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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】关于ce-sds gel buffer, Beckman vs. Agilent和自制缓冲液

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zz2003
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发表于：2013/06/29 11:27:26 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知道这里是不是很多人在ce-sds上跑单抗，在Beckman出来比225kD的都大，但是在Agilent上就正常的大小。想知道有人知道为什么吗？是因为gel buffer不一样吗？不知道换buffer是不是能解决这个问题。有人试过自己做gel buffer的吗，有什么推荐的recipe吗？

是在ce sds上跑nr的单抗。
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2013/6/29 16:53:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是不同品牌CE的内部管路设计不同，检测器性能差异造成的。
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2013/6/29 18:22:24 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:

应该是不同品牌CE的内部管路设计不同，检测器性能差异造成的。


谢谢回答。也就是说不是缓冲液设计的原因吗？那有没有什么方式可以在beckman上跑出大小正确的峰呢？谢谢！
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2013/6/29 18:47:38 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是在ce sds上跑nr的单抗。
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2013/7/1 19:53:52 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zz2003(zz2003) 发表:
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:

应该是不同品牌CE的内部管路设计不同，检测器性能差异造成的。


谢谢回答。也就是说不是缓冲液设计的原因吗？那有没有什么方式可以在beckman上跑出大小正确的峰呢？谢谢！


毛细管电泳和其它分析仪器不一样。缓冲液浓度与组成确实可以影响出峰大小。按原理来讲是缓冲液影响样品形态，如解离度，荷电系数等。因此，CE定量一定要加矫正因子，因为差异比较明显。

大小正确的峰一般来讲的话，主峰不要过大，导致杂质峰淹没或是无法积分为度。一般是先用标准品稀释一个梯度浓度，分别上样，看合适的峰大小对应什么浓度，也就是做一个五点定量标准曲线，然后估算。
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nini2006
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2013/7/1 22:00:51 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这里有个帖子，可能会对你有帮助：

单抗CE-SDS分析结果解读
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121218/4442994/
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