主题：【资料】近年国内固相萃取-色谱分析的进展(56讲 待续)

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(32)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第33部分.——固相萃取-色谱分析在奶制品和肉类食品分析中的应用(10)

3．固相萃取-色谱分析在奶制品和肉类食品分析中的应用
    国内近两年使用固相萃取-色谱分析在奶制品和肉类食品分析中的应用论文见表 3-10

表 3-10 固相萃取-色谱分析在奶制品和肉类食品分析中的应用(10)
序号 题目 摘要 使用SPE柱 文献
46 快速分离柱高效液相色谱法测定
肉中盐酸克伦特罗
  研究了用快速分离柱高效液相色谱法测定肉中盐酸克伦特罗的方法。肉样品中的盐酸克伦特罗用水超声振荡提取，然后用固相萃取预分离和富集，以 ZORBAX Stable Bound (4.6 × 50 mm, 1.8μm) C18 快速分离柱为固定相，0.01mol/L 的磷酸二氢钾水溶液:甲醇＝ 65:35 为流动相分离，流速为1.0ml/min；在该色谱条件下，盐酸克伦特罗在 1.0min 内可达到基线分离；用紫外二极管矩阵检测器检测。方法标准回收率为84%～98%, 相对标准偏差为1.5%～2.5%。方法用于几种肉样品的测定
  C18  柱
  D-46
47 柱后衍生荧光检测高效液相色谱法快速测定鲜牛奶中链霉素残留量
  　牛奶样品经磷酸溶液提取,提取液用苯磺酸阳离子交换柱和C18 固
相萃取柱净化,链霉素残留液用甲醇从C18 固相萃取柱上洗脱,经旋转蒸发器减压蒸干,残渣用0.01 mol/ L 庚烷磺酸钠溶液溶解,用柱后衍生高效液相色谱荧光检测器在激发波长263 nm 和发射波长435 nm 测定. 方法线性范围为0.01～0.10 mg/ kg ;在0.01 ～ 0.10 mg/ kg 范围, 三个添加水平的回收率为78.3 %～80.2 % , 变异系数( CV ) 为7.4 % ～ 12.4 % , 方法检出限为0.005 mg/kg.
  BA KERBOND  苯磺酸型阳离子 柱，500 mg ,3 mL；BA KERBOND C18柱，500 mg,3 mL,美国J.T.Baker公司； D-47
48 鸡蛋中7 种磺胺药物的多残留检测方法研究
  本试验研究建立了高效液相色谱法测定鸡蛋中7 种磺胺药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶和磺胺喹恶啉)残留的提取、净化和高效液相色谱分析条件，鸡蛋经二氯甲烷提取、固相萃取、净化处理后上机检测.
  AccuBond II ODS-C18,500mg,6ml D-48
49 固相萃取净化分析牡蛎中有机氯农药
  针对牡蛎中的有机氯农药,采用固相萃取小柱Florisil 柱净化,达到了较好的净化效果。对固相萃取净化条件进行讨论的结果表明,体积比为95∶5 的正己烷2丙酮作为洗脱溶剂,洗脱速率为115 mL/ min 时,16 种有机氯农药回收率较高,为95 %～106 %。
样品制备：称取干燥、粉碎好的牡蛎粉110 g 和115 g 硅藻土混合均匀置于11 mL 的ASE 萃取池中,以体积比为1∶1 环己烷2乙酸乙酯混合溶液提取。提取液经过Florisil 柱净化两次。Florisil 柱先用4 mL 丙酮清洗,并用真空泵抽干,再用4 mL 正己烷调节。加入样品后用5 mL 体积比95∶5 正己烷2丙酮混合溶液洗脱,最后收集的洗脱液,氮气吹扫至012 mL ,准确称量加入内标(PCB103∶500 ng/ g) 。
  LC-Florisil 柱,
  D-49
50 贻贝中多氯联苯分析的前处理方法研究
  针对分析贻贝中痕量多氯联苯(PCBs) , 比较了索氏提取(SE) 和加速溶剂萃取(ASE) 两种提取方法, 结果表明SE对贻贝中7 种PCBs(PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、PCB180) 回收率范围在96%～125 % ,ASE回收率范围在102 %～115 % , 两者提取效果相当, 但与索氏提取相比, 加速溶剂萃取是一种快速、高效的提
取方法。此外采用凝胶渗透色谱( GPC) 分别与Florisil 和C18 固相萃取(SPE) 小柱联用净化, GPC 与Florisil 柱联用净化的回收率范围在90 %～112 % , GPC与C18 柱联用净化的回收率范围在74 %～108 % , 结果表明GPC与Florisil柱联用净化优于GPC与C18 柱联用净化
  Florisil 柱, 500mg，3 mL Orochem 公司； ENVI-18 C18柱 3 mL D-50


文献
D-46 彭永芳，马银海，郭亚东等，食品科学，2005，26（4）：226～228
D-47 姜 莉,赵守成, 分子科学学报,2005,21(1):20－24
D-48 刘铁铮，王 冉，柳伟荣等，食品科学，2005，26（11）：183～186
D-49 沈燕华，周 琳， 　陈大舟等，北京化工大学学报，2005，32（6）：103～105
D-50 周琳，沈燕华， 陈大舟等，分析测试学报，2005，24（5）： 42～45

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(33)
    这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第34部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（1）

      近年有些国家对我国出口的农产品制定了严格的环保技术标准, 使我国蔬菜、水果进入国际市场面临着“绿色壁垒”，对蔬菜、水果中农药残留的检测方法的研究受到重视，在使用 gc 或 HPLC 分析蔬菜和水果中有害物质时，多使用固相萃取进行样品的净化和被测物的富集。例如文献[E-9]使用 HPLC 可同时测定 5 种有机磷农药、6 种拟除虫菊酯类农药和除草剂二甲戊乐灵,所研究的方法已用于蔬菜水果样品中这些农药残留的测定，在这一方法中使用 Florisil 土固相萃取柱净化样品的乙酸乙酯萃取掖。近两年其他的研究工作报告见表 4。

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（1）
新号 题目 摘要 SPE 文献
1 QuEchERS 法测定蔬菜中有机磷类农药多残留分析
  采用一种新的样品前处理方法,从蔬菜中提取净化残留农药(包括11 种有机磷农药) ,运用gc/MS 进行分析检测,根据有机磷农药种类差异,其最小检出限在5.6～18.2μg/kg 之间,回收率在67.7 %～105.3 %之间,相对标准偏差不大于10.6 %
样品制备：。准确称取20.0g 试料至50mL 的Teflon 离心管中,加入20mL 含1 %Hac 的乙腈溶液、2g 无水醋酸钠、8g 无水硫酸镁,一定量的混标溶液,剧烈振荡1min ,然后以5000rpm 离心 10min ;移取4mL 上清液于10mL 的Teflon 离心管中,依次加入600mg 无水硫酸镁和 200mg PSA 吸附剂,剧烈振荡1min ,以
5000rpm  离心10min ,吸取2mL 上清液至10mL 刻度试管中,加入1mL 甲苯,40 ℃下氮吹至012mL ,然后用甲苯定容至110mL 。再加入200mg 无水硫酸镁涡旋1min ,转移0.6mL 上清液至样品瓶中,供色谱分析。
  BOUNDESIL-PSA,40μm, Varian 公司
  胡西洲, 程运斌, 胡定金，中国测试技术，2006，32（3）：132～133

