主题:【第六届原创】【微观看世界】昆虫等小型生物SEM系列~之二 —— 白纹伊蚊

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asahi42
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白纹伊蚊,俗称花脚蚊子(见下图,来源于百度)



由于传播登革热,最近在我国南方闹得鸡犬不宁。这种蚊子身上的白色斑纹特征明显,非常好认,即使有时候把它打得扁平稀烂,都会在手上留下整齐的黑白条纹。笔者思考,能够从蚊子身上转移到手上的,那肯定应该是像毛鳞片之类的东西,那这种鳞片究竟是因为什么原理或者什么结构,才会产生黑白两种截然相反的颜色呢?

天气逐渐转凉,蚊子也回炉重新投胎,本来笔者准备明年入夏再起炉灶,怎前天忽见一个目标叮在同事身上~大喜过望~

在光镜下,就已经可以清晰地看到,白纹伊蚊的黑白色区域都有鳞片附着,黑色区域覆盖黑色鳞片,白色区域覆盖白色鳞片。(光镜照片可以和低倍电镜照片对应,有机会补)

观察设备:FEI Quanta 250 FEG  /  FEI Nova NanoSEM 450 FEG

样品制备:常规  /  显微鳞片剥离

观察条件:低真空低加速电压(LFD探头,Quanta)  /  高真空低加速电压配合减速(CBS探头,NNS)

低倍下白纹伊蚊腿近关节处 ↓



中间右边那堆鳞片比较大的,是光镜下的白色鳞片;靠下那堆鳞片比较窄小的,是光镜下的黑色鳞片。

5千倍下,左图是白色鳞片,右图是黑色鳞片 ↓



除了宽窄,还真看不出明显的区别。

继续放大,10k,左图是白色鳞片,右图是黑色鳞片 ↓



区别仍然不明显。

20k,左图是白色鳞片,右图是黑色鳞片 ↓



唯一能够牵强说说的,是白鳞片的小梁间距比黑鳞片大些,但是不能确定这是不是和鳞片所处的位置有关,而且这算不算是一个分类特征,也得昆虫学家说了才算。另外因为加速电压低,可以看出,两种鳞片都不是中空的,大梁小梁见都有很薄的膜填充在里面。

不过上边的图都是脚上的鳞片。蚊子身上的黑白鳞片差别就比较明显。左图是白色鳞片,右图是黑色鳞片 ↓



3k倍下,感觉白色鳞片似乎没有小梁。

继续放大,左图是白色鳞片,右图是黑色鳞片 ↓



更明显了。

因为考虑到加速电压对超薄膜的击穿作用,得用更低的电压来验证。于是,Quanta的低真空就比较吃力,NNS闪亮登场~

左图Quanta FEG,右图是Nova NanoSEM FEG,位置是白纹伊蚊身上白色鳞片 ↓



因为NNS(右)比Quanta(左)用了更低的加速电压,因此细节更为表面,也更可信。这个系列的图从不同的侧面说明两个问题:第一,Quanta的低真空效果不错;第二,NNS的低电压效果不错~

左图Quanta FEG,右图是Nova NanoSEM FEG,位置是白纹伊蚊身上黑色鳞片 ↓



由此可见,两台机子反应的细节都比较靠谱,该有就有,不该有就没有。

左图Quanta FEG,右图是Nova NanoSEM FEG,位置是白纹伊蚊腿上白色鳞片 ↓



看来白色鳞片在不同的位置结构差别很明显。

左图Quanta FEG,右图是Nova NanoSEM FEG,位置是白纹伊蚊腿上黑色鳞片 ↓



而在不同位置的黑色鳞片之间,差别真心不大。

最后还有一个不知道算不算细节的细节:

左图Quanta FEG,右图是Nova NanoSEM FEG,位置是白纹伊蚊身上白色鳞片的柄断面 ↓



放大倍数再往高了去,Quanta低真空就很累了,NNS高真空逐步体现它的优势。可见柄是实心的。

左图Quanta FEG,右图是Nova NanoSEM FEG,位置是白纹伊蚊身上黑色鳞片的柄断面 ↓



柄非常明显是空心的~

总结:

