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主题：【原创】流动相的故事1：流动相的配制

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yjxia
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发表于：2007/09/23 16:19:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被4077设置为精华；
甲醇水混合体系是HPLC系统中溶剂混合效果最差的。不同的溶剂混合方式，会使保留时间发生明显的差异。
    现配制60%甲醇水流动相，4.6*250 C18色谱柱。有四种不同的溶剂混合方式：1、将甲醇倒入400ml水中至1000ml；2、将水倒入600ml甲醇中至1000ml；3、分别量取600ml甲醇和400ml水混匀；4、用多元泵按比例6：4吸取纯甲醇和水。
    以上四种方式对保留时间有什么影响呢？以下就是运行的色谱图。

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mifeng7530
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2007/9/23 22:12:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主有心，多谢很直观！
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yjxia
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2007/9/24 8:31:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
希望大家支持后续部分。
补充一下：分别量取是最准确地；用多元泵分别吸取时由于梯度混合延迟时间，保留时间会延长。
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Easy-Boy
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2007/9/24 12:46:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不错，以前都没注意。 还有吗？期待中
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xulili_803011
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2007/9/24 14:46:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yjxia 发表:
希望大家支持后续部分。
补充一下：分别量取是最准确地；用多元泵分别吸取时由于梯度混合延迟时间，保留时间会延长。

感谢提出问题并解答

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sucan
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2007/9/24 15:16:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第三种才是正确的方法
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zhao1025
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2007/9/24 15:35:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
WHY  ??????????
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子非鱼
gaara2000
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2007/9/25 12:22:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3、分别量取600ml甲醇和400ml水混匀.图中的第二种是最准确的。
第一图和第四图把一个往另一个里加，因为甲醇和水任意比混溶，400ml甲醇和600ml水合起来的最终体积并不是1000ml，而是比1000少很多，多以第一图和第四图方法做出的流动相的比例其实不是6：4，直接吸取时混和器的影响会有延时，混和效果不会很好，有可能还会出现峰保留时间重现性不好的后果。所以，分别吸取然后混和，以混和物做流动相的方法是最好的
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lizn136
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2007/10/4 12:48:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有心人，应该是第二种比较好
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zms207
zms207
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2007/10/4 14:53:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yjxia 发表:
甲醇水混合体系是HPLC系统中溶剂混合效果最差的。不同的溶剂混合方式，会使保留时间发生明显的差异。
    现配制60%甲醇水流动相，4.6*250 C18色谱柱。有四种不同的溶剂混合方式：1、将甲醇倒入400ml水中至1000ml；2、将水倒入600ml甲醇中至1000ml；3、分别量取600ml甲醇和400ml水混匀；4、用多元泵按比例6：4吸取纯甲醇和水。
    以上四种方式对保留时间有什么影响呢？以下就是运行的色谱图。



楼主真的很细心，佩服，但这的原因具体是什么呢？
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echo_qf
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2007/10/4 15:59:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平常操作的话多用第四种方法吧,因为它很方便,楼主真细心,以后配好再用可以缩短保留时间的啊~~当然这更严谨些~~~只是需要调整流动相的时候就很烦了
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