现代农药，2006，5（4）：
24～30
 
2 SPE-gc-MS选择离子直接测定果品中赤霉素擦残留量 研究了样品在C18萃取柱上的保留行为，使用HP-1色谱柱直接进样gc-MS测定，选择离子检测克服了基体的干扰，检出限为 0.11mg/kg。
样品制备：C18萃取柱依此用乙酸乙酯 5 mL，甲醇 5 mL，水 5 mL，活化，将样品溶液过SPE柱，保持抽气 5 min，用甲醇洗脱目标化合物。
  Supelco Park C18 固相萃取柱，1.0 g(6mL) 黄红林，张桃芝，刘实，叶德连，理化检验-化学分析，2006，42：194～196
3 甘蓝及其土壤中灭幼脲的残留检测与消解动态研究
  研究了杀虫剂灭幼脲在甘蓝及其土壤中残留量的高效液相色谱检测方法，样品经提取和固相萃取( SPE) 小柱净化后进行测定。
样品制备：将甘蓝、土壤提取液分别转入250 mL 分液漏斗中,加入石油醚30 mL ,5 %硫酸钠溶液100 mL ,振摇2 min ,静置分层,弃去下层水相。将石油醚在50 ℃减压蒸发至5 mL 左右;浓缩液过 Florisil SPE 小柱,用石油醚3 mL ×2 洗涤,弃去,以5 mL 丙酮/ 石油醚(5∶1 ,V / V ) 对小柱进行洗脱,收集流出液;50 ℃下以N2 吹干,加入2 mL 甲醇。土壤样的甲醇溶液定容至5 mL ,备测;甘蓝样的甲醇溶液过ENV1-18 SPE 小柱,用1 mL×2 甲醇洗脱,收集流出液,定容至5. 0 mL ,备测。 ENV1-Florisil 小柱, ENV1-18
SPE 小柱
  柳训才，陈 平，程运斌，等，
分析科学学报，2006，22（3）：271～274


文献
1 胡西洲, 程运斌, 胡定金，中国测试技术，2006，32（3）：132～133 现代农药，2006，5（4）：
24～30
2 黄红林，张桃芝，刘实，叶德连，理化检验-化学分析，2006，42：194～196
3 柳训才，陈 平，程运斌，等，分析科学学报，2006，22（3）：271～274

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(34)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第35部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（2）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（2）
编号 题目 摘要 SPE 文献
4 高效液相色谱法测定柑橘汁糖的组成
  研究了柑橘汁中糖组成的高效液相色谱测定方法,采用固相萃取小柱预分离干扰成分，以Agilent Zorbax  Carbohydrate(4.6 × 250mm，5μm)糖分析柱为固定相，80% 乙腈为流动相，柱温25 ± 2℃.
样品制备：准确称取10.00g 样品，加入30ml 水，水浴超声波提取10min，离心过滤，滤渣用10ml 水洗涤过滤，合并滤液，定容到50ml。取5ml 试液，以10ml/min 流速通过预活化好的Sep-pak C18 固相萃取小柱，弃去初始的 2ml 滤液，收集后续3ml 滤液，用0.45μm 滤膜抽滤，取 10μl 滤液进样分析 Sep-pak C18  小柱 李云康，潘思轶
食品科学, 2006,27(4): 191～193
 
5 简化二维气相色谱法分析蔬菜中农药多种残留
  研究了简化二维气相色谱法测定蔬菜中5 种农药(β- 六六六、p,p-DDE、乙草胺、氟乐灵、毒死蜱) 残留的提取、净化和简化二维气相色谱分析条件。蔬菜样品粉碎后加入无水硫酸钠研磨至无水分，加入50ml重蒸石油醚:丙酮(9:1)超声提取后经固相萃取净化处理后上机检测。
样品制备：称取1 0 g 于研钵中，加入无水
硫酸钠研磨至无水分，转移至锥形瓶中，加入50ml 重蒸石油醚:丙酮(9:1)，超声提取0.5h，静置15min，取10ml 滤液于离心管中氮气吹干。5ml 石油醚:乙酸乙酯(9:1)、5ml 石油醚预洗Envi-Florisil，倒入2ml 重蒸石油醚溶解的样品，取2ml 石油醚:乙酸乙酯(9:1)淋洗液洗脱，收集洗脱液，用氮气吹干后用石油醚定容至1ml，转移入进样瓶，待气相色谱
  Env-Florisil小柱 陈树兵，俞美香，杨云霞等，食品科学，2006，27,（8）： 221～223

 
6 苹果和土壤中吡草醚残留的分析方法
  用液液分配经弗罗里硅土净化和固相萃取两种方法测定苹果和土壤中吡草醚的残留, 并对其进行了比较. 发现用PSA和C18固相萃取柱分别对苹果和土壤中的吡草醚进行净化处理, 减少了液液分配所使用的溶剂, 简化了操作步骤,
样品制备：苹果(30g) 切碎后加入95ml乙腈超声提取30min转入250ml聚四氟离心杯中, 少量冲洗后提取液体积为100ml.离心杯中加入15g无水硫酸镁和5g氯化钠. 混合物剧烈搅拌5min, 3000 r/min离心15min. 取上清液80ml转移到250ml的圆底烧瓶中, 40℃减压蒸干, 乙腈定容3ml. 取2ml加入预先用2ml乙腈淋洗的PSA固相萃取柱中, 然后加入3ml乙腈进行淋洗, 收集所有淋出液, 氮气吹干, 乙腈定容1ml, 待HPLC分析。
C18固相萃取柱净化：
提取液直接用旋转蒸发仪蒸至10ml左右, 过无水硫酸镁层脱水后减压蒸干. 用乙腈∶水(30
∶70, V /V ) 定容至3ml以5000 r·min- 1离心5min后用C18固相萃取柱进行净化. C18柱置于12孔固相萃取装置上分别用乙腈和水5ml预淋活化, 加入提取液2ml使其以每秒1—2滴的速度通过C18柱, 用3ml乙腈∶水(50∶50, V /V ) 淋洗小柱后通空气使柱干燥, 最后用3ml乙腈进行洗脱, 洗脱液用氮气吹干后乙腈定容1ml, 待测.
  PSA和C18固相萃取柱
  王会利，胡继业　张洪勋等，环境化学，2006，
25（5）：656～657
7 气相色谱- 质谱大体积进样法测定蔬菜、水果中17种农药残留
  用GC - MS/SIM与大体积进样技术结合测定蔬菜、水果中包括有机磷类、氨基甲酸酯类、有机氯类、菊酯类在内的17种农药的方法。样品经丙酮提取, OASIS HLB固相萃取小柱净化后, 采用GC-MS的选择离子模式和大体积进样技术进行测定, 能够使相对检出限降低1～2个数量级。
样品制备：称取5.0 g已捣碎并充分混匀的试样于50 mL具塞塑料管中, 加入5 mL丙酮, 在均质器上高速混匀1 min, 以3000r/min的速率离心3 min, 取出上清液。残渣再用5 mL丙酮提取1次, 合并2次提取液,于氮气吹干仪上在40 ℃条件下浓缩910 mL(即提取液体积减少了9.0 mL)。
净化: 取上述浓缩的提取液, 与10mL去离子水混合均匀(混合液中丙酮的含量应少于10% )后, 加入WatersOASIS HLB小柱(预先用6 mL甲醇、8 mL去离子水淋洗柱子) , 样液过柱后, 用氮气尽量吹去柱子的水分; 加入2 mL的乙酸乙酯洗脱液, 然后是3次2 mL的乙酸乙酯-丙酮(体积比90 ∶10)洗脱柱子。收集洗脱液于氮气吹干仪上在40 ℃条件下浓缩至大约0120 mL, 用丙酮准确定容至110 mL, 供气质联用仪分析
  Oasis HLB 柱
Waters 公司
  黄惠玲，张薇君，丁慧瑛，分析测试通报，2006，25（4）：81～84
 
8 气相色谱法同时测定蔬菜和水果中三氯杀螨醇及菊酯类农药残留
  研究了同时测定蔬菜和水果中的三氯杀螨醇及菊酯类农药残留。样品中的农药残留经溶剂提取后,采用固相萃取技术分离、净化,进GC分析,外标法定量。
样品制备：称取20 g经匀浆处理的试样于250 ml具塞三角瓶中,加入丙酮和石油醚各40 ml摇匀,在电动震荡器上震荡30 min,取上清液20 ml待过柱用。用内径1 cm,长25 cm 的玻璃层析柱,低端塞入脱脂棉,依次从下至上加入1 cm 无水硫酸钠, 4 cm 硅胶,3 cm活性炭, 3 cm 无水硫酸钠,用10 ml石油醚预淋洗柱子,弃去淋洗液,当石油醚层降至无水硫酸钠层时,立即加入样品提取液,用25 ml刻度试管接受洗脱液,将洗脱液用氮吹仪氮吹蒸发,并用石油醚定容至2 ml,分别移于2 ml自动进样器样品瓶中,待测 硅胶、活性炭
  王锡宁,季萍，中国卫生检验杂志，2006，16（5）：545～546

