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主题：【求助】关于酶的稀释和保存

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warlf

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发表于：2008/11/27 08:23:46 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

由于要测一些酶的活性
实验室订购了一下一些酶（试剂）：

辣根过氧化物酶
葡萄糖氧化酶
磷酸葡萄糖变位酶
6-磷酸葡萄糖脱氢酶
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（辅酶Ⅱ，NADP+）
尿嘧啶核苷-5'-二磷酸葡萄糖（UDPG）
D-果糖-6-磷酸二钠盐（6-磷酸果糖）
D-葡萄糖-1-磷酸二钠盐（1-磷酸葡萄糖）

现在要稀释这些酶（试剂）
1.用蒸馏水稀释可以吗？如果不可以，用什么缓冲剂比较好？
2.稀释后的溶液可以长时间保存吗？如不能，最长的时间是多久？
小弟初入此道，望各位大侠细心解答，不胜感激！！

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2008/11/27 9:24:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 warlf 发表:
由于要测一些酶的活性
实验室订购了一下一些酶（试剂）：

辣根过氧化物酶
葡萄糖氧化酶
磷酸葡萄糖变位酶
6-磷酸葡萄糖脱氢酶
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（辅酶Ⅱ，NADP+）
尿嘧啶核苷-5'-二磷酸葡萄糖（UDPG）
D-果糖-6-磷酸二钠盐（6-磷酸果糖）
D-葡萄糖-1-磷酸二钠盐（1-磷酸葡萄糖）

现在要稀释这些酶（试剂）
1.用蒸馏水稀释可以吗？如果不可以，用什么缓冲剂比较好？
2.稀释后的溶液可以长时间保存吗？如不能，最长的时间是多久？
小弟初入此道，望各位大侠细心解答，不胜感激！！

因为你的酶比较多,没有确切一定缓冲液适合所有的酶的.

如果真是一定要某个溶液去稀释的话,用20%甘油.

分装后-20度冰箱冷冻保存.时间基本上很长.最长时间不能确定.

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dong3626

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2008/11/27 18:39:28 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

感觉酶的保藏和分装，首先是看试剂公司给你们提供的说明书操作，如果没有，看酶是什么形态的，固体粉末还是液体的；
还有就是你做什么样的实验，根据你的实验情况，来选择稀释液，蒸馏水并不适合稀释这些酶的。
因为有些酶需要保存在零下20度甚至液氮中的，这样用水，冷冻之后在解冻过程中，反复几次，酶的活性就会遭到破坏的。

需要配制成比较浓的母液（根据你实验的浓度选择母液浓度，自己把握），然后再分装几个小管里面，尽量减少其反复解冻的次数！

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