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液相色谱（LC）

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主题：【讨论】使用液相色谱思考不清楚的几个问题

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kittie_qi

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发表于：2007/08/29 10:21:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1.我们使用的是岛津HPLC-MS2010型号.C18反相柱子.在做定性和定量分析时,经常用乙腈作为流动相.我想在这里问一下,为什么流动相乙腈和甲醇选择的区别是什么,在什么情况下应该使用乙腈,什么情况下应该使用甲醇?我想是不是从我们要分析的对象上考虑到被分析产物的极性和溶解药品的溶剂的极性来考虑啊?

2.等度洗脱和剃度洗脱的区别.等度洗脱是不是针对单一成分的药品啊,但是被分析组分比较多不容易洗脱的时候是不是我们应该选择剃度洗脱?

3.色谱柱子的分离柱效如何看?我们怎么判断这个柱子的分离柱效比较高呢?

4.色谱柱C18反相柱的成分是什么啊?在分析药品的时候我们如何来选择溶解药品的溶剂呢?经常听老板说不要用DMSO(二甲基亚砜),好象不主张用非极性的溶剂,对于柱子的损伤很大吗?除了应该选择使用和流动相相近性质的溶剂以外,还需要注意什么呢?

以上是我个人的一些疑难问题,我很想通过大家给予的讨论和答案来分享大家的工作经验.

也对上次我提出的问题得到大家的支持和帮助在此表示我忠心的感谢.说实在话我是刚入门来学习使用这个仪器的人,所以也看一些理论书但是实际工作经验在这个方面非常缺乏.在此我对这个版块的朋友们说声感谢,学习了很多东西.

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2007/8/29 10:44:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主，请恕我直言，我觉得您现在最主要的是找一些关于色谱和分析的基础资料来看一看，我相信您会感到很有帮助。就您提的问题，我简单说几点，乙腈和甲醇都是反相色谱里常用的流动相，不同的是乙腈的强度比甲醇更大一些；梯度洗脱最好在样品中同时存在易洗脱和强保留的组分时使用。另外，DMSO不是非极性溶剂，它是一种非质子化的较强的极性溶剂。

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2007/8/29 14:40:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1、甲醇和乙腈的区别：就乙腈代替甲醇做流动相而言，乙腈的黏度比甲醇小，可以使出峰时间提前，但不能改变分离效果。还有可能是乙腈价格较高。

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2007/8/29 14:52:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 kittie_qi 发表:
1.我们使用的是岛津HPLC-MS2010型号.C18反相柱子.在做定性和定量分析时,经常用乙腈作为流动相.我想在这里问一下,为什么流动相乙腈和甲醇选择的区别是什么,在什么情况下应该使用乙腈,什么情况下应该使用甲醇?我想是不是从我们要分析的对象上考虑到被分析产物的极性和溶解药品的溶剂的极性来考虑啊?

2.等度洗脱和剃度洗脱的区别.等度洗脱是不是针对单一成分的药品啊,但是被分析组分比较多不容易洗脱的时候是不是我们应该选择剃度洗脱?

3.色谱柱子的分离柱效如何看?我们怎么判断这个柱子的分离柱效比较高呢?

4.色谱柱C18反相柱的成分是什么啊?在分析药品的时候我们如何来选择溶解药品的溶剂呢?经常听老板说不要用DMSO(二甲基亚砜),好象不主张用非极性的溶剂,对于柱子的损伤很大吗?除了应该选择使用和流动相相近性质的溶剂以外,还需要注意什么呢?

以上是我个人的一些疑难问题,我很想通过大家给予的讨论和答案来分享大家的工作经验.

也对上次我提出的问题得到大家的支持和帮助在此表示我忠心的感谢.说实在话我是刚入门来学习使用这个仪器的人,所以也看一些理论书但是实际工作经验在这个方面非常缺乏.在此我对这个版块的朋友们说声感谢,学习了很多东西.

2、梯度洗脱不一定都分离混合样品，有时为了缩短出峰时间，也会采用，等度洗脱也可以分析混合样品。
3、柱效，如果是新柱子最好是用厂家评价柱效的物质评价一下，看是否与检验报告相符。旧柱子就是看锋型是否与以前的一样（相同条件相同物质).
4、一般柱子的成分都不太一样，应该是硅胶，（具体还应参照说明书）。
5、流动相的选择，大都是甲醇、乙腈、水等，在选择时不与柱子中的硅胶反应就可以了

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