 


文献
4 李云康，潘思轶,食品科学, 2006,27(4): 191～193
5 陈树兵，俞美香，杨云霞等，食品科学，2006，27,（8）： 221～223
6 王会利，胡继业　张洪勋等，环境化学，2006，25（5）：656～657
7 黄惠玲，张薇君，丁慧瑛，分析测试通报，2006，25（4）：81～84
8 王锡宁,季萍，中国卫生检验杂志，2006，16（5）：545～546

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(35)
      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》, 2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第36部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（3）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（3）
编号 题目 摘要 SPE 文献
9 高效液相色谱法同时测定蔬菜水果中的12种农药残留
  研究了同时测定蔬菜水果中12种农药残留的反相高效液相色谱分析方法。将样品捣碎,用乙酸乙酯超声提取,经Florisil固相萃取柱净化、正己烷-二氯甲烷(体积比为1∶1)洗脱、氮气吹干、甲醇溶解并定容后,采用高效液相色谱柱分离、紫外检测,以外标法定量。
样品制备：称取10.0 g 样品置于锥形瓶中,加入25 mL 乙酸乙酯和10.0 g无水硫酸钠剧烈振摇以除去水分(若无结块,说明无水硫酸钠的用量已足够) ,超声提取10 m in。将上清液抽滤,残渣中再加入25 mL 乙酸乙酯重复超声提取1次。最后用少量乙酸乙酯洗涤残渣,一并抽滤。滤液用旋转蒸发仪挥发至干(于35 ℃水浴中) ,用少量二氯甲烷溶解残渣,再用Flo-
ris il固相萃取柱(使用前分别用2100 mL 二氯甲烷和2100 mL 正己烷预处理该柱)净化,然后用7 mL正己烷2二氯甲烷(体积比为1∶1)淋洗,收集全部流出物,并于35 ℃水浴中用弱氮气流吹干, 然后用0110 mL 甲醇溶解残渣, 并于15 000 r /m in 速率下离心2 m in, 上清液为待测液。置于4 ℃冰箱下密封保存.
  Florisil固相萃取柱 李永新, 孙成均,赵剑虹等，
色谱，2006，24 （3）：
251～255
 
10 固相萃取- 高效液相色谱同时测定水果蔬菜中吡虫啉、吡虫清残留量
  研究了一种能够同时测定番茄、黄瓜、芦柑等样品中吡虫啉、吡虫清残留量的反相高效液相色谱检测的方法。采用反相高效液相色谱法, 样品用乙腈提取, 固相萃取净化, HPLC-DAD 分离检测, 外标法定量。
样品制备：称取25g 试样, 置于250mL 具塞锥形瓶中, 准确加入乙腈50mL, 放置2h, 振荡提取30min 后过滤, 收集40～50mL 滤液到装有5～7g 氯化钠的100mL 具塞量筒中, 盖上塞子, 剧烈震荡, 静置, 使乙腈相和水相分层, 从中吸取10.00mL 乙腈溶液, 放入125mL 心
型瓶中, 50℃旋转蒸发浓缩至近干。
固相萃取净化样品：将固相萃取柱用2mL 正己烷预淋洗, 用15mL丙酮-正己烷( 10:90) 分三次溶解残渣, 移入Florisil固相萃取柱, 弃去流出液。然后用10mL 丙酮- 正己烷( 20:80) 淋洗柱子, 收集淋洗液, 50℃旋转蒸发浓缩
至近干, 用乙腈- 水( 25:75) 溶解并定容至2mL, 过滤(!0.45μm) , 待测 superclean ENVI-Florisil,3mL, 500mg;
  何松涛，俞晔，乙小娟等，检验检疫科学，2006，16（3）：49～51
 
11 蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的HPLC/MS测定研究
  用高效液相色谱电喷雾质谱测定蔬菜中氨基甲酸酯残留，样品经乙腈提取、甲醇:二氯甲烷(1: 99 v/v)溶解后,用固相萃取小柱进行净化、提纯。选用Pickering C8 ( 250 mm ×410 mm ×
5μm)分析柱,甲醇/酸化水(内含011% 乙酸)梯度洗脱,通过选择性离子监测( SIM)及电喷雾电离离子化技术进行测定。
样品制备：准确称取10.0 g经粗粉碎的蔬菜样品置于100 ml烧杯中,加50 ml乙腈,匀浆1 min,放置5～8 h,过装有3～5 g无水硫酸钠玻璃柱。准确吸取5 ml乙腈溶液,放到50 ml烧杯中,在50℃蒸汽浴上在缓慢氮气流吹动下蒸发至近干。用2 ml甲醇:二氯甲烷(1: 99 v/v)溶解,加到固相萃取柱(使用前先用4 ml二氯甲烷平衡该固相萃取柱)中,缓慢过柱。收集洗脱液,再用2 ml甲醇:二氯甲烷( 1: 99 v/v)洗涤烧杯,并将其加入固相萃取柱(重复2次) ,合并洗脱液,在氮吹仪上于50℃下蒸发至近干,用甲醇准确定容至110 ml,过0.45μm滤膜,待HPLC /MS分析
  BOND ELUT - NH2 固相萃取小柱, 3 ml,500 mg,  Varian公司
  陈晓红,李小平,金米聪, 中国卫生检验杂志,2006,16(9): 1041～1043
 
12 液相色谱- 电喷雾质谱联用法测定蔬菜中7种有机磷农药残留量
  了固相萃取/液相色谱- 电喷雾质谱( SPE /HPLC - MSn )同时测定蔬菜中痕量甲胺磷、久效磷、敌百虫、马拉硫磷、对硫磷、二嗪农和辛硫磷7种有机磷农药残留量的方法, 并且结合二级质谱的特征碎片离子情况初步研究了7种有机磷类农药的裂解规律。样品提取液经固相萃取后采用C18柱分离, 以011% (φ)甲酸乙腈- 011% (φ)甲酸水溶液为流动相, 线性梯度洗脱, 以保留时间和质荷比对分离出的组分予以定性确证,用峰面积进行定量
样品制备：萃取: 取300 g蔬菜样品, 置于组织捣碎机中捣碎并充分混匀, 准确称取50 g置于100 mL锥形瓶中, 加入30 mL乙腈, 超声波振荡萃取30 min。静放10 min后将提取液转移至50 mL容量瓶中, 再用20 mL乙腈分两次萃取残渣, 合并洗涤液于50 mL容量瓶中。
净化: 样品提取液经0145μm滤膜减压过滤后, 通过已活化好的ODS2C18固相萃取柱(使用前用6mL乙腈、6 mL甲醇和10 mL水平衡该固相萃取柱)富集有机磷农药。待样品全部吸附, 分别以纯水、5%的甲醇水溶液冲洗固相萃取柱后, 继续抽真空5 min, 最后用5 mL甲醇洗脱柱上农药, 洗脱液在氮吹仪上于室温下蒸发至干, 用流动相溶解并准确定容到110 mL, 用0145μm的针头过滤器过滤后, 待分析。 AccBond ODS-C18,500 mg, 6 mL
  徐远金, 李永库，分析测试通报，2006，25（4）：36～40

