
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请问如何使用HPLC-ELSD,在使用过程中一般要注意什么?
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rfu
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ELSD,蒸发光散射检测器,是一种靠被测定物在检测器中被流动相蒸发,而被测定物形成微颗粒对光的散射强度来测定的检测器. 检测器的原理十分简单,从HPLC色谱柱末端流出的溶剂在空气或氮气流中被蒸发,被分析的溶质不能蒸发,但是它形成雾状小颗粒进入光通道,从而光线被反射和折射,测量散射光的强度来量度流出物中溶质量的多少<br>
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所以要考虑被测定物的沸点和流动相的沸点有相当的差距.然后要考虑检测器  ELSD可以看作是一种通用型检测器,一切在进入光通道之前不挥发的溶质都会有响应,几乎所有的溶剂包括酮类、酯类、氯化物和芳香族化合物都可以在复杂组成里使用,其中水的含量可达20%,检测器本身在梯度洗脱中也可以得到很好的结果,使用起来简单皮适,在连续操作中甚至溶剂成分改变时基线只有很小的漂移。但是和其他检测器一样也有某些缺点,它需要干燥经过滤的流量在1-5L/min的空气,因为一个标准的高压空气或氮气在4 h之内就会用光,所以我们建议或是使用压缩空气或是使用有液氮作气源的氮气发生器。含有蒸发溶剂的流出物要排出室外或排放到通风橱里。虽然有机离子如三乙  ELSD可以看作是一种通用型检测器,一切在进入光通道之前不挥发的溶质都会有响应,几乎所有的溶剂包括酮类、酯类、氯化物和芳香族化合物都可以在复杂组成里使用,其中水的含量可达20%,检测器本身在梯度洗脱中也可以得到很好的结果,使用起来简单皮适,在连续操作中甚至溶剂成分改变时基线只有很小的漂移。但是和其他检测器一样也有某些缺点,它需要干燥经过滤的流量在1-5L/min的空气,因为一个标准的高压空气或氮气在4 h之内就会用光,所以我们建议或是使用压缩空气或是使用有液氮作气源的氮气发生器。含有蒸发溶剂的流出物要排出室外或排放到通风橱里。虽然有机离子如三乙胺和乙酸在低含量是可以作流动相,但是无机离子是不可以作流动相的。胺和乙酸在低含量是可以作流动相,但是无机离子是不可以为了扩大线性响应的范围,需要调节雾化气的流速和蒸发腔的温度,以便优化气溶胶的颗粒,使其相对颗粒度更为均匀,虽然含氯溶剂有不同的表现,但绝大多数溶剂得到类似的结果。最后,响应值还决定于被测定溶质的折光指数,因而类脂的分子结构的不同会影响其响应值。所以不同种类的类脂具有不同的响应值,但是同一种类脂中不同的分子类别其响应值变化不大。但是它们的灵敏度和峰宽有密切的关系,所以应优化使用梯度洗脱的方式,在这样的情况下峰宽是近乎不变的。在等度分析条件下,一种分子类别的表观响应因子有逐步增加倾向。作流动相的。设定的参数要合适.<br>
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实际上,在使用ELSD进行定量分析时,首先要优化分离的条件,然后使用和被分析类脂物结构近似的类脂物作标准物质进行校准曲线的测定,仪器的操作参数如气体压力、蒸发温度和衰减要进行严格地标准化。如果此后无论出于何种原因要改变洗脱条件和检测器的设定,必须进行严格的重新校准。<br>
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xiaoxiao118
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原文由 rfu 发表:
ELSD,蒸发光散射检测器,是一种靠被测定物在检测器中被流动相蒸发,而被测定物形成微颗粒对光的散射强度来测定的检测器. 检测器的原理十分简单,从HPLC色谱柱末端流出的溶剂在空气或氮气流中被蒸发,被分析的溶质不能蒸发,但是它形成雾状小颗粒进入光通道,从而光线被反射和折射,测量散射光的强度来量度流出物中溶质量的多少<br>
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所以要考虑被测定物的沸点和流动相的沸点有相当的差距.然后要考虑检测器  ELSD可以看作是一种通用型检测器,一切在进入光通道之前不挥发的溶质都会有响应,几乎所有的溶剂包括酮类、酯类、氯化物和芳香族化合物都可以在复杂组成里使用,其中水的含量可达20%,检测器本身在梯度洗脱中也可以得到很好的结果,使用起来简单皮适,在连续操作中甚至溶剂成分改变时基线只有很小的漂移。但是和其他检测器一样也有某些缺点,它需要干燥经过滤的流量在1-5L/min的空气,因为一个标准的高压空气或氮气在4 h之内就会用光,所以我们建议或是使用压缩空气或是使用有液氮作气源的氮气发生器。含有蒸发溶剂的流出物要排出室外或排放到通风橱里。虽然有机离子如三乙  ELSD可以看作是一种通用型检测器,一切在进入光通道之前不挥发的溶质都会有响应,几乎所有的溶剂包括酮类、酯类、氯化物和芳香族化合物都可以在复杂组成里使用,其中水的含量可达20%,检测器本身在梯度洗脱中也可以得到很好的结果,使用起来简单皮适,在连续操作中甚至溶剂成分改变时基线只有很小的漂移。但是和其他检测器一样也有某些缺点,它需要干燥经过滤的流量在1-5L/min的空气,因为一个标准的高压空气或氮气在4 h之内就会用光,所以我们建议或是使用压缩空气或是使用有液氮作气源的氮气发生器。含有蒸发溶剂的流出物要排出室外或排放到通风橱里。虽然有机离子如三乙胺和乙酸在低含量是可以作流动相,但是无机离子是不可以作流动相的。胺和乙酸在低含量是可以作流动相,但是无机离子是不可以为了扩大线性响应的范围,需要调节雾化气的流速和蒸发腔的温度,以便优化气溶胶的颗粒,使其相对颗粒度更为均匀,虽然含氯溶剂有不同的表现,但绝大多数溶剂得到类似的结果。最后,响应值还决定于被测定溶质的折光指数,因而类脂的分子结构的不同会影响其响应值。所以不同种类的类脂具有不同的响应值,但是同一种类脂中不同的分子类别其响应值变化不大。但是它们的灵敏度和峰宽有密切的关系,所以应优化使用梯度洗脱的方式,在这样的情况下峰宽是近乎不变的。在等度分析条件下,一种分子类别的表观响应因子有逐步增加倾向。作流动相的。设定的参数要合适.<br>
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实际上,在使用ELSD进行定量分析时,首先要优化分离的条件,然后使用和被分析类脂物结构近似的类脂物作标准物质进行校准曲线的测定,仪器的操作参数如气体压力、蒸发温度和衰减要进行严格地标准化。如果此后无论出于何种原因要改变洗脱条件和检测器的设定,必须进行严格的重新校准。<br>
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其中水的含量可达20%是说分析方法里水的最高含量吗?如果水含量可以更高的话,那变化梯度的跨度最多可以达到多少呢?
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