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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】色谱图基线问题

浏览0 回复7 电梯直达
迪奥
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发表于：2021/12/22 22:51:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
跑出来的色谱图基线一直是波动锯齿状，尤其是前20分钟，上一个柱子跑的图没有这种情况，换了根新柱子就变成这样了，求大神指教一下问题在哪
推荐答案：mingxiaoyan回复于2021/12/23
有如下可能：
1、流通池有东西
流通池里面可能有东西，出不来，在那儿来回。建议：换个流动相能走平之后，再换回去，看看能否走平（波长不要调）
2、压力脉动
3、有气泡
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mingxiaoyan
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2021/12/23 15:00:59 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有如下可能：
1、流通池有东西
流通池里面可能有东西，出不来，在那儿来回。建议：换个流动相能走平之后，再换回去，看看能否走平（波长不要调）
2、压力脉动
3、有气泡
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JOE HUI
xurunjiao5339
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2021/12/23 15:56:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主可以排查下:1.流动相里面有气泡.可以通过观察泵压是否稳定,一般波动很小,否则应赶气泡不仅是流动相的,有的气泡在泵头应用注射器抽头；
2.色谱柱问题.重新换了根柱子依然出现锯齿状,可排除柱子原因,可用二通不接色谱柱,用50%异丙醇冲洗包括检测器可能被污染,处理方法很多,你可搜索一下；
3.排除流动相原因可用纯甲醇冲洗观察,另外甲醇又是赶气泡的一个比较好的溶剂；
不在现场,只能简单判断,放心,不是大问题!若不行再慢慢排查,
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安平
byron1111
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2021/12/24 9:14:51 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主详细说说具体分析条件为好，什么流动相，什么柱子，什么样品？


流动相是单泵输送还是两相输送？

继续再进样的话 ，谱图还是这个状态么？



看上去像是混合不良所致，有可能系统存在气泡等问题
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hnteng
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2021/12/24 10:13:07 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是应该是有气泡。
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恩恩妍妍
Insm_f101f0ba
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2021/12/24 13:12:12 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新柱子里的有机相残留吧，有没有用之前先用流动相平衡
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Ins_2d6846ba
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2021/12/25 9:00:46 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新购色谱柱在使用之前，有必要进行活化操作，以便延长色谱柱的使用寿命，不同类型的色谱柱有不同的活化方法，下面就一些常规的液相色谱柱进行活化方法的介绍：

1

常规反相色谱柱：如最常用的C18柱，先用甲醇或乙腈冲洗20-30倍的柱体积，然后再用流动相平衡10-30倍柱体积。（若使用含盐流动相，则需要使用含原有比例但不含盐的流动相进行中间过渡，以防色谱柱堵塞）
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dadgoh
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2021/12/26 6:59:24 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
使用梯度了吗？
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