 
13 SPE-GC-MS选择离子直接测定果品中赤霉素残留量 研究了用SPE-GC-MS选择离子直接测定果品中赤霉素残留量的方法，使用 HP-1 色谱柱，Trace 2000 GC-MS 仪器。
样品制备：C18 SPE 小柱先用乙酸乙酯、甲醇、水各 5 mL缓慢通过SPE柱，取 60 mL 样品过柱，流速 5 mL/min，之后平稳抽戏 5 min，用 2-10 mL 甲醇洗脱，每洗脱出 1 mL 就进行 GC/MS测定。 C18 小柱，Supelco Park 1.0g,6 mL 黄红林，张桃芝，刘实，理化检验-化学分册，2006，42：


文献
9 李永新, 孙成均,赵剑虹等，色谱，2006，24 （3）：251～255
10 何松涛，俞晔，乙小娟等，检验检疫科学，2006，16（3）：49～51
11 陈晓红,李小平,金米聪, 中国卫生检验杂志,2006,16(9): 1041～1043
12 徐远金, 李永库，分析测试通报，2006，25（4）：36～40
13 黄红林，张桃芝，刘实，理化检验-化学分册，2006，42：

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(36)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第37部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（4）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（4）
编号 题目 摘要 SPE 文献
14 SPE-HPLC 用于蔬菜中甲基对硫磷和对硫磷同时测定
  采用乙腈提取,ENVIO18 固相萃取,丙酮洗脱,C18 高效液相色谱分离柱,甲醇- 水(体积比85 ∶15)流动相,紫外检测波长275 nm ,研究了同时测定蔬菜中甲基对硫磷和对硫磷残留量的固相萃取- 高效液相色谱法。结果表明: 测定甲基对硫磷和对硫磷农药残留量的线性范围为0. 05～5. 00 mg/ L ,相关系数0. 999 8～0. 999 9 ,检出限0. 025～0. 031 mg/ L ,加标回收率81. 60 %～93. 60 % ,相对标准偏差5. 3 %～2. 9 %。
样品制备：。称取捣碎混匀后的西红柿5. 00 g 于100 mL 烧杯中,加入乙腈30 mL ,匀浆2 min 。浆液过滤于150 mL 分液漏斗,残渣再以10mL 乙腈分次洗涤,合并滤液。向分液漏斗中加入3～5 g 氯化钠,剧烈振摇3 min ,然后静置1 h ,分液。将上层有机相转至茄型烧瓶,在旋转蒸发器上以40 ℃蒸发至1 mL 以下,将残液转移至带刻度的
试管中,并以少量丙酮多次清洗,使合并后总量不超过5 mL 。于氮吹仪上在40 ℃下吹至近干。加丙酮1 mL 溶解残渣,过SPE 柱(先以5 mL 石油醚和5mL 丙酮依次预洗) ,再以1 mL 的丙酮洗涤试管,洗液过柱,收集流出组分。再将流出组分于氮吹仪上在40 ℃下吹至近干,加甲醇1 mL 溶解残渣,溶液以0. 45μm 的微孔滤膜过滤,待测 ENVI-Carb 柱
3 mL, SUPELCO；
ENVI-18 ，3 mL Agilent
  14
 
15 利用HPLC 和GC 全面分析葡萄醋中有机酸
  采用两步固相萃取技术除杂,比较了外标法和标准加入法定量的优劣,分析了HPLC 和GC 方法各自的局限性。
样品制备：取6mL 样品用去离子水稀释至20mL。将稀释液先通过C18 - SPE 小柱(事先用2 mL9 :1的水/ 甲醇溶液活化) ,收集后再通过NH2 - SPE小柱(事先用5 mL 甲醇活化) ,用去离子水淋洗NH2 - SPE 小柱,再用2mL1. 5%氨水洗脱NH2- SPE小柱,洗脱液即可进行HPLC分析。对于GC分析,取400μL 洗脱液N2 吹干,添加20μL 5g/ L 对羟基苯甲酸的嘧啶溶液,再添加250μL硅烷化试剂和250μL 嘧啶,于70 ℃下恒温20min 500mg C18 - SPE 和NH2 - SPE(菲罗门科技发
展有限公司) ;
  15
 
16 气相色谱- 质谱法测定蔬菜中的16种多环芳烃
  研究了蔬菜中多环芳烃( PAHs)残留量的气相色谱- 质谱分析方法。方法:蔬菜经过环己烷提取,硫酸溶液和PSA固相萃取柱净化,用气相色谱- 质谱选择离子监测模式( SIM)定性和定量检测多环芳烃。16种PAHs加标回收率范围在60%～120% 之间,相对标准偏差为8%～20% ,检测限范围为01009～0106μg/kg
样品制备：提取:称取1010 g样品于50 ml塑料离心管中,加入环己
烷30 ml均质2 min, 6 000 r/min 离心5 min,将上清液转入125 ml分液漏斗中;将残渣用20 ml环己烷重复提取1次,离心后合并上清液于分液漏斗中。净化:在分液漏斗中加入10 ml硫酸溶液进行磺化,充分
震荡后静置分层,弃去下层硫酸层(如有必要重复一次) ;然后
加入1 g氯化钠粉末, 10 ml纯水洗涤环己烷层,静置后弃去水
层。 PSA固相萃取柱，500 mg, 6 ml, Varian公
司
  16
17 气相色谱法测定水果蔬菜中克菌丹残留
  研究水果中克菌丹残留量的分析方法,讨论色谱分离和测定的条件及样品前处理条件。样品以乙酸乙酯振荡提取,采用硅胶/活性炭固相萃取净化,正己烷与丙酮的混合液为洗脱液,选用HP - 5毛细管色谱柱,以具电子捕获检测器( ECD)的气相色谱(GC)仪测定水果中克菌丹残留量。本法的检出限为0.5μg/ml,最低检出浓度为0107 mg/kg,线性方程Y = 1.4083X – 1.0092 ( r = 0.9986) ,平均加标回收率为104.3%
样品制备：　克菌丹提取方法　称取10 g样品于50 ml的离心管中,加入5 ml水、25 ml乙酸乙酯和一小勺NaCl,混匀器上混匀2 min, 然后放入摇荡器中摇荡提取30 min, 取出于3 500 r/min 离心5 min,吸取上清液于梨形瓶中,残渣再用10 ml乙酸乙酯提取两次,上清液合并。旋转浓缩仪上蒸干(水浴温度40℃,旋转速度110 r/min) ,用3 ml正己烷分3次洗脱,洗脱液合并于一玻璃试管待净化。
　克菌丹净化方法　取LC – Si小柱和ENV I – Carb小柱串联装好。用5 ml正己烷预洗柱,然后加入样品,用3.5 ml丙酮∶正己烷(1∶2,V∶V)洗脱。收集洗脱液于10 ml试管中,再于氮吹仪中40℃下吹干,然后用1 ml正己烷溶解定容,用气相色谱仪分析。 Supelclean ENV I–Carb 柱，3 ml；, Supelclean LC
-Al； Supelclean ENV I–Florisil ，3 ml； Supelclean- LC–Si，3 ml

  17
 
18 蔬菜、水果中农药多残留快速分析方法
  采用固相萃取净化法对样品中的农药进行提取及净化, 用气相色谱- 质谱法在选择离子监测模式下进行快速测定, 依据保留时间和特征离子丰度比, 对农药进行确证。并可同时定性和定量, 用于蔬菜、水果等多种农产品的检测。根据检测农药的异同, 回收率在80%～110%之间, 相对标准偏差1.13%～6.21%。
样品制备：将样品放入食品粉碎机中充分粉碎, 称取20g 置于100ml 具塞锥形瓶中, 加入50ml 已腈, 超声提取30min。再加入5g 氯化钠, 振荡, 静止分层, 转移上层有机相, 并使其通过无水硫酸钠玻璃小柱, 并用石油醚少量多次洗涤脱水小柱, 合并洗出液, 于40℃水浴中旋转蒸发至近干, 加入正己烷溶解后再加入到已用5ml 正己烷活化的Florisil 固相萃取柱净化, 用洗脱液( 20%丙酮正己烷溶液) 洗脱, 收集洗脱液15ml 于离心试管中, 在45℃氮吹仪上用氮气将其浓缩并用正己烷定容至2ml 上机测定 Florisil  柱，6ml, 1000mg, Agilent 公司
  18


