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主题：【闻禾提问-2】凝胶色谱：重复进样时分子量分布产生差异的原因？

浏览0 回复4 电梯直达
阿du
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发表于：2008/08/15 11:42:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问题二

不知大家利用凝胶渗透进行测定分析时，是否做重复进样，做几次。因为新科研项目开发，分子质量超了原来柱子的适用范围，不但更换了新柱子，同时需要建立新的分析测试条件。在对大分子进行重复实验时，发现大部分情况下都有这样的趋势，即后一次的峰位分子质量都比前一次的小一些，分布有所展宽，这样的现象是由于什么原因造成的呢？

是不是我所用的柱子已经被样品“玷污”了呢？我们用的柱子是PL的10um，混合柱。样品最初起点分子量高达两三千万。我认为凝胶粒可能已经不太圆了，或者有些样品或者杂质已经被小孔“金屋藏娇”了。

大家各抒己见，帮我解读一下，我的问题的根本原因到底是什么？。

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wangboxzzjs
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2008/8/15 12:21:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
主要是由于保护柱或色谱柱被污染，柱性能下降或失效造成的。
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nnsss
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2008/8/17 16:57:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡时间和进针间隔短也有可能造成以上现象,
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小不董
doxw0323
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2008/9/1 10:45:08 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
溶液浓度要小点，溶解充分以否，也很有影响。
大分子的物质溶解时，如果震摇激烈，也可能使大分子打碎，也会使出峰时间推后，或峰展宽。选择良好的溶剂也很重要。
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bjwanhua
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2008/12/11 9:59:02 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品配置后放置条件，是否加热，是否放置时间较长，分子量大的可能会产生降解，造成分子量减小。
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