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主题：【讨论】测单细胞的拉曼光谱

浏览0 回复9 电梯直达
fdp12580
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发表于：2011/04/26 09:35:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位朋友：
        您们好！
      我最近在使用Renishaw公司的拉曼光谱仪，是共聚焦的，来测试单细胞的拉曼光谱，采用785nm光源，但每次测试的效果都非常不好！
      我是将细胞种在盖波片上，或者直接将细胞溶液滴在载波片上，直接用显微镜看到细胞之后，再打光测试，但每次总是打在载物台上，而且基本上测不到细胞的拉曼光谱...
      请问有哪位朋友能为在下指点迷津啊，我这也试了许多次了，但总是没有效果...
     
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nanbowan
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2011/4/26 10:28:10 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那你测到了什么？什么信号都没有还是测到了玻璃的荧光？
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锐飏
tmxk999
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2011/4/26 13:07:07 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你看到得点和激光打到的是是同一个点么？
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biomedop
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2011/4/26 17:59:48 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不要用载波片，不管是玻璃的还是纯石英的，用纯金属薄膜
我做过很多了……
可以相互讨论啊
paidiya@yahoo.com.cn
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2011/4/26 18:02:19 Last edit by biomedop
fdp12580
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2011/5/1 16:01:47 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 拉曼论坛(nanbowan) 发表:
那你测到了什么？什么信号都没有还是测到了玻璃的荧光？

基本上测到的都是荧光
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2011/5/1 16:03:06 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tmxk999(tmxk999) 发表:
你看到得点和激光打到的是是同一个点么？

这个如何确定看到的和激光打到的是一个点呢，通过屏幕来看的话，觉得应该是同一个点！但就不知实际情况是否如此啊...
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fdp12580
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2011/5/1 16:15:58 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

各位热心的朋友，实在不好意思，这几天有事没有上线，所以没有很快的回复各位，小弟在此向各位道一声：对不起！
前几天我又用Renishaw 测了一下细胞的拉曼光谱，机器绝对没有问题，肯定是我的问题，但就是找不出问题之所在...
上图就是我用514测出的拉曼光谱图
下图就是我用785测出的拉曼光谱图
都没有发现什么拉曼峰啊，本人现在相当着急啊，这个要是测不出来，我怎么毕业啊！
请各位指点一下小弟！
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nanbowan
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2011/5/4 10:26:03 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
785测出来的就是纯粹的玻璃的荧光。

514这个不好说，因为我曾经试过好多载玻片，不同的载玻片在514.5纳米的激发下会有不同的荧光，有些甚至会有一些弱峰出现。

雷尼绍的仪器在调整好光路的情况下可以保证激光激发的点和白光像的中心是同一个位置。

我觉得4楼的想法你可以试一下，纯金属是没有荧光的，而且反射光还可以增强信号强度。
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hugw02
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2011/6/21 16:11:14 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
细胞的话 聚焦 应该是个很大的问题，只聚焦在表面好像不太好吧
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luckyapple
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2011/10/22 21:23:05 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我最近也在做细胞，也遇到了同样的问题，用AL镜作基底也没测不出来，请各位大侠指点迷津，不知楼上现在解决了没？
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