文献
14 陶宏亮，关燕萍，苏晓峰等，华中农业大学学报，2006，25（1）： 46～49
15 张颖,张健,中国调味品, 2006,(2):49～53
16 王建华,姜海燕,王 惠等，中国卫生检验杂志，2006，16（2）：197～199
17 樊苑牧,俞雪钧,谢东华等，中国卫生检验杂志，2006，16（1）： 28～30
18 毕波,周艳明,牛森,现代农业科技, 2006,(3): 33～34

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(37)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第38部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（5）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（5）
编号 题目 摘要 SPE 文献
19 SPE-GC 测定苹果及浓缩苹果汁中5 种有机磷农药残留
  了SPE2GC 测定苹果及浓缩苹果汁中敌敌畏、甲胺磷、氧化乐果、马拉硫磷、对硫磷的分析方法. 结果表明,采用C18固相萃取柱净化萃取液气相色谱测定,5 种有机磷农药在0.2～4.0mg/ kg 水平的回收率范围为80.82 %～107.04 % ,变异系数为2.00 %～5.11 % ,最低检测限为0101～0105 mg/ kg.
样品制备：　(1) 提取. 称取510 g (准确至011 g) 浓缩苹果汁(或苹果匀浆试样) 于100 mL 烧杯中,加入15 g 无水硫酸钠,10 mL 丙酮,混匀后在超声波清洗器中提取5 min ,提取液经铺有玻璃棉和装有无水硫酸钠的玻璃漏斗滤入梨形瓶中,然后继续加入10 mL 丙酮,重复上述步骤两次,合并3次提取液经漏斗过滤于梨形瓶中;残渣洗涤后一并
滤入,滤液于旋转蒸发器40 ℃蒸发浓缩至大约110mL ,待净化. (2) SPE 柱净化. 依次用510 mL 正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮(1∶5∶4) 的混合溶液、510 mL 甲醇洗柱和3 mL 10 %的甲醇水溶液过SPE 柱,使小柱活化并除去柱中杂质. 再用水洗柱,除去柱中过多的甲醇, 并保持柱子湿润，上样, 控制流速015mL/ min , 用水洗柱,转移内源性杂质,5 mL 20 %甲醇水溶液淋洗小柱,弃去流出液,抽干水分. 以正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮分别为1∶3∶6 、1∶4∶5 、1∶5∶4 的混
合洗脱液各5 mL 梯度洗脱, 控制流速为015mL/ min. 梨形瓶接收洗脱剂,40 ℃旋转蒸发至近干,压缩空气吹干,用015 mL 丙酮定容,待GC 测定, AccuBONDⅡODS-C18 Cart 柱，500mg， 3mL ，安捷伦 公司
  19
20 固相萃取2气相色谱法快速测定大葱中有机磷农药残留量
  研究了高含量基体干扰大葱样品中有机磷农药残留量分析方法。采用乙腈水提取,有机相盐析后经硅胶柱净化,以双毛细柱GC2FPD 定性定量,该方法对8 种有机磷农药的添加回收率为60 %～130 %,RSD < 18 % ,检出限为0. 02～0. 05 mg/kg
样品制备：称取切碎混匀大葱样品25. 0 g ,加饱和氯化钠溶液10 mL 及乙腈50 mL ,高速均质提取3 min ,过滤于125 mL 分液漏斗中,加入氯化钠约6 g 剧烈振荡3 min ,静置分层,移取乙腈相10. 0 mL 旋转蒸发(40 ℃) 至干,用1. 0 mL 正己烷溶解。硅胶柱先用5 mL 丙酮2正己烷(1 + 1) 预淋,上液后用丙酮2正己烷(1 + 1) 在常温常压下以自然滴速洗脱,收集洗脱液15 mL ,氮气吹干,用1 mL 正己烷溶解,高速离心后上机测定。 AccuBOND Ⅱ,500 mg ,3 mL
  20
21 蔬菜、水果中氨基甲酸酯类农药多残留分析方法的研究
  了高效液相色谱柱后衍生法测定蔬菜、水果中12 种氨基甲酸酯类农药及3 种代谢物残留的方法。采用乙腈提取，氨基固相萃取柱分离净化，反相分配色谱梯度洗脱，对1 2 种氨基甲酸酯类农药及3 种代谢物进行分离，通过柱后衍生化，荧光检测器定性定量测定4 种蔬菜、水果中12 种氨基甲酸酯类农药及3 种代谢物（涕灭威亚砜、涕灭威砜、杀线威、灭多威、3- 羟基克百威、涕灭威、抗蚜威、速灭威、残杀威、克百威、恶虫威、甲萘威、异丙威、
灭虫威、仲丁威）的残留量
样品制备：1) 提取 样品高速匀浆1min后，准确称取5.0g匀浆样品，加入10mL 乙腈，超声15min，过滤至分液漏斗中，加入1~2gNaCl，剧烈振摇1min，静置10min，使乙腈相与水相分层。收集乙腈层，过无水硫酸钠，准确称量滤液体积，浓缩至近干，待净化。
2) 净化 用2mL甲醇-二氯甲烷(体积比为1:99)溶解样品，将其加到固相萃取柱(使用前先用4mL 上述甲醇- 二氯甲烷液平衡该固相萃取柱)中,靠重力过柱,收集洗脱液。用2mL 甲醇- 二氯甲烷(体积比1:99)洗涤容器,并将其注入固相萃取柱(重复2 次),收集洗脱液,在
30~40oC 真空旋转浓缩至近干,用乙腈准确定容至1mL,过0.45 μ m 滤膜,待测。 氨基aminopropyl固相萃取柱，500mg，Varian公司
  21
22 应用固相萃取分析蔬菜水果中农药残留的研究
  主要研究了几种固相萃取柱消除蔬菜水果样品基质干扰的能力以及它们对54种农药回收率的影响。结果表明Florisil和C18对农药有很好的回收率,而C18对样品的净化能力相对优于Florisil。
  Florisil 柱， 200mg，3mL , LC-C18 柱200mg，3mL Supelco 公司
  22
23 荧光检测-高效液相色谱法测定水果、蔬菜中抗蚜威残留量
  :建立了水果、蔬菜中抗蚜威残留的荧光检测2高效液相色谱法。样品以乙腈提取,固相萃取氨基小柱(LC2NH2 ) 净化,Waters carbamate analysis (3. 9 mm ×150 mm ,4μm) ,V (甲醇) ∶V (水) ∶V (乙腈) = 16∶68∶16 为流动相,柱温30 ℃,流速为1. 5 mLPmin进行分离,用荧光检测器进行检测,激发波长和发射波长分别为317 nm , 392 nm。回收率在98. 5 %～105. 4 % ,相对标准偏差为3. 0 %～4. 6 % ,检出限为0. 01 mgPkg。 氨基小柱( LC-NH2 )
，500 mg，3 mL  (ANPEL) ,
  23



文献
19 李建科,乌日娜,胡秋辉等，陕西师范大学学报(自然科学版)， 2005．33（4）：86～89
20 王连珠, 游 俊，陈枝华等，理化检验-化学分册，2005 ，41（12）：880～883
21 李 英 周艳明 牛 森，现代科学仪器，2006，（6）：68～70
22 洪振涛,张卫锋,聂建荣等，广东化工，2005（7）：8～11
23 刘宏程,黎其万，周世萍等，分析试验室，2005，24（9）： 52～54

