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茶 咖啡碱测定
中华人民共和国国家标准
GB 8312-87 Tea-Determination of caffeine content

本标准适用于茶叶中咖啡碱的测定。
在茶叶水浸出物中除去叶蛋白、茶多酚等物质后,留下的生物碱其测定波长为274nm者,均称茶叶咖啡碱。
1 原理 茶叶中的咖啡碱易溶于水,除去干扰物质后,用特定波长测定其含量。
2 仪器和用具 实验室常规仪器及下列各项:
2.1 紫外分光光度仪。
2.2 分析天平: 感量0.0001g。
3 试剂和溶液 本标准所用试剂,除另有规定外,均为分析纯(AR); 水为蒸馏水。
3.1 碱性乙酸铅溶液: 称取50g碱性乙酸铅(HG 3-1396-81),加水100mL,静置过夜。
3.2 盐酸(GB 622-77): 0.01N溶液,取0.9mL盐酸,用水稀释1L,摇匀。
3.3 硫酸(GB 625-77): 9N溶液,取硫酸250mL,用水稀释至1L,摇匀。
3.4 咖啡碱标准液: 称取100mg咖啡碱(纯度不低于99％)溶于100mL水中,作为母液,准确吸取5mL加水至100mL作为工作液(1mL含咖啡碱0.05mg)。
4 操作方法
4.1 取样 按GB 8302-87《茶 取样》的规定取样。
4.2 试样的制备 按GB 8303-87《茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。
4.3 测定步骤
4.3.1 试液的制备 按GB 8305-87《茶 水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。
4.3.2 测定 用移液管准确吸取试液(4.3.1)20mL移入250mL容量瓶中,加入10mL0.01N盐酸(3.2)和 2mL碱性乙酸铅溶液(3.1),用水准确稀释至刻度,充分混匀,静置澄清过滤,准确吸取滤液 50mL,注入100mL容量瓶中,加入0.2m19N硫酸溶液(3.3),加水稀释至刻度,混匀,静置澄清过滤。用10mm比色杯,在波长274nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
4.3.3 咖啡碱标准曲线的制作 分别吸取0、5、10、15、20、25、30mL咖啡碱工作液(3.4)于一组100mL容量瓶中,各加入4.0mL盐酸溶液(3.2),用水稀释至刻度,混匀,用10mm石英比色杯,在紫外分光光度仪上选择狭缝0.1～0.18mm,在波长274nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。将测 得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。
5 结果计算
5.1 计算方法和公式 茶叶中咖啡碱含量,以干态质量百分率表示,按下式计算:
　　　　　　　　　C 　　　250 　100
　　　　　　　　──×L1×──×──
　　　　　　　　1000 　　　20　 50
　咖啡碱(％)＝───────────×100
　　　　　　　　　　　 M×m
式中:C--根据试样测得的吸光度(A),从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量,mg/mL; L1--试液总量,mL;
M--试样用量,g;
m--试样干物质含量百分率。
如果符合重复性(5.2)的要求,取两次测定的算术平均值作为结果。
5.2 重复性 同一样品的两次测定值之差,每100g试样不得超过0.2g。
6 结果报告 试验报告应包括下列内容:
a. 使用的方法;
b. 测定的结果(取小数点后一位);
c. 本标准中末规定的或另加的操作;
d. 试样的名称和产地;
e. 试验日期,操作人员。

附加说明:
　　　　本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。
　　　　本标准由中国农业科学院茶叶研究所、商业部杭州茶叶加工研究所和上海进出口商品检验局负责起草。
　　　　本标准主要起草人李名君、钟萝、严家辉、程坤、郭雯飞、王济安。

中华人民共和国商业部1987-11-19批准 1988-07-01实施