是不是不做实际样品，只做标准品的时候没有这个问题？
那就说明样品太脏，柱子被污染了，进的样品数越多，柱子越脏。

建议：1、改变样品前处理方法。2、或者改成梯度洗脱，每一次进样，目标物出来以后，用高比例的有机相（对于C18、C8等反相色谱柱）冲洗色谱柱，可能会解决问题。