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(38)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第39部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（6）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（6）
编号 题目 摘要 SPE 文献
24 固相萃取-气相色谱法用于蔬菜中
拟除虫菊酯类农药残留的检测研究
  本文建立了固相萃取2气相色谱联用技术(SPE2GC) 用于甘蓝中拟除虫菊酯类农药残留的分析方法。与国家标准方法相比,该法节省了样品前处理的时间和溶剂用量,灵敏度得到提高;氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯和三氟氯氰菊酯的检出限分别为10. 1μg/ L 、9. 2μg/ L 、3. 6μg/ L 和2. 9μg/ L ,方法的回收率高,重现性好。SPE2GC 是
农药残留检测中值得推广的一种方法。 ENVI-Carb ,3 mL  ,硅酸镁小柱(Florisil ,3 mL
  24
25 含辛辣气味蔬菜的多种农药残留的检测
  研究了含辛辣气味蔬菜中有机磷、有机氯和拟除虫菊酯类等多种农药残留的快速检测方法。采用微波处理技术和固相萃取技术对大蒜等含辛辣气味的蔬菜进行样品前处理,气相色谱检测
  Florisil  500mg ,  AccuBOND Ⅱ， Agilent 公司 25
26 气相色谱-质谱法检测蔬菜和水果中35 种农药残留
  　首先将样品切成小块,放入食物粉碎机中充分粉碎,准确称取2510 g ,加入50 mL 乙腈,在匀浆机上高速匀浆2 min 。称取5～7 g 的氯化钠放入100 mL具塞量筒中, 将匀浆好的样品过滤至量筒中, 剧烈振荡1min ,静置10 min 。待乙腈相与水相分层后,用移液管准确移取20 mL 乙腈提取液于烧杯中,将烧杯置于80 ℃水浴锅中用氮气将提取液吹至近干。加入2 mL 正己烷溶解,溶解液经已用5 mL 正己烷活化的Florisil n 固相萃取柱(6 mL ,1 000 mg) 净化,用5 mL 淋洗液(30 %正己烷的丙酮溶液) 淋洗,收集淋洗液于离心试管中,在50 ℃氮吹仪上用氮气将其浓缩并用正己烷准确定容至015 mL ,供GC2MS 分析。 Florisil 柱，6 mL ,1000 mg  26
27 蔬菜中赤霉素残留量的高效液相
色谱检测方法研究 使用高效液相色谱(HPLC) 对蔬菜中的农药GA3 残留进行分析检测. 用80 %甲醇溶液作为提取剂;建立了液液萃取与SPE2PAK C18固相萃取相结合纯化GA3 的方法;检测波长为206. 00 nm;流动相为甲醇与7. 5 mM 甲酸水的体积比为3 :7 的溶液 SPE-PAK C18 柱
  27
28 GC/MS法测定新鲜蔬菜中残留的农药 使用SPE柱萃取韭菜中的农药，以GC/MS进行定性和定量分析。加标回收率为 75～104%之间。
  LiChrolut EN 柱 28


文献
24 李胜清, 田华，柳训才等，分析科学学报，2005，21（3）：289～291
25 郑新华,包海英,何桂华等，山东科学，2005，18（4）：18～22
26 赵晓萌,于同泉,朱高群等，色谱，2005，23（3）：328
27 葛雅琨,张元新,胡 睿等，吉林化工学院学报，2005，22（2）： 13～16
28 曹艳霞，张万峰，黑龙江环境通报，2005，29（1）：

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(39)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第40部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（7）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（7）
编号 题目 摘要 SPE 文献
29 恶唑菌酮在苹果和土壤中的残留分析方法
  研究并建立了恶唑菌酮( famoxadone)在苹果和土壤中的残留分析方法。样品以甲醇提取,固相萃取( SPE)净化,高效液相色谱(HPLC)测定。恶唑菌酮的最小检测量为4.0×10-9 g,苹果中的最低检出浓度为
0.008 mg·kg- 1 ,土壤为0.02 mg·kg- 1。在0.05～5.0 mg·kg- 1的添加浓度下,土壤中恶唑菌酮的平均添加回收率为81.45% ～1.61% ,变异系数为2.93% ～6.52%;苹果中的平均添加回收率为84.06%～97.93% ,变异系数为4.61% ～6.67%。
  SUPELCLEAN ENV I-Carb 柱，3 mL
  29
30 固相萃取-高效液相色谱测定番茄中的赤霉素GA3残留
  建立了固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC) 法分析番茄中赤霉素GA3残留量的方法。研究了不同填料的固相萃取小柱对番茄中赤霉素的萃取回收率以及各自的纯化结果。该方法线性范围为0. 21～1. 05 ×102 mg/L ,检出限为0.011mg/ kg , 在优化条件下,以C18小柱萃取样品的效果最好,加标回收率为88. 45 %～95. 90 % ,其RSD 为1. 15 %～6. 56 %。
　固相萃取柱的制备
取10 mL 的空注射针筒,在其底部装上微孔垫片,分别加入1. 5 g 的硅胶,β2环糊精键合固定相,40～60 目碳纳米管,玻棒敲打,循环水泵抽吸0. 5 h ,使其装填均匀,在上部安上微孔垫片,即得固相萃取柱。
使用前用5 mL 乙酸乙酯、甲醇、二次水依次缓慢通过萃取柱,以湿润、活化、平衡填料,洗脱干扰杂质。
  碳纳米管 30
31 固相萃取-毛细管气相色谱法测定蔬菜、土壤和水中的毒死蜱残留量
  　采用固相萃取技术提取蔬菜、土壤和水体中毒死蜱,建立了蔬菜、土壤和水体中毒死蜱的固相萃取- 气相色谱测定方法,并与传统方法进行了比较。添加浓度为0. 1 、1 、10 mg ·L - 1 ,两种方法的水样平均回收率分别在93. 7 %～102. 7 %和96. 2 %～100. 2 %,变异系数分别在2. 2 %～7. 7 %和3. 3 %～5. 1 %;土壤平均回收率分别在91. 3 %～100. 7 %和92. 0 %～104. 8 % ,变异系数分别在1. 4 %～7. 0 %和0. 3 %～5. 2 %;蔬菜平均回收率分别在89. 4 %～101 . 4 %和92 . 5 %～101. 8 % ,变异系数分别在5 . 2 %～7. 1 %和3. 1 %～6. 0 %。试验结果表明,固相萃取法与传统方法的回收率和变异系数相当,但前者更加省时、省力和省溶剂。
  AccuBOND Ⅱ ODS-C18 柱 500mg，6 mL
  31
 
32 固相萃取-气相色谱-质谱联用法快速检测蔬菜水果中44种有机氯和拟除虫菊酯多残留的研究
  本实验研究了用气相色谱- 质谱联用仪(GC2MS)同时检测蔬菜水果中44种有机氯和拟除虫菊酯的分析方法,采用程序升温结合选择离子扫描( SIM)模式和固相萃取前处理技术,可以在40 min之内同时定性和定量。由于采用了特征离子扫描,大大消除了基质的假性干扰。通过试验验证,添加回收率在70% ～116%之间,相对标准偏差(RSD)为2. 2% ～18. 6% ,最低检出限(LOD)为2. 0 ×10 - 13 ～2. 0 ×10 - 11 g。该方法的检出限、回收率及相对标准偏差均能满足农药残留分析要求。
  Accu BOND II Florisil  柱: 1000 mg、6 mL安捷伦公司

  32
33 蔬菜中15 种农药残留量的气相色谱法同时测定
  本文通过凝胶渗透色谱技术对样品进行前处理,采用气相色谱法(电子捕获- 氮磷串联检测器) ,建立了同时测定蔬菜中15 种有机磷、氨基甲酸酯以及除草剂等农药残留量的方法。
  聚苯乙烯凝胶
(Bio - Beads S - X3)
  33


文献
29 操海群,花日茂,汤 锋等，安徽农业大学学报, 2005, 32 (2) : 221～223
30 黄红林, 刘实, 张桃芝，分析科学学报，2005，21（1）：75～77
31 吴小毛，方 华，王 晓等， 环境污染与防治，2005，27（2）： 142～145
32 刘永波，贾立华，牛淑妍等，分析化学，2005，33（2）：290
33 栾燕,赵晶,权伍英等， 中国公共卫生，2005 ，21（3）： 352～353

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(40)

      这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第41部分.——固相萃取-色谱分析在蔬菜和水果中有害物质分析的应用。