该实验仍然存在两个问题:第一,样本数量不够大;第二,没有考虑到鳞片正反面因素的影响。不过因为笔者毕竟不是专业检测昆虫的,另外蚊子腿上的鳞片观察基本能够保证都是正面;而取下的身上的鳞片因为正反随机,在4-5张白色鳞片上没有看到有小梁结构,因此图像也具备一定的参考价值。

个人感觉。白纹伊蚊腿上的白色鳞片和黑色鳞片都有大小梁结构,白色鳞片略大,黑色鳞片略小,大小梁间都有超薄膜填充;身上的白色鳞片没有小梁结构,黑色鳞片具备小梁结构,同样白色鳞片略大,大小梁间都有超薄膜。光从电镜单一方法,目前不能解释结构和颜色之间的关系,这也许要考坛子里的各位坛友和专家共同出谋划策,才能让实验结果更具备科学性和说服力。
该帖子作者被版主 小M15积分, 2经验,加分理由:好作品,好原创
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虽是外行,但觉得导致颜色不同的原因可能有两个方面,物理结构的区别和两处的化学组成的区别。物理的原因可以从不同结构对光的反射效果入手,化学原因可以从成分差异入手。
如果是物理因素,那么扫描电镜绝对能起到大作用,我觉得其分辨率应该足以观测到结构上的这一区别,但总觉得要把测量到的尺度结果用于分析不同颜色,需要建模啊~~~
化学因素,不知道对比较小的区域做下能谱会不会有否有有参考价值。有无能谱专家给点高论?
大自然果然鬼斧神工,无论该贴发现的“证据”能否为昆虫学家作为分辨白蚊伊蚊的证据,却着实说明了扫描电镜的强大~~~好贴!!
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太强了,我们上周刚培训过植物昆虫基础知识,真应该先看了楼主的文章和图片,再讲课,更生动,赞一个
asahi42
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原文由 天空之城(110003) 发表:

太强了,我们上周刚培训过植物昆虫基础知识,真应该先看了楼主的文章和图片,再讲课,更生动,赞一个


这才是电镜科研的实际意义所在~下次您可以先预约,然后我看看能不能帮上忙
asahi42
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虽是外行,但觉得导致颜色不同的原因可能有两个方面,物理结构的区别和两处的化学组成的区别。物理的原因可以从不同结构对光的反射效果入手,化学原因可以从成分差异入手。
如果是物理因素,那么扫描电镜绝对能起到大作用,我觉得其分辨率应该足以观测到结构上的这一区别,但总觉得要把测量到的尺度结果用于分析不同颜色,需要建模啊~~~
化学因素,不知道对比较小的区域做下能谱会不会有否有有参考价值。有无能谱专家给点高论?
大自然果然鬼斧神工,无论该贴发现的“证据”能否为昆虫学家作为分辨白蚊伊蚊的证据,却着实说明了扫描电镜的强大~~~好贴!!



建模,让我先膜拜一下~还好我读书的时候选的是高数C,否则大学不一定能毕业了…

但是对于化学因素,我觉得因为生物体成分太轻,而且有机物结构又太像,解角蛋白结构这种靠SEM+EDS估计什么有用的信息都得不到,得上其他分析手段,X-Rad或者红外?HPLC?看来我分析化学也只能拿个D了…
asahi42
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原文由 linzq(linzq) 发表:

CBS真不错,明显细节好很多


CBS在高真空的条件功不可没~~
小不董
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〓疯子哥〓
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很强大

有没有做蚊子头部做微观观察?,头部应该更精彩
asahi42
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原文由 小不董(doxw0323) 发表:

楼主怎么在电镜下区别黑白磷片的?


对于蚊子腿部的鳞片,是光镜观察定了位以后做好特征点然后去电镜下找,对于蚊子身上的鳞片,就是取下来以后贴在导电胶的不同位置了~
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