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主题：【求助】求助：样品检测问题？

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shennugg
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发表于：2010/06/06 23:58:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
准备用酶促荧光法测粪便样品中的D－乳酸含量， 原理：D－乳酸在D－乳酸脱氢酶（D-LDH）的催化下生成丙酮酸，同时把NAD+转变为NADH，NADH具有荧光特性，通过测定NADH 的浓度达到间接测样品中 D－乳酸盐的浓度。已知未去蛋白的样品易受到内源性的L-LDH和D-LDH的干扰，因为NAD+是这两个酶的共同底物。为了避免非特异的NAD+转化成NADH而导致D－乳酸盐浓度的高估，对粪便样品进行前处理非常必要。查文献说，用高氯酸脱蛋白，用量与样品体积比为1：1。

存在疑问：用高氯酸脱蛋白用量应怎么确定？如果用量不足，不足以除去蛋白（内源性酶），如果用量过高，可能对其后加入的酶具有破坏作用，怎样才能确定一个合适的用量，即能保证除去样品中的内源性酶，又不至于影响后来加入用来反应的酶，请各位高手帮忙解决一下这个问题？谢谢！如果不用高氯酸脱蛋白，用其它的试剂也存在同样的问题。
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2010/6/7 8:18:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主的问题是否属于分子荧光？转过去试试
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shennugg
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2010/6/7 9:45:05 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有大侠知道吗？
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2010/6/7 14:10:43 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么没人帮忙回答下？？
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2010/6/7 14:11:14 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有知道的大侠吗？
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shennugg
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2010/6/7 22:47:28 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 coffee8(coffee8) 发表:
楼主的问题是否属于分子荧光？转过去试试


应该是分子荧光吧！期待一个合适的答案！
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