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头像更新中，请稍候…回复于2011/10/01
1. 极限一直提倡的是“正向使用，反向冲洗”，这么做的理由，月旭官方在各种贴子里也强调过多次，原因是：“色谱柱两端的筛板是一致的”。
2. 已经得出“色谱柱柱前段被污染”的结论，说明污染物很强大，能够“穿透”预柱/保护柱，这种情况，想要把柱子救活，概率不会很大。不管怎么说，如果是售后“保质期”内，寄回厂家要求厂家帮忙处理一般是可行的。如果不是，按照传统方法，首先反向冲洗（别扯再生，很少听到有再生成功的，不过倒是可以走走这个程序），如果不行，柱子基本没得救了。那就大胆地拆开，取下筛板进行处理（比如甲醇、异丙醇、15%硝酸超声）；另外，如果柱前段能肉眼可见被污染（比如发黄发黑），可以抠掉部分填料，用相同填料进行填补，这是最后的办法。不过这么做，就算修好了，寿命也不会很长。
有使用如此强大污染力的样品的勇气，就应该有报废柱子的思想准备和重新购买色谱柱的能力，呵呵
先把答案顶上。。
小卢应该持续关注这个贴子啊
版主不在，答题的人会比较迷惘
arvid2007回复于2011/10/01
可以反冲，极限色谱柱里没有两端筛板不对称的情况，所以极限色谱柱都能反冲
一般的正相反相柱应该都能反冲，只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲，不过目前这样的柱子已经比较少见了。反冲是为了把柱头的污染物冲洗掉，反冲后还是正着用比较好，以免柱子的两头都被污染。我们一直提倡的是：正向使用，反向冲洗。
dahua1981回复于2011/10/01
极限色谱柱可以反向冲洗吗？原因是？
答：极限的是可以反向冲洗的。由于两端的筛板是一致的。
如果色谱柱柱前段被污染，解决办法有哪些呢？
答：解决办法有清洗和再生。
清洗的方法：
1、经过等度运行后的色谱柱，有时用90～100％含量的溶剂B（双溶剂反相系统中洗脱能力较强的溶剂，如甲醇、乙晴、四氢 呋喃等）冲洗20个柱体积可以清除污染物（色谱柱的柱体积和空柱管体积概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱体积只有2.5ml，4.6x150mm是1.5ml,2.1x150mm是0.28ml,4.6x50mm是0.5ml,3.0x150mm是0.64ml）。
2、如果使用的是缓冲盐系统，不要直接切换到强溶剂，突然转换到高浓度有机溶剂可能会使HPLC流动体系中的缓冲盐沉淀，这样会导致更大的问题，如柱头筛板堵塞、连接管路堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该先用无缓冲盐流动相（即把缓冲液换成水），冲洗5～10个柱体积以后才切换到用强溶剂清洗。
3、有时候，强溶剂B也没法把残留在色谱柱上的污染物洗掉。那么就需要用更强的溶剂或者是系列溶剂组合。如果污染物不是生物质的，一种强溶剂或几种溶剂组合清洗基本能解决问题。柱子生产厂家的网页和产品说明书上很多也有清洗方法推荐。
4、所有的清洗方法的模式普遍都类似，溶剂系列中所用溶剂的强度逐级增加，最后一个溶剂往往是非极性（疏水性）很强的（如醋酸乙酯甚至是烷烃），以便于溶解脂质、油类等非极性污染物。溶剂系列中每个溶剂都保证能与下一个溶剂互溶。整个清洗过程结束后，在回到原来的流动相体系前，必须借助一个中等强度的互溶性非常好的溶剂过渡。例如， 异丙醇是一个非常好的过渡溶剂，它既能与正己烷或二氯甲烷互溶又能与水相溶剂互溶。但是异丙醇粘度非常大，必须确保较低的流速以免使泵压过高。还有，如果使用紫外检测器，须避免选用在紫外区域有吸收的溶剂，要不然需使用大量的溶剂冲洗才能使基线平稳。
5、对于典型的硅胶基质键合反相柱，在未使用缓冲溶液的条件下，推荐使用以下清洗溶剂系列： 100％甲醇---100％乙晴---75％乙晴/25％异丙醇---100％异丙醇---100％二氯甲烷---100％正己烷用每种溶剂冲洗至少10个柱体积，对于250mm×4.6mm的分析柱，合适的冲洗流速是1～2ml/min。最后用10柱体积的异丙醇过渡，然后回到原来的流动相体系（但不含缓冲盐），最后回复到起始流动相配置。四氢呋喃也是另外一种常用的清洗溶剂。如果怀疑柱子被严重污染，还可用二甲亚砜（DMSO）或 二甲基甲酰铵和水按50：50的比例混合，以低于0.5ml/min的流速冲洗色谱柱。
再生方法
1、再生被污染HPLC柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的清洗步骤来除去这些污染物往往就能恢复其色谱性能。成功再生反相柱子是一个非常耗时的过程，溶剂冲洗序列可以编成一个梯度洗脱的程序自动进行，以方便过夜操作。
