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液相色谱（LC）

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主题：【已应助】高效液相色谱仪测量多酚

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发表于：2022/11/26 19:54:22 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有没有大佬可以解答一下，我是高效液相色谱仪waters e2695测量莲藕中的多酚，我想提以下几个问题：
1、我的流动相B用的是0.4%的乙酸，这个是怎么配置的，是4ml的乙酸定容到1000ml嘛
2、流动相的体积是怎么计算的，假如我流量是1ml/min,每个样的时间是72分钟，跑样的时间算不算上平衡色谱柱的时间，各个流动相的体积除了20%甲醇怎么计算。
3、10ug/ml的溶液怎么稀释至2.4.6.8.10，比如稀释至2，是取1ml加水定容至5ml嘛
4、超声使充分提取的时候需要盖上嘛，hplc流动相脱气需要盖上嘛
5、怎么判断旋蒸后的乙酸乙酯是否蒸干
6、酸化甲醇（0.2%甲酸）怎么配置，是用盐酸配置嘛，要如何配置呀
求大神帮助一下才入门的科研狗，太难了，感谢感谢

推荐答案：歌名回复于2022/11/28

1、我的流动相B用的是0.4%的乙酸，这个是怎么配置的，是4ml的乙酸定容到1000ml嘛--------------------------直接在500ml水中加入2ml乙酸，混匀脱气冷却到室温就可以了
2、流动相的体积是怎么计算的，假如我流量是1ml/min,每个样的时间是72分钟，跑样的时间算不算上平衡色谱柱的时间，各个流动相的体积除了20%甲醇怎么计算。----------------------------------算这个是想干吗？算下流动相可以跑多少个样？按照最大使量计算就可以，1*72=72ml每个样品每种流动相按照72ml计算，为什么这么算用多了你就清楚了。
3、10ug/ml的溶液怎么稀释至2.4.6.8.10，比如稀释至2，是取1ml加水定容至5ml嘛-----------------------看实验室要求，最高稀释倍数不超过100倍，有容量瓶用容量瓶，没容量瓶用移液枪就行。
4、超声使充分提取的时候需要盖上嘛，hplc流动相脱气需要盖上嘛---------------------------虚盖就行，不拧紧
5、怎么判断旋蒸后的乙酸乙酯是否蒸干--------------------------------------------------看是什么样品旋蒸，还有就是看具体旋蒸要求描述，是旋干还是近干，一般无明显液体视为近干，无液体视为旋干（认为判断影响比较大）
6、酸化甲醇（0.2%甲酸）怎么配置，是用盐酸配置嘛，要如何配置呀------------------------干甲酸水一样配置，500ml甲醇添加1ml乙酸混匀、超声脱气静止冷却到室温就可以，多跟师兄师姐请教学习

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2023/6/6 9:32:48 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:1、我的流动相B用的是0.4%的乙酸，这个是怎么配置的，是4ml的乙酸定容到1000ml嘛--------------------------直接在500ml水中加入2ml乙酸，混匀脱气冷却到室温就可以了2、流动相的体积是怎么计算的，假如我流量是1ml/min,每个样的时间是72分钟，跑样的时间算不算上平衡色谱柱的时间，各个流动相的体积除了20%甲醇怎么计算。----------------------------------算这个是想干吗？算下流动相可以跑多少个样？按照最大使量计算就可以，1*72=72ml每个样品每种流动相按照72ml计算，为什么这么算用多了你就清楚了。3、10ug/ml的溶液怎么稀释至2.4.6.8.10，比如稀释至2，是取1ml加水定容至5ml嘛-----------------------看实验室要求，最高稀释倍数不超过100倍，有容量瓶用容量瓶，没容量瓶用移液枪就行。4、超声使充分提取的时候需要盖上嘛，hplc流动相脱气需要盖上嘛---------------------------虚盖就行，不拧紧5、怎么判断旋蒸后的乙酸乙酯是否蒸干--------------------------------------------------看是什么样品旋蒸，还有就是看具体旋蒸要求描述，是旋干还是近干，一般无明显液体视为近干，无液体视为旋干（认为判断影响比较大）6、酸化甲醇（0.2%甲酸）怎么配置，是用盐酸配置嘛，要如何配置呀------------------------干甲酸水一样配置，500ml甲醇添加1ml乙酸混匀、超声脱气静止冷却到室温就可以，多跟师兄师姐请教学习

太感谢啦!好嘞

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