主题:【第十三届原创】低溶度溶液如何稀释最准确?

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歪果仁zZ
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低溶度溶液如何稀释最准确?



在仪器社区,不管是色谱版面、气相版面、液质版面等等,经常有版友询问如何配制低浓度溶液,如何配制的最准确,现在的仪器灵敏度高了,大家对浓度的准确度要求也越来越高,今天就为大家分享如何快速准确的计算配制低浓度溶液的方法,基本思路是什么。

我们针对这个版友的问题:“标准品是1mg/ml的溶液,需要配置0.4ug/ml的标准品溶液,没有10ul的移液枪,怎么配置?是逐级稀释多次还是尽量少次数?求详细点,谢谢了。”

我们在配制低浓度溶液的思路,一定是稀释次数尽量少,因为操作越繁琐,我们可能出现的误差就越大,回头再追究原因时越复杂;第二是考虑好配制的溶液大约需要多少体积,不能多配制也不要少配制,例如一般液质联用实验的标准溶液需要的量很少,几百微升完全够用,装在2 mL的EP管内方便储存,没有必要稀释时配制2 mL以上的体积,那样费时费力;第三考虑好我们现有的移液枪,哪个最近经过校准,哪个是移液正常的移液枪,我们再根据现有的移液器去完成任务。

回到版友的提问,标准品是1 mg/ml的溶液,需要配置0.4 ug/ml的标准品溶液,没有10 ul的移液枪,怎么配置?我们经常使用的操作是取10 ul的1 mg/ml标准溶液,添加990 ul稀释液,这样的稀释倍数是100倍,即1 mg/ml稀释成了10 ug/ml;取100 ul的1 mg/ml标准溶液,添加900 ul稀释液,这样的稀释倍数是10倍,即1 mg/ml稀释成了100 ug/ml;取40 ul的10 ug/ml标准溶液,添加960 ul稀释液,即1 mg/ml稀释成了400 ng/ml。

因此这个问题我会如下操作:

1.取100 ul的1 mg/ml标准溶液,添加900 ul稀释液,这样的稀释倍数是10倍,即1 mg/ml稀释成了100 ug/ml;

2.取100 ul的100 ug/ml标准溶液,添加900 ul稀释液,这样的稀释倍数是10倍,即100 ug/ml稀释成了10 ug/ml;

3.取40 ul的10 ug/ml标准溶液,添加960 ul稀释液,即1 mg/ml稀释成了400 ng/ml。

如果有10 uL的移液枪,两步就可以完成标准溶液的配制。此类方法在配制标准曲线浓度时很便捷,大家可以多加练习便可以掌握。

下面分享几位版主的优质回答:

未来工程师:“一次稀释误差产生次数为1,误差值较大,多次稀释产生误差次数多,误差理论值比较大,但是实际会有正负误差,可能存在正负相消的情况。10倍以内一次稀释,10以外多次比较好。”

Hujiangtao:“需要多次稀释,10ul的枪取样太少了误差太大,一般我们配置标准品最少吸取25ul以上,楼主的浓度可以先吸取100ul定容到25ml,得到4ug/ml中间液,然后吸取4ug/ml 100ul加900ul流动相就得到0.4ug/ml的了。”

砂锅粥:“相当于稀释2500倍(1mg/mL→0.4μg/mL),这个倍数很难一次稀释。可以进行2步稀释,比如第一次稀释25倍,第二次稀释100倍。

举个栗子:移取4mL标液,定容到100mL,此步稀释25倍,此时浓度是0.04mg/mL(40μg/mL),接着再移取稀释后的标液1mL,定容到100mL,此步稀释100倍,此时的浓度就是0.4μg/mL。”

最后感谢仪器信息网提供这个给大家互相交流学习的平台!





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wazcq
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李贝
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一般稀释到一个中间浓度,再稀释吧?也就是逐级稀释。
另外想问LZ,你的稀释方法,不定容吗?不定容的稀释,采取体积相加的办法,误差大不大?
歪果仁zZ
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原文由 李贝(sunny100) 发表:一般稀释到一个中间浓度,再稀释吧?也就是逐级稀释。另外想问LZ,你的稀释方法,不定容吗?不定容的稀释,采取体积相加的办法,误差大不大?
误差还好,用的是艾本德的自动移液器
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