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主题：【已应助】单糖的PMP衍生化遇到问题，困扰许久，请各位大侠帮忙。

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发表于：2020/02/17 16:30:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我现在做标准单糖的PMP衍生化，用HPLC检测，用的是C18柱，对照品是葡萄糖、甘露糖、半乳糖，鼠李糖，阿拉伯糖和木糖，出现的问题是：各单糖对照品在同一个时间出峰，混和各单糖标品后也只出现一个峰，到底是怎么回事呢？？？流动相比例我也尝试很多种，可还是出现同样的问题，实验进行不下去，头疼啊！！！！具体的实验方法
单糖混合液的制备：
配制浓度为0.36μg单糖标准品溶液，取其100μL与0.6mol/LNaOH溶液100μL混合，再加入0.5mol/LPMP甲醇溶液200μL混匀。70℃水浴反应100min,冷却至室温10min后，加0.3mol/LHCl溶液200μL中和，加水900μL，混匀，加入氯仿1.5m萃取，混匀，静置，弃氯仿相，依法萃取3次，水相经0.45μm滤膜过滤后进样。
色谱条件：
进样量20μL，流动相为17%的乙腈-磷酸盐缓冲液，流速1mL/min
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2022/11/7 20:23:46 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主怎么解决的 我也遇到了这个问题 太难了
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2023/9/11 16:24:10 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_66420a99(Ins_66420a99) 发表:
楼主怎么解决的 我也遇到了这个问题 太难了
请问你们解决了吗？我也是PMP的峰特别高，单糖标准品很低。
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