4．固相萃取-色谱在蔬菜和水果中有害物质分析的应用（8）

表 4  用固相萃取-色谱方法分析蔬菜和水果中有害物质的报告（8）
编号 题目 摘要 SPE 文献
34 蔬菜中高毒有机磷农药多残留的检测方法研究
  采用J ＆WDB-1701 型毛细管色谱柱及FPD 检测器，建立了同时测定蔬菜中高毒有机磷农药甲胺磷、甲拌磷、氧乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷残留量的气相色谱法，测定6 种有机磷农药残留量的线
  3ml Amino SPE 柱和ODS-C18  SPE 柱
  34
 
35 微波处理- 气相色谱法测定含硫蔬菜中的多类农药残留
  建立了含硫蔬菜(洋葱、大蒜、青葱、韭菜等) 中有机磷、有机氯和拟除虫菊酯多类农药残留的简单、快速检测方法。采用家用微波炉处理含硫蔬菜40 s , 使其中的酶失去活性, 避免产生干扰的硫化物, 再用乙腈均质提取, PSA 固相萃取柱净化, 用气相色谱- 电子俘获检测器( ECD) 及火焰光度检测器( FPD) 检测。添加样品的回收率在70 %～110 %之间, 相对标准偏差在3. 5 %～14. 2 %之间。
  PSA 柱, 500 mg , 3 mL , Varian 公司; ENVI-CARB/LC - NH2柱, Sulelco 公司 35
36 固相萃取HPLC法测定豆芽中4 - 氯苯氧乙酸钠
  研究用固相萃取HPLC法测定豆芽中4 - 氯苯氧乙酸钠残留的检测方法。豆芽样品经稀碱提取后,用50% 的H3 PO4 溶液调至酸性,经 Oasis HLB 柱富集,甲醇洗脱。以甲醇+ 0. 01 mol /L 磷酸盐缓冲液(40 + 60)为流动相,采用ZORBAX SB C18柱(250 mm ×4. 6 mm ×5μm)分离,UV 228 nm 检测,外标法定量
样品制备：称取豆芽样品10 g (精确至0. 01 g)于50 ml烧杯中,加
入0. 01 mol/L 氢氧化钠溶液30 ml,用Ultra - turrax搅拌器匀浆1 min,然后以8 000 r/min 离心10 min,取上清液于50 ml容量瓶中,残渣用适量0. 01 mol/L 氢氧化钠再次提取离心,合并上清液定容至50 ml, 摇匀。取25 ml 此溶液, 加50%H3 PO4 溶液2. 0 ml,慢速过已活化的HLB小柱,用酸性水洗去杂质,再用2. 0 ml 甲醇洗脱, 并定容至2. 0 ml, 经0. 2μmPVDF滤膜过滤至自动进样器样品瓶中,供HPLC分析
  Oasis HLB 柱
3 ml,60 mg
Waters 公司 36
37 低温提取气相色谱法测定荞头中13 种有机磷农药残留量
  了荞头中13 种有机磷农药(OPPs) 残留量的气相色谱分析检测方法;探讨了OPPs 残留的微量化学法、低温提取及固相萃取等前处理技术。结果表明,在2 ℃低温条件下用乙酸乙酯、乙酸乙酯2正己烷(1 + 1) 二次提取荞头中OPPs 残留,然后用LC2Si 小柱净化的效果较好。本法可同时测定荞头中13 种OPPs 残留量;方法的回收率在61. 5 %～135 %(除敌敌畏) 之间,精密度为2. 6 %～15 %;多种有机磷浓度在0. 020～1. 0mg/ kg 范围有良好的线性关系( r = 0. 9998～0. 9999) ;检出限为0. 005～0. 04 mg/ kg。
比较：　比较了ENVI-Carb , Florisi ,L-Aliumn 和LC-Si 小柱的净化效果。实验结果显示:以ENVI2Carb 小柱的脱色效果最好,但干扰物质吸附性较差;用Florisi 、L-Aliumn 小柱过滤的样品溶液,不仅脱色效果不好,对气相色谱干扰也很大;相比之下,以LC-Si 小柱的净化效果较好。进一步考察了洗脱剂、己烷、丙酮、乙酸乙酯的影响,洗脱结果显示:选择乙酸乙酯2正己烷(1 + 1) 作洗脱剂时,既减少了
干扰物质的洗脱,又可获得较高农药洗脱率。
  ENVI-Carb , Florisi ,L-Aliumn 和 LC-Si 小柱 37
 
38 紫甘蓝中氨基甲酸酯类农药多残留分析方法研究
  建立了高效液相色谱柱后衍生法测定紫甘蓝中9种氨基甲酸酯类农药及2种代谢物残留量的方法。采用C18、PSA小柱固相萃取分离净化, 用ODS柱(柱槽温度50 ℃) 在梯度淋洗条件下对9种氨基甲酸酯类农药及2种代谢物进行分离, 通过柱后衍生化, 荧光检测器(荧光波长为445 nm) 定性定量测定紫甘蓝中9种氨基甲酸酯类农药及2种代谢物
(杀线威、灭多威、涕灭威、恶虫威、甲萘威、硫苯威、硫双灭多威、仲丁威、甲硫威、甲硫威代谢物1、甲硫威代谢物2) 的残留量。结果表明, 9种农药及2种代谢物在28 min内可以得到很好的分离, 线性范围为0101～50 mg·L - 1 , 线性相关系数R2 ≥01998 0, 检出限为0170～510μg·L - 1 , 方法回收率为8016% ～10313%。 C18、PSA两种 柱,
  38
 


文献
34 陈 浩，柳训才，李胜清等，食品科学，2005，26（3）：204～208 
35 王建华, 张艺兵, 汤志旭等，分析测试学报，2005，24（1）： 100～102
36 李小平,蒋经伟,范建中等，中国卫生检验杂志，2006，16（3）：267～269
37 黄志强，吴玉杰，马 铭等，分析科学学报，2006，22（1）：46～48
38 杨红, 陈如东, 朱红梅等，南京农业大学学报　2005, 28 (1) : 103～106

近年国内固相萃取-色谱分析的进展(41)

    这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第42部分.——固相萃取-色谱分析在其他食品中有害物质分析的应用。

