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液相色谱（LC）

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主题：【第三届网络原创参赛作品】新反相色谱柱处理、使用和再生

浏览0 回复21 电梯直达

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2010/7/6 10:59:59 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有水有渝兄,我已经把图谱传上来了,请再指教指教?

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小不董

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ID：doxw0323

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2010/7/7 8:23:27 15楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱前处理的流动相比例，楼主有什么依据吗？不同柱子使用的流动相不一样吧？还要考虑使用的流动相是什么。
有点不明白的，想向楼主请教，为什么接ms的lc在前处理要用0.3ml/min？一般不是接ms的使用时是1ml/min。你用0.1ml/min,而LCMS要和使用时的流速一样？

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21kgtan

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2010/7/7 9:12:42 16楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

新柱要用65%乙腈水冲有什么依据没？后面冲2-8小时有必要这么久？有什么作用或好处？
我自己接到新柱都是直接用无盐的乙腈水平衡20分钟就开始用了，不知道这样会不会对柱子造成伤害？

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xue2009

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2010/7/8 16:13:06 17楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 21kgtan(21kgtan) 发表:
新柱要用65%乙腈水冲有什么依据没？后面冲2-8小时有必要这么久？有什么作用或好处？
我自己接到新柱都是直接用无盐的乙腈水平衡20分钟就开始用了，不知道这样会不会对柱子造成伤害？

实际上LZ的做法是罗嗦，一般一根新柱子拿来后就是要先活化好，用100%的甲醇冲下就行了，然后用完后按照常规的步骤处理柱子就行啦，完全没必要那么麻烦。

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dhq50018

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2010/7/10 11:24:28 18楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我对柱子再生时，没用四氢呋喃，而是用的25%异丙醇，流速0.2ml/min,其他的和楼主一样，效果挺好的。

该帖子作者被版主 xky0230699加 2积分， 2经验，加分理由：谢谢补充

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小猪飞飞

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ID：zpf20031212

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2010/8/5 21:20:53 19楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

反冲的时候要注意是在低流速冲洗。如反相C18柱，如果怀疑是蛋白堵了，可以用1%的醋酸水：乙腈=90:10，长时间冲洗。如果不行，可以用同样的流动相长时间反冲，流速设为0.05ml/min，同时可将柱温升至50~55度。还是不行，把柱子末端打开，换一下柱顶头的滤芯，同时要注意尽可能地减少柱填料的丢失。最后一步是真正的死马当活马医