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液相色谱（LC）
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主题：【邀您来解析2】探秘氨基酸分析仪

浏览0 回复25 电梯直达
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发表于：2010/09/12 00:15:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原创帖：【第三届原创大赛】菜鸟级解构日立L-8900全自动氨基酸分析仪给了我们熟悉氨基酸分析仪的好机会。

氨基酸分析在液相版块讨论比较少，现专开贴对氨基酸分析进行讨论！

1、氨基酸分析仪可以分离和检测所有的氨基酸吗？分离氨基酸是离子色谱法原理吗？
2、氨基酸与反应液在反应柱中反应的原理是什么呢？反应柱里面有填料还是有特殊溶液做催化？这个过程也叫做柱后衍生吧？
3、氨基酸分析仪也要专配一个紫外-可见分光光度计，对于DAD检测器有必要使用吗？也即对于检测多个氨基酸，波长不一致情况下，采用DAD可以一次采集到各个波长下的氨基酸吸收度。
4、氨基酸分析仪有哪些部件组成？
5、氨基酸分析仪流动相流路是怎么样的？
6、氨基酸分析仪与LC的差异点在哪里？

也欢迎大家提出还没有罗列到关于氨基酸分析仪的问题。

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2010/9/12 22:25:40 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以前见过一台报废的，听说价格还很贵
用起来也有点麻烦，基本上很多地方都把氨基酸的测定改用HPLC了，都是标准方法还是氨基酸分析仪，不知道为什么？
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yuying8091
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2010/9/13 17:35:40 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸分析仪要用可见分光光度计(440nm,570nm)，对于DAD检测器没有必要使用，柱后衍生用茚三酮显色，与LC没有大的区别，L8900中大量采用L2000部件，最大的区别是AA用电磁阀切换4种缓冲液+1种再生液，另外有1台衍生泵
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edwarz
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2010/9/14 9:45:36 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸分析仪其实就是一个专用的液相色谱仪。
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pinyang8
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2010/9/14 10:19:20 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没用过，只用过液相，柱前衍生做的。
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dxfzmzz
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2010/9/16 8:45:31 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 edwarz(edwarz) 发表:
氨基酸分析仪其实就是一个专用的液相色谱仪。

应该是一个专用的液相色谱仪加一个衍生系统，柱前或者柱后
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dfldxt
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2010/9/16 14:22:07 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、氨基酸分析仪可以分离和检测所有的氨基酸吗？分离氨基酸是离子色谱法原理吗？
是否可以分离所有的氨基酸，这不好说吧，不过氨基酸分析仪有两种柱子，一种可以用于分析水解蛋白的18种氨基酸，另外一种可以分析30多种氨基酸。如果要同时检测很多种氨基酸，那就要看柱子分离性能了，如果只是检测某一种氨基酸，只要峰形OK，两种柱子都可以用。
氨基酸分析仪的柱子是离子色谱法的原理，如果是其他柱前衍生的方法，应该就是C18柱了。

2、氨基酸与反应液在反应柱中反应的原理是什么呢？反应柱里面有填料还是有特殊溶液做催化？这个过程也叫做柱后衍生吧？
氨基酸与水合茚三酮共同加热被氧化分解产生CO2、氨和比氨基酸少一个碳原子的醛，此时茚三酮被还原。在弱酸性溶液中，还原茚三酮与氨及另一分子茚三酮缩合成蓝紫色化合物茚二酮胺（DYDA）DYDA在570nm处有最大吸收。脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物质，在440nm处吸收峰最大。除氨基酸以外，如NH2肽类也可与茚三酮反应生成有色物质。
这个过程是柱后衍生，反应柱里是填料吧，应该没有什么特别的催化剂，至于填料是什么也不知道

3、氨基酸分析仪也要专配一个紫外-可见分光光度计，对于DAD检测器有必要使用吗？也即对于检测多个氨基酸，波长不一致情况下，采用DAD可以一次采集到各个波长下的氨基酸吸收度。
不需要DAD，因为只需要两个吸收波长，570nm和440nm

6、氨基酸分析仪与LC的差异点在哪里
现在液相的公司也有氨基酸分析包卖，那天听Waters的介绍说，用他们的分析包在UPLC上检测18种氨基酸只需要10分钟左右，不过成本应该比较高吧。
不过氨基酸分析仪只能用在检测氨基酸上面，应用面比较窄
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晨曦
chenxihao1
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2010/9/17 10:57:02 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸分析仪主要是采用柱后衍生的方式对氨基酸进行分析的。
氨基酸分析柱一般是专用阳离子色谱柱，基于离子交换的方式进行分离，在通过柱后茚三酮衍生后在光度检测器中进行检测。
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晨曦
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2010/9/17 11:00:48 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
4、氨基酸分析仪有哪些部件组成？

氨基酸分析仪大体同经典LC类似，但是最重要的一点在于柱后衍生剂极易氧化，这里需要严格的保护，因此一般都有惰性气体保护装置。
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kila
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2010/9/21 16:36:32 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先，光是基本氨基酸17~18种就不可能用一种方法满意地检测，至少目前还没有。再加上修饰的氨基酸，那就更扯了。
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青林
wyqql2060
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2010/9/23 14:20:03 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我认为最主要还是管路有所修改，不容易被腐蚀
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