5．固相萃取-色谱在其他食品中有害物质分析的应用（1）

表 5  用固相萃取-色谱方法分析在其他食品中有害物质的报告（1）
序号 题目 摘要 SPE 文献
1 固相萃取-高效液相色谱法快速测定番茄红素油树脂中的总VE
  研究番茄红素油树脂中总VE含量的快速测定方法，应用PRP-6固相萃取柱，先以90%乙醇/水洗脱去除样品中的皂化物和强极性物质，再用无水乙醇洗脱VE并用HPLC测定其含量。
样品制备：准确称取1 g 番茄红素油树脂样品，加无水乙醇超声溶解后，移至50 ml 容量瓶中用无水乙醇定容。吸取5ml 样品乙醇液，5 000 r/min 离心10 min，取上清液备用。
固相萃取纯化：取一定量的 PRP-6 树脂包于滤纸中，依次用乙酸乙酯、丙酮各100ml在250 ml 索氏提取器中分别回流8 h 以去除其中
的杂质，然后用丙酮浸泡超声脱气，采用湿法装柱，转移至Ф1 cm×50 cm 小柱中，得到柱床高度为13cm、床层体积（bed volume，以下简称BV）为10 ml 的固相萃取小柱（需PRP-6 树脂干重2 g左右）。用4BV 50%（v/v, 以下同）乙醇/水平衡固相萃取柱，待用。
固相萃取富集纯化：移取2ml 待测样品的乙醇离心上清液加至固相萃取小柱顶端，氮气加压使其快速通过小柱，依次用8BV 90%乙醇/水、
8BV 无水乙醇洗脱，每4BV 洗脱液收集一个馏分
  PRP-6树脂（自制，交联度为9 %，比表面积450～500 m2/ g，孔径20～30 nm，粒径50～80μm，塔板数260/ m）；
  1
2 固相萃取- 液相色谱法测定水产品中孔雀石绿结晶紫及其代谢产物
  研究了水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物隐性孔雀石绿、隐性结晶紫的高效液相色谱分析方法。样品以乙酸钠-乙腈为提取剂, 经二氯甲烷反提取、再经SPE 柱净化、氰基柱分离和柱后衍生化、等度洗脱、HPLC-DAD 测定、外标法定量。
样品制备：提取：称取5.00g 样品于50mL 离心管内, 加入1.5mL20%盐酸羟胺溶液、2.5mL 1.0mol/L-水对甲苯磺酸溶液、 5.0mL 乙酸钠缓冲溶液, 高速均质30s, 加入12mL 乙腈和10g 酸性氧化铝, 剧烈震摇30s 后以5000r/min 的速度离心5min, 把上清液转移至装有10mL 水和2mL 二甘醇的50mL 离心管中。再用12mL 乙腈提取一次, 合并清液后加入10mL 二氯甲烷, 振摇30s 后以4000r/min 的速度离心5min。将二氯甲烷层转移至蒸发瓶中, 再用15mL 二氯甲烷萃取一次, 合并二氯甲烷。于45℃旋转蒸干至约1mL,用2.5mL 乙腈溶解残渣。
净化 ：
将中性氧化铝小柱及 PRS 小柱从上到下安装在固相萃取装置上, 用5mL 乙腈分两次活化小柱, 再把蒸发瓶中的溶液过柱, 用2.5mL 乙腈洗涤蒸发瓶并过柱, 不收集。弃中性氧化铝小柱, 用2mL 流动相洗涤蒸发瓶后洗脱PRS 小柱, 再用1mL 盐酸羟胺甲醇溶液洗脱, 收集上述洗脱液, 用流动相定至 3.00mL, 过0.45μm 滤膜, 滤液上机测定
  25%PbO2 衍生柱;Varian 丙磺酸( PRS) 小柱;中性氧化铝小柱;酸性氧化铝(80～100 目)。
  2
3 饲料中地西泮的测定—气质联用法
  使用GC/MS 测定饲料中地西泮，使用SIM进行测定时,要选择合适的选择离子,通过对地西泮标准样品的扫描和检索,确定256、283 和221 为选择离子,其中256 的峰度最高,把它定为定量离子。
样品制备：称取试样2 g(精确至0. 1 mg) 于具塞离心管中,加水20 mL ,用碳酸钠溶液(10 %) 调pH 9。准确加入15.0 mL 正己烷比例为70 %与二氯甲烷比例为30 %的混合液,加盖,旋涡30 s ,离心5 min ,取上清液于具塞试管中。重复提取1 次,合并2 次上清液。
样品净化：准确移取提取液适量(一般配合饲料15.0 mL ,浓缩饲料6. 0 mL ,添加剂预混合饲料3. 0 mL) ,注入已用甲醇和提取液处理过的硅酸镁固相萃取小柱,先用超纯水淋洗,再准确移取甲醇2. 0 mL 洗脱,收集洗脱液

  Oasis 硅酸镁柱，Waters
公司
  3
4 饲料中合成雌激素的测定方法研究
  用 GC-MS 测定动物饲料中己烷雌酚(HEX)、己烯雌酚(DES)、双烯雌酚(DE)。样品经乙醚和碱液提取经MAX固相萃取柱净化后衍生,进行GC- MS 分析。己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚较好分离, 得到浓度与峰面积成正比的工作曲线, 相关系数r = 0.999 , RSD < 11. 20 % ( n = 6) , 定量检出限分别为1、3 和3 ×10- 7 % , 回收率66.3 %～100.3 %
样品制备：准确称取5 g 鸡饲料于50 mL 具塞离心管中, 加入10 mL 0.2 mol/L 的乙酸铵缓冲溶液, 均质1 min 后, 加10 mL乙醚, 混合3 min , 离心后将有机层转移到另一干净试管中, 再用10 mL 乙醚萃取一次, 合并后用氮气吹干。2 mL 三氯甲烷溶解残渣, 混合1 min , 10
mL 1. 0 molPL NaOH 溶液分两次萃取有机相, 取上层水相、上样于 MAX 固相萃取小柱(依次用5 mL甲醇、5 mL 水活化) , 再用5 mL 1. 0 molPL NaOH 溶液和5 mL 0. 1 molPL NaOH V (甲醇) ∶V (水) = 7∶3 淋洗小柱, 抽干后用5 mL V (甲基叔丁醚) ∶V (甲醇) = 9∶1 (含2 %甲酸) 洗脱并收集。于40 ℃水浴中在 N2 下吹近干, 用洗脱液将残留物完全转移到 2 mL 的自动进样小瓶中, N2 吹干后加入100μL 衍生化试剂, 于70 ℃下反应1 h , 取出冷却后用N2
吹干, 再用0. 2 mL 异辛烷溶解残渣, 于GC- MS 上分析。
  Oasis MAX  柱 Waters 公司
  4
5 液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中结晶紫及其隐色代谢物残留
  采用液相色谱2串联质谱法(LC2MS/ MS) 测定了水产品中结晶紫以及它的隐色代谢物残留。匀质后的水产品样品用乙腈和乙酸铵缓冲液提取,合并提取液,用二氯甲烷反提取,经中性氧化铝柱和PRS 柱固相萃取净化,且不使用氧化铅柱在线氧化,色谱分离后直接进入串联质谱检测器。采用电喷雾正离子,多反应监测(MRM) 模式检测。方法的检出限可达0. 5 ng/ g ,线性方程的相关系数r 大于0. 99 ,添加样品平均回收率为77. 6 %～93. 8 % ,相对标准偏差均小于8. 2 %。
样品制备：提取 准确称取5. 0 g 匀质样品于50 mL 离心管中,加入1. 5 mL 20 %盐酸羟胺溶液2. 5 mL 1. 0mol/ L 对2甲苯磺酸溶液5. 0 mL 乙酸盐缓冲液,在1 500 r/ min 的转速下振荡30 s ,再加入10 mL 乙腈,振荡30 s ,然后加入10 g 酸性氧化铝,振荡,离心。取上层消液于装有10 mL 水和2 mL 二甘醇的100 mL离心管中。在50 mL 离心管中再加入10 mL 乙腈,重复上述操作一次,将上层清液移入同一支100 mL ,
离心管中。
净化　在上述清液中加入15 mL ,二氯甲烷,混匀,以3 000 r/ min 离心10 min 。将下层溶液转移至100 mL 的梨形瓶中,再用10 mL 二氯甲烷重复上述操作一次,合并二氯甲烷层于同一梨形瓶中。于45 ℃旋转蒸发至约1 mL ,用5 mL 乙腈溶解残渣。将PRS 固相萃取小柱安装在固相萃取装置上,PRS 小柱上端再连接中性氧化铝固相萃取小柱,用5 mL 乙腈活化小柱,上样,再用乙腈洗涤梨形瓶两次,每次2. 5 mL ,把洗涤液依次过柱,弃去中性氧化铝小柱。在不抽真空的情况下,依次用1 mL 0. 05 mol/ L 乙酸铵、1mL 乙腈和1 mL 盐酸羟胺甲醇溶液洗脱PRS 柱,收集洗脱液,流动相定容至3 mL ,过0. 45 μm 滤膜,备用。 丙磺酸（PRS） 柱，500mg , Varian 公司，中性氧化铝 柱，1 g , Supelco 公司
  5



文献
1 郑 云，亓国秀，颜克序等，营养学报，2006 ，28（4）：346～349
2 张林田，陈小雪，梁希扬等，检验检疫科学，2006，16（3）：8～10
3 李俊玲，周志强，孙延军等，饲料研究，2006，（7）：61～62
4 丁卓平,韩 丽,杨景贤等，分析试验室，2006，25（8）：108～111
5 王　鹏，朱宽正，林雁飞等，分析科学学报，2006，22（3）：283～286