【求助】我的色素可见光区无明显吸收

acesben

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2009/2/20 13:28:45 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

奥是这样的
我看了很多研究色素的文章
一般情况下在可见光区如果能得到一显著吸收波长的话
对于我研究温度时间金属离子对细菌色素分泌的影响就很容易
因为直接在相应波长下测定吸光度即可

但有一篇是研究黑色素的论文它的波长在可见光区就无明显吸收所以只能通过测定色素产量来评断

我现在就是想请问你一下

你觉得这种我这种色素假如经过硅胶层析和反相C18层析后
会不会有可能在可见光区出现较为明显的吸收呢？

因为我们从图上可以看到在250nm 、342nm处有个微峰

但是这两个峰都不能算是可见光区啊

如果在可见光区找不到合适的吸收波长

我就要另选别的方法了

这是一个问题；另一个问题是：
不知道你用过反相C18没有呢？

搞分析要用自己装的还是也可以选用预装好的柱子？

再有对于薄层能给些建议吗？

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acesben

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2009/2/20 13:50:39 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

做着色剂是课题目标
我的目标是研究这种色素的化学结构~~

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tutm

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2009/2/20 14:46:07 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我没做过生物或微生物方面试验。
如果不能找到显著的吸收峰，那有可能是色素物质纯度低，这时经过分离会出峰。但是看你那图谱，这样做不会有明显的效果。
在没有明显吸收峰时，色素产量（浓度）可以用可见光谱范围内的吸光曲线下面积来比较，比如，400-700nm，每隔10nm的吸光度累加值。

如果你们有C18现成的柱子，当然可以用。薄层层析也是可以用的。
使用这两个分离手段的前提是，你的色素是能在适当的溶剂中真正溶解，否则不行。另外据我所知，一些色素，特别是蛋白质类，溶解过程发色体系可能会被破坏，颜色会改变。

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acesben

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2009/2/21 13:43:28 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

恩是呀那我先看看吧

另外我看过一篇文章是研究黑色素的它就在可见光区无明显吸收如下图

可以看到他为了检测方便直接选择560nm 波长做测定用

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tutm

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2009/2/21 17:10:48 15楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用吸收峰的最大吸收波长测试溶液浓度，主要好处是可以排除一些其它组分的干扰。但即使在有吸收峰时，是否一定要在最大吸收波长下测试，也要看实际情况。最理想的测试波长是，该波长下吸光度值只与你关心的物质浓度相关，不受其它因素影响。
对于你的样品，虽然紫外有吸收峰，但你的关注点不在紫外，而是可见区域，你上面的文章中是采取了一个自行确定的折中办法，你也可以采用类似方法处理，不过选用的波长应该要与已有文献中同类物质测试波长一致。以便于你所在领域同行对你的结果理解及认可。

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