主题：【第七届原创】液相-离子阱质谱联用法用于赖诺普利片的杂质分析

液相-离子阱质谱联用法用于赖诺普利片的杂质分析

    本试验采用高效液相-质谱联用法对赖诺普利片的两种微量杂质进行的分析，本方法分析准确方

法灵敏。我们对杂质碎片进行了分析定性。

    赖诺普利是口服降压药，是依那普利拉的赖氨酸衍生物，具强力血管紧张素转换酶抑制作用。

其特点为在体内不经肝脏转化即可产生药理效应，作用出现迟，但维持作用时间长而平稳。中文别

名苯丁赖脯酸、苯丁赖普酸、赖脯酸。化学名称为N-(N-[(S)-1-羧基-3-苯丙基]-L-赖氨酰)-L-脯氨酸二

水合物。

    赖诺普利是一种肽类的二肽酶抑制剂。它可抑制血管紧张素转换酶（ACE），后者可催化血管

紧张素I转换为血管收缩肽，即血管紧张素II。血管紧张素II可刺激肾上腺皮质分泌醛固酮。抑制ACE

可使血管紧张素II浓度降低从而使升压作用及醛固酮分泌下降。后者的降低导致血清钾的升高。赖诺

普利主要通过抑制肾素－血管紧张素－醛固酮系统降低血压，同时赖诺普利亦对低肾素性高血压有

降压作用。

    药物杂质分析是药品安全评价的一项重要内容，为了安全起见，药品中超过0.1％的的杂质在临

床前试验必须进行分析鉴定。本试验通过多级质谱对自研品种赖诺普利片的杂质进行了分析鉴定。

    材料和方法：赖诺普利片为本实验室自制，醋酸铵、冰醋酸（分析纯），购自天津。乙腈（色

谱纯）（迪马科技），实验用水为实验室自制。

    分析液相：安捷伦1200配VWD检测器，菲罗门色谱柱4.6 mm×150×mm×5um，流动

相：10％乙腈和90％（V / V）水（缓冲液），缓冲液（20 mmol/L乙酸铵以乙酸调节pH至4.5。流

速1.0ml/min,检测波长220nm。

    样品制备：将赖诺普利片10片研磨成细分，精密称定100mg细粉于100ml的容量瓶中，加入流动

相超声提取30分钟，0.22um滤膜过滤，备用。

    质谱：高压液相色谱- 电喷雾质谱，安捷伦液相配有bruker离子肼质谱仪，离子源温度250

度，ESI喷针电压4.0千伏，干燥气体流速10ml/分钟。

HPLC / MS分析：

赖诺普利的高效液相色谱图如下;

杂质1与赖诺普利m/z 291的三级裂解质谱MS³无差别如下图：

裂解质谱显示m / z 291的离子就产生了一个大的裂解产物在m / z245，可以推断为丢失了一个HCOOH，两者的m / z245的质谱再次裂解情况也证实了如上结论（如下图：）

对杂质1的裂解途径进行了一下推导：




杂质2、其呈现m / z为309的阳离子，同样在赖诺普利质子CID谱也呈片段

离子m / z309，这可能是一个6氨基2-（1-羧基-3苯丙氨基）-己酸结构单元，进一步裂解质谱如下：

可以看出杂质2与赖诺普利的m/z 309离子进一步裂解无差别。m/z 292显示m/z 309离子丢失一个NH3结构。

杂质1和杂质2的碎片离子如下表所示：

结果讨论：

1、              响药品质量的主要因素之一是药品杂质，药品的杂质是药品不具治疗作用，或对人体有危

害或影响药品质量的物质，因此，杂质检测是控制药品质量的一项重要指标，本实验对于赖诺普利

稳定性研究中产生的两个微量杂质进行了分析和鉴定，对于杂质产生原因的追究及杂质产生的避免

等进一步研究奠定了基础。

2、              本方法快速、准确，对于其他药物杂质分析具有借鉴意义。

3、              杂质结构基本是可以确定的，条件允许的话进一步证实可采用NMR的方法。