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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【求助】请教各位专家一个问题

浏览0 回复4 电梯直达

qzyuan601

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发表于：2009/03/03 15:21:24 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用了好长时间的紫外与液相，现在有一事不明，特请教大家：
在紫外测定中，用了标准曲线法定量未知样品的浓度，标准样品使用浓度与样品浓度是否有相关性？也就是说样品浓度或吸光度必须落在标准曲线的线性范围内嘛？
这个与做液相色谱中的线性意义相同吗？因为HPLC中做线性是要求样品的浓度要落在标准曲线的范围内的。这样测定才有意义。
请明示。谢谢！

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2009/3/3 15:39:18 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

同属于浓度型检测器，样品吸光度必须在标准溶液吸光度范围内，郎伯-比尔定律也是在一定浓度范围内有效，浓度过大时，标准曲线会向下发生偏离。

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hxhym

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2009/3/3 15:45:50 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般样品浓度采用标准曲线换算的最好是在标准曲线的区间范围内比较好,否则可能会偏差

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qzyuan601

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2009/3/3 15:51:15 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢，我看分析化学书上也没有说有关于样品浓度和标准品浓度的问题，所以很纳闷。回贴很及时哦。我还不是很懂加分规则，谁告诉我哦。

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tutm

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2009/3/3 18:28:38 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 qzyuan601 发表:
使用了好长时间的紫外与液相，现在有一事不明，特请教大家：
在紫外测定中，用了标准曲线法定量未知样品的浓度，标准样品使用浓度与样品浓度是否有相关性？也就是说样品浓度或吸光度必须落在标准曲线的线性范围内嘛？
这个与做液相色谱中的线性意义相同吗？因为HPLC中做线性是要求样品的浓度要落在标准曲线的范围内的。这样测定才有意义。
请明示。谢谢！

你问的“样品浓度或吸光度必须落在标准曲线的线性范围内嘛？”这句话，好像可以分两层意思来思考。

意思1. 样品浓度或吸光度必须落在标准曲线范围内；
意思2. “意思1”当中的浓度和吸光度关系必须是线性的。

其中，意思1 对分光光度分析和HPLC 都是应该的，就是2楼hxhym写的；
意思2 对HPLC （半）定量分析也是必须的，因为它要用面积积分计算含量，如果不在浓度——吸光度线性范围，只能得到错误的结果。
但是，分光光度法分析可以不受“意思2”的限制，比如在比较高的浓度下，虽然浓度——吸光度可能已弯曲，就像1楼写的情况，但还是可以用示差法等进行测试。

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