蒸发光检测器(ELSD)知识汇总一、定义:
蒸发光检测器即ELSD检测器,是一种通用检测器,在辅助气体一般是氮气或者是经过净化的压缩空气的作用下,将流动相雾化,形成的液雾(雾珠)通过加热而蒸发,此时溶解在流动相中不易挥发的样品即形成颗粒物,这些颗粒物由辅助气体推动进入光束通道,造成光束散射。通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量,从而测定样品浓度。
二、历史:
虽然蒸法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年,但是对于许多色谱工作者来说,它仍是一个新产品。第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的,并在八十年代初转化为商品,八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。此后,通过不断设计提高了ELSD的操作性能。现在ELSD越来越多的作为通用型检测器]用于高效
液相色谱,超临界色谱(SFC)和逆流色谱中。
三、用途:
蒸发光检测器是一种通用型的检测器,可检测挥发性低于流动相的任何样品,而不需要样品含有发色基团。蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高,对温度变化不敏感,基线稳定,适合与梯度洗脱
液相色谱联用。
已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。
ELSD用来测定那些不能用紫外检侧器检侧的组分,对HM的检测器是很重要的补充。但ELSD对有紫外吸收的组分检测灵敏度相对较低.此外,它只适合流动相能完全挥发的色谱条件,若流动相含有难以挥发的缓冲剂时,就不能用ELSD进行检测。
四、优势:
1.可检测挥发性低于流动相的任何样品;检测不含发色团的化合物,如:碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物,并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。
2.流动相低温雾化和蒸发,对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度;
3.广泛的梯度和溶剂兼容性,无溶剂峰干扰;
4.辅助载气提高了检测灵敏度,保持检测池内的清洁,避免污染;
5.高精度雾化和蒸发温度控制,保证高精度检测;
6.可与任何HPLC系统连接。
五、与其他检测器区别:
ELSD的通用检测方法消除了常见于传统HPLC检测方法中的难点,不同于紫外和荧光检测器,ELSD的响应不依赖与样品的光学特性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测,不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。
紫外、荧光、电化学和示差折光检测器的响应值与待测液的浓度在一定范围内呈线性关系,但蒸发光散射检测器响应值与待测溶液的浓度通常并不呈线性关系,必要时需对响应值进行数学转换后进行计算。
不同的检测器,对流动相的要求不同。如采用紫外检测器,所用流动相应至少符合紫外—可见分光光度法对溶剂的要求;采用低波长检测时,还应考虑有机相中有机溶剂的截止使用波长,并选用色谱级有机溶剂。蒸发光散射检测器和质谱检测器通常不允许使用含不挥发盐组分的流动相。
六、检测步骤:
ELSD的检测可分为三个步骤。
1.雾化:
在雾化器中,洗脱液通过1个针孔与氮气(也可以用空气)混合,形成均匀的雾状液滴。
2.流动相蒸发:
液滴通过加热的漂移管时,流动相被蒸发,样品组分形成气溶胶,进人检测室。
3.检测:
在检测室内,用激光来照射气溶胶,产生散射,测定散射光强,记录散射光强度随时间的变化关系,就得到了色谱图。
4.计算:
气溶胶受固定光强的激光照射后,待测组分的质量(m)和散射光强度(I)有以下的关系:
I=Kmb lgI=blgm+lgK
式中K和b为与蒸发室温度和流动相性质有关的常数。上式说明散射光的对数响应值与组分的质量的对数成线性关系。
七、商品品牌:
奥泰、沃特斯2420、沃特斯2424等
八、缺点:
1.和
液相连接需要信号转换,如:和安捷伦
液相相配时需要一个数模转换器(35900E)
2.价格昂贵
3.使用不便,需要配置高压氮气或空气,且实验中产生废气有害。