还有一个老问题就是冲洗再生色谱柱是正冲还是反冲。污染物是在柱子入口端聚积，反向冲洗当然是把污染物洗出柱子最方便的。现在的色谱柱，高压填充的柱床很稳定，无须担心反冲会冲坏柱子的问题。但如果碰到厂家在入口端使用孔径相对较大筛板的情况，就不能反冲。另外冲洗柱子时通常不连接检测器。柱子冲洗频率取决于有多少污染物通过进样带到柱子里了，一般反相柱，在分离度完全丧失或者洗脱出不相关的物质峰之前，还是能承受相当程度的污染的，很多人倾向于等到有上述异常现象出现后，再进行清洗柱子，这样做，污染物累积程度高了，清洗起来也困难得多。所以，如你的反相柱经常进样很脏的样品，建议你定期做个清洗。清洗次数越多，每次清洗越容易。
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
极限色谱柱可以反向冲洗吗？原因是？
答：极限的是可以反向冲洗的。由于两端的筛板是一致的。
如果色谱柱柱前段被污染，解决办法有哪些呢？
答：解决办法有清洗和再生。
1、再生被污染HPLC柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的清洗步骤来除去这些污染物往往就能恢复其色谱性能。
2、经过等度运行后的色谱柱，有时用90～100％含量的溶剂B（双溶剂反相系统中洗脱能力较强的溶剂，如甲醇、乙晴、四氢 呋喃等）冲洗20个柱体积可以清除污染物（色谱柱的柱体积和空柱管体积概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱体积只有2.5ml，4.6x150mm是1.5ml,2.1x150mm是0.28ml,4.6x50mm是0.5ml,3.0x150mm是0.64ml）。 3、如果使用的是缓冲盐系统，不要直接切换到强溶剂，突然转换到高浓度有机溶剂可能会使HPLC流动体系中的缓冲盐沉淀，这样会导致更大的问题，如柱头筛板堵塞、连接管路堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该先用无缓冲盐流动相（即把缓冲液换成水），冲洗5～10个柱体积以后才切换到用强溶剂清洗。 4、有时候，强溶剂B也没法把残留在色谱柱上的污染物洗掉。那么就需要用更强的溶剂或者是系列溶剂组合。如果污染物不是生物质的，一种强溶剂或几种溶剂组合清洗基本能解决问题。柱子生产厂家的网页和产品说明书上很多也有清洗方法推荐。
5、所有的清洗方法的模式普遍都类似，溶剂系列中所用溶剂的强度逐级增加，最后一个溶剂往往是非极性（疏水性）很强的（如醋酸乙酯甚至是烷烃），以便于溶解脂质、油类等非极性污染物。溶剂系列中每个溶剂都保证能与下一个溶剂互溶。整个清洗过程结束后，在回到原来的流动相体系前，必须借助一个中等强度的互溶性非常好的溶剂过渡。例如， 异丙醇是一个非常好的过渡溶剂，它既能与正己烷或二氯甲烷互溶又能与水相溶剂互溶。但是异丙醇粘度非常大，必须确保较低的流速以免使泵压过高。还有，如果使用紫外检测器，须避免选用在紫外区域有吸收的溶剂，要不然需使用大量的溶剂冲洗才能使基线平稳。
6、对于典型的硅胶基质键合反相柱，在未使用缓冲溶液的条件下，推荐使用以下清洗溶剂系列： 100％甲醇---100％乙晴---75％乙晴/25％异丙醇---100％异丙醇---100％二氯甲烷---100％正己烷用每种溶剂冲洗至少10个柱体积，对于250mm×4.6mm的分析柱，合适的冲洗流速是1～2ml/min。最后用10柱体积的异丙醇过渡，然后回到原来的流动相体系（但不含缓冲盐），最后回复到起始流动相配置。四氢呋喃也是另外一种常用的清洗溶剂。如果怀疑柱子被严重污染，还可用二甲亚砜（DMSO）或 二甲基甲酰铵和水按50：50的比例混合，以低于0.5ml/min的流速冲洗色谱柱。 7、成功再生反相柱子是一个非常耗时的过程，溶剂冲洗序列可以编成一个梯度洗脱的程序自动进行，以方便过夜操作。
8、还有一个老问题就是冲洗再生色谱柱是正冲还是反冲。污染物是在柱子入口端聚积，反向冲洗当然是把污染物洗出柱子最方便的。现在的色谱柱，高压填充的柱床很稳定，无须担心反冲会冲坏柱子的问题。但如果碰到厂家在入口端使用孔径相对较大筛板的情况，就不能反冲。另外冲洗柱子时通常不连接检测器。柱子冲洗频率取决于有多少污染物通过进样带到柱子里了，一般反相柱，在分离度完全丧失或者洗脱出不相关的物质峰之前，还是能承受相当程度的污染的，很多人倾向于等到有上述异常现象出现后，再进行清洗柱子，这样做，污染物累积程度高了，清洗起来也困难得多。所以，如你的反相柱经常进样很脏的样品，建议你定期做个清洗。清洗次数越多，每次清洗越容易。
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