主题:【第二届网络原创作品大赛】HPLC也会“感冒”?

浏览0 回复73 电梯直达
tyys98
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
该帖子已被03yx2设置为精华;
【第二届网络原创作品大赛】HPLC也会“感冒”?

  HPLC是我硕士期间的研究方向,到现在已经用过很多不同型号了,应该说比较熟悉吧,然而今天却遇到一件很蹊跷的现象,S老师的研究生小李向我抱怨说,前段时间用来分析氨基酸的实验条件出现问题,有两种成分分离不开了,尝试过很多调整,包括流动相的配比、梯度表的修改、长时间的淋洗平衡等等都无济于事,不知道问题出在哪里,万般无奈下甚至都想过要更换色谱柱重新建立条件。

  我先调出了以往的结果,与最近的图谱进行了仔细比较,发现18种氨基酸中只有位于中部的苏氨酸和甘氨酸发生了重叠,其余成分的分离效果基本没有发生显著改变且重现性较好,这些现象基本可以排除输液泵以及切换阀工作性能不稳定的理由。问题出在哪里呢?从两种成分的化学结构来看,柱温度的的改变有可能会影响两者的相对位置,然而小李说柱温的设定并无差错,一直都是40度。这时我忽然想到了天气!这几天寒流过境,室内温度也随之下降,有可能会导致恒温柱箱中的实际温度受到影响。苏氨酸较甘氨酸分子量更大,对温度变化更敏感,降低温度会使保留时间延长,色谱峰后移并与甘氨酸重叠。如果是这样,我们把柱温箱的温度升高1度应该可以观察到效果,果然,在41度下两者有了明显的分离趋势,再作调整很快得到了满意的分离结果。

  我经常对学生们讲,科学研究的对象是自然规律,有时候它好像很不听话,这时候需要我们仔细的观察和思考,然后通过试验向它发问,而它们的那些表现其实就是在向你回答,如果稍不留意就错过最佳的对话机会。例如这一次就是仪器通过图谱告诉我们:它“感冒了”需要保暖,很高兴我听明白了。然而下一次呢?
(本文曾发表在我的博客:http://tonic.blog.sohu.com/)[/center][/center]
该帖子作者被版主 有水有渝3积分, 2经验,加分理由:谢谢分享经历
为您推荐
您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价
专属顾问快速对接
立即提交
荷月
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
k-14chen
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
tyys98
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 荷月(wuxinhe) 发表:
有可能!

不是可能,是真实的情况。
柏坡
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
tyys98
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 k-14chen(k-14chen) 发表:
呵呵,这样也行?

呵呵,没办法,穿的单薄,只好加点热。色谱柱恒温箱的种类很多,象岛津的属于比较大的,里边有风扇吹着,温度比较准确。安捷伦的比较紧凑,卡在金属的加热块上,靠传导和空气自然对流加热,可靠性稍差些。我们用的是天津一家公司的产品,独立的。室温变化不大的情况下,热量的产生和散失达到平衡,但是当室温变化较大时,箱内感应器的温度与实际柱温之间会发生微小的变化,这个变化平时并不明显,然而在这个实验中恰好影响了结果。
tyys98
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 柏坡(hgycook) 发表:
楼主说的真不错,观察的很细致。

谢谢夸奖,这是为师应该做到的。
qz
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
daldinia
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
tyys98
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 daldinia(daldinia) 发表:
又一位好老师!

是的,我的学生们都对我很尊重,我也很高兴能为他们解忧。
samanthalas
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
非常好的经验分享啊!尤其是您对科学探索的感悟。
猜你喜欢 最新推荐 热门推荐
品牌合作伙伴