主题:【第二届网络原创作品大赛】周小样的色谱之路——正相和反相流动相体系在Agilent1100上的转换

浏览0 回复18 电梯直达
pandora98
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原文由 jiamingw 发表:
原文由 dreamy1123 发表:
有两个建议:
首先,安捷伦的正反向色谱系统所用的柱塞杆密封垫是完全不一样的,反向用的是黑草帽,有些像黑色胶皮的颜色,而正向用的是黄草帽,类似塑料的颜色;正向的稍贵。两者理论上是完全不能混用的,否则少说几个小时,最多一个月泵压力就会不稳,那个时候麻烦就大了,很容易造成色谱系统的阻塞。应该是楼主的样品不多,所以才没生什么意外。

其次,楼主的机器如果有自动进样器,那么衍生的过程是可以用自动进样器来完成的,这样不但省事,重复性也会相当的好,因为手动衍生受人为误差的影响是非常大的,要知道,安捷伦的自动进样器是为数不多可做自动柱前衍生的哦!!!

关于柱塞杆密封垫的问题,俺也知道不能混用,不过没办法,没这个配件,又必须做正相色谱,好在样品不多,半年多才做一次,也没出现问题。

我们的衍生化是不能用自动进样器来完成的,这个过程要振摇,要静止,还要提取有机溶剂层,不知道安捷伦什么样的自动进样器能完成这个过程,1100是不行的。

长期用做正相的机器需要换三个柱塞杆密封垫圈,泵上两个,还有自动进样器上的计量泵,那里也有一个。
仪器溶剂切换用异丙醇清洗系统一两个小时就差不多了,注意控制流速,主要是检测器的流通池上压力不能太高,好像是不能超过100bar,否则会压坏透光玻璃片。用purge的方法不能清洗排空阀后边,我们曾经有一只手性柱废掉,就是因为只purge没有清洗系统,排空阀后边管路里残留的甲苯把手性柱填料毁了
〓猪哥哥〓
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purge只是清洗从溶剂瓶管路到清洗阀之间的管路,可以卸掉柱子冲洗
小卢
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看完了楼主的帖子,感觉真的很强大!!!
但,楼主在文中提到:
“首先,反相到正相的转换。
1.把水相的管路放到乙腈溶剂瓶中,purge这个通道,大概用时7,8分钟。
2.把水相的管路和乙腈的管路都放到异丙醇溶剂中,分别继续purge,用时大概16,7分钟,这个时候注意压力的变化。
3.把水相的管路放到正己烷的溶剂中,继续purge7,8分钟。直到转换完成。

其次,正相到反相的转换。
1.把正己烷的管路放到异丙醇溶剂中,purge这个通道,用时7,8分钟。
2.把正己烷和异丙醇的管路都放到乙腈溶剂中,分别purge 7,8分钟。
3.把原来水相的管路放回水相中,purge 7,8分钟。”
我个人认为,这样做的仍然不到位。在purge阀打开冲洗好后,只是把流动相进泵前的流动相替换了出来,从泵到色谱柱这段的流动相仍然没有被替换。所以我认为,应该是把柱子拆下来,把柱温箱内连接柱子前段的管道接到废液缸。运行至管道内的流动相被完全提换后再接柱子。
仅为个人观点,有不对支持请指教!

周小样
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谢谢楼上的建议,不好意思,是我写的简单了,做的时候确实是象楼上几位说的那样,purge好了以后,还要把柱子前段的那段管路冲干净,不过那段管路相对较短,不用太长时间。而且可以接上二通阀用异丙醇洗洗整个管路。

不过关于异丙醇压力的问题,我倒真不知道,不过每次purge 好了,压力都不会太高,肯定没有超过100bar.
周小样
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其实关于手性柱的注意事项,还要看每个柱子的要求。柱子的填料不一样,要求不一样,我们有的柱子不能进水,有的柱子是可以的,所以要看说明书。
小卢
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原文由 jiamingw 发表:
谢谢楼上的建议,不好意思,是我写的简单了,做的时候确实是象楼上几位说的那样,purge好了以后,还要把柱子前段的那段管路冲干净,不过那段管路相对较短,不用太长时间。而且可以接上二通阀用异丙醇洗洗整个管路。

不过关于异丙醇压力的问题,我倒真不知道,不过每次purge 好了,压力都不会太高,肯定没有超过100bar.

谢谢回复!
不过我是按平时做反相柱的要求想的!
chengjingbao
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最终没有看到您 的图。若确实不会发,我来帮你!

作品很"简单",总结得很好!水平层次高啊!
shiqudejita
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