主题：【第十届原创】液质联用仪LC/MS使用中遇到的几个问题

液质联用仪LC/MS使用中遇到的几个问题

使用液质已经一段时间，现将一些具有代表性的问题总结分析一下。
一、            流动相需要注意的问题

1、实例：不及时更换流动相，滤头堵塞
产生后果：水相长菌（有些文献说会长藻类，目前没有发现长藻的现象，仅发现白色菌斑），有机相产生絮状物（目前仅发现甲醇一个多月不更换会有白色絮状物沉淀，乙腈暂未发现）。两者均会堵塞滤头，导致流动相流速不均匀从而影响基线稳定性。
原因分析：流动相的水相中虽然使用的是一级水，但是经常会加一些乙酸铵或者磷酸盐等有机盐缓冲液，属于营养物质，给微生物的生长创造了条件，长期不更换容易生长一些微生物。流动相的甲醇中产生絮状物原因尚没有能明白，个人觉得可能是时间久了，微量的甲醇氧化成了甲醛，甲醛聚合产生了多聚醛，有待考证。
正确操作：很多材料上说流动相要每天更换，其实没有必要。实践过程中发现，水相可在保存3天，有机相2个周以内。有时候流动相配制多了，用不了，在这个时间内可以继续使用，不会对结果产生影响。
扩展使用：很多液相都是四通道或者两通道，水相和有机相的管路都有固定的。为了防止管道内长菌可以每半年将有机相和水相的管理调换一下。
2、实例：a四环素检测为优化峰型加入Na2EDTA
b甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）检测中，样品含量超过5000ppm直接进样
c在前处理过程中为了沉淀脂肪和蛋白质使用乙酸锌和亚铁氰化钾，或者为了盐析加了一些氯化钠，也不进行溶剂转化，无机盐的水溶液进样。
d 为了调节pH流动相中加了乙酸钠或者氢氧化钠等
产生后果：导致质谱被污染甚至产生损伤，有时候打开离子源，有机盐或碱都产生白结晶了。
原因分析：以上两种情况的本质是一样的，无机盐或碱进到质谱里面了。很多刚使用液质的，之前可能用过液相，觉得液质的液相部分没什么不一样，因此很多液相上的项目拿到液质上做的时候流动相直接按照液相的检测方法配制，前处理也参考液相的前处理。其实液质和液相有个很大的不同就是液质检测不能使用无机盐或碱，无机盐或碱难挥发，难分解，进到质谱里面不仅会污染离子源和四级杆，长时间使用还会降低质谱分辨率。
正确操作：液质使用过程中，不要引入无机盐或碱，尽量使用有机盐或碱（如磷酸、乙酸、乙酸铵、氨水等）。即便前处理过程中用到了无机盐，也尽量加一步溶剂转化，将目标物转移到有机相中再上机分析。某些迫不得已的情况，如目标物本身可能就是无机盐，不溶于有机相，这时候也应尽量进行稀释，不能进大浓度的，液质的检出限比较低，痕量的目标物即可被检测到
二、            在线脱气装置需要注意的问题

实例：使用这么长时间，在线脱气装置只出现过一个问题，流动相配的少了，没注意流动相用完了，大量气体进入在线脱气装置
产生后果：即便重新加上流动相开机进行排气，发现流动相泵送不到管路内。
原因分析：在线脱气装置里面大量气体，不能及时进行脱气，而且空气进入泵里面，单向阀对气体不管用，导致气体在管路中不能排出。
解决办法：拆开管路，从在线过滤器、连接泵的管路、泵，逐级用注射器将气体吸出。如果长时间泵送空气会对泵产生损伤，因此尽量计算好流动相的量，不要出现流动相不够的情况。
三、            管路注意问题

实例:管路问题无非就是堵塞和漏液，堵塞的话逐级排查，而且目前的液质一般配有漏液报警，一旦漏液就会自动报警待机。但是笔者遇到一种情况，管路压力突然降低了很多，仪器也没给出漏液报警。检查了各种接头均未发现漏液。
产生后果：同样流动相压力和之前相比降低很多，波动较大，进标准曲线不成线性，同样浓度的标准品间隔一个小时进样，响应值相差好几倍
原因分析：最后各种排查，加咨询工程师发现是进样次数太多了，进样针和针座之间磨损产生空隙，漏液了，液体直接进入废液管路，因此触发不了报警系统。目标物在进样后也有一部分因为漏液损失了，所以不成线性，响应值也变化很大。
解决办法：更换进样针和针座


四、            进样装置问题

实例：自动进样装置总是莫名其妙故障。换了正品的安捷伦进样平，换了2次整套的机械臂，依然存在问题。
原因分析：后来工程师排查是因为自动进样器电路板的问题，该批次生产的电路板都存在同样的问题
解决办法：即便出了保修期，依然给我们免费换了一套电路板。安捷伦的售后还是比较不错的。
五、            离子源问题
实例：正离子模式无响应，负离子模式正产使用。
原因分析：我们使用的是正负离子可以同时扫描的型号，经过工程师排查，是因为离子源后面的毛细管到使用寿命了。
解决办法：正负离子同时扫描很少会用到，因此更换了一根性价比相对比较便宜的毛细管，但是正负离子同时扫描的功能不能用了。

六、            仪器条件设置问题
实例：在使用乙酸铵水溶液和乙腈的的流动相过程中，梯度洗脱设置两相变化过于突兀，比如从95%的水相突然变成95%的有机相。
产生后果：乙酸铵在管路析出，堵塞色谱柱头，导致压力超过警戒线。
原因分析：乙酸铵不溶于乙腈，两相突然变化的话，管路中会突然充斥有机相，导致乙酸铵析出。
解决办法：在设置梯度洗脱的时候要考虑到这个问题，不能一味的缩短时间（没有乙酸铵或其他有机盐的流动相可忽略此问题）。