主题:【原创】酶联免疫吸附试验elisa原理

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酶联免疫吸附试验elisa原理
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?酶联免疫吸附试验(ELISA)?是一种基于抗原-抗体特异性反应和酶的催化显色反应相结合的免疫分析技术。它的工作原理可以概括为以下步骤:

?酶与抗体或抗原的结合?:首先,酶分子(如辣根过氧化酶HRP)与抗体或抗原进行结合,这种结合方式不会改变抗体和抗原的免疫学特性,同时保留了酶的催化活性。
?特异性结合?:利用酶标记的抗体或抗原与已知的抗原或抗体(这些抗原或抗体已吸附在固相载体上,如聚苯乙烯制成的96孔板)进行特异性结合。这一步骤基于抗原-抗体间的专一性键结特性。
?底物的加入与颜色反应?:向反应体系中加入底物溶液,在酶的作用下,底物发生化学反应并伴随颜色变化。具体来说,底物中的供氢体在酶的作用下从无色还原态转变为有色氧化态。
?结果的判定?:通过观察底物的颜色变化来判定结果。颜色变化的深浅直接反映了样品中相应抗体或抗原的含量,从而实现对免疫反应的检测以及对待测物质的定性或定量分析。
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