进样口[Inlet]
流动相和样品进入色谱柱的一端。多孔的,惰性玻璃材料保留了填料,保护吸附剂层入口不受微粒污染。好的高效液相色谱试验规定样品和流动相不含微粒,这种要求对于入口容易堵塞的小粒径色谱柱来说是强制性的。如果柱床进样口被堵住而产生比平时高的反压,有时,反转流动方向,使流出液进入废液瓶,可以冲开堵塞,洗掉停留在表层的碎片。如果碎片已经流过表层,进入床层进样口端,那么色谱柱很可能就到使用寿命液相色谱* [LC][Liquid Chromatography* [LC]]
流动相是液体的一种分离技术。液相色谱方法可在色谱柱上或平面[薄层色谱 TLC 或纸色谱]上使用。现代液相色谱技术使用更小的颗粒和更高进样口压力,从 1970 年开始被称为高效(或高压)液相色[HPLC]。2004 年,超高效液相色谱使液相的性能极大地提升到了新高度[参见"超高效液相色谱 UPLC® 技术"]。
流动相* [参考洗出液,洗提液 Eluate, Eluent][Mobile Phase* [see Eluate, Eluent]]
按照某一方向从固定相吸附床层长度方向渗流过的流体。流动相可以是液体[液相色谱]或气体[气体] 或超临界流体[超临界流体色谱法]。气相色谱法中,名词载气就是流动相。在洗提色谱法中,流动相也可叫做洗提液,而洗出液被定义为流动相通过吸附剂后含有目标化合物的部分。
正相色谱*[Normal-phase Chromatography*]
固定相极性比流动相极性强的洗脱方法。在液相色谱中,使用正相色谱这一名词是为了强调与反相色谱的对比。
制备液相色谱法[Preparative Chromatography]
使用液相色谱法分离具有一定纯度和一定量的化合物,以满足后续试验或使用的过程。制药或生物技术纯化过程中,直径几英寸的色谱柱可处理数千克原料。如仅分离几毫克珍贵的天然产物,分析型高效液相色谱柱就足够了。两者都是制备色谱方法,仅级别不同[参见"高效液相色谱量级"和表 A]。
分离度* [Rs, 见选择性][Resolution* [Rs, see Selectivity]]
两个色谱峰的分离,以相应保留时间的差异来表示,除以基线处的平均峰宽。Rs =1.25 代表相同宽度的两个峰完全在基线被分开。当 Rs = 0.6 时,可观察到色谱图接近顶点有两个峰。高效的色谱柱得到窄峰并提高分离困难样品的分离度;但分离度的提高仅仅是 N 的平方根。提高分离度最有效的方法是改变色谱分离的流动相/固定
保留时间* [tr][Retention Time* [/tr][tr]]
洗脱开始[通常在高效液相色谱中,进样时间]至峰的最高点出现的时间。tR减去滞留时间 [tM, 从进样到分析物完全无保留的峰顶点洗脱出来的时间]就是调整保留时间 tR'。
反相色谱*[Reversed-phase Chromatography*]
色谱法中,流动相的极性远比固定相高的洗脱过程,例如,表面键合烷基链的多微孔硅胶材料。 注意:避免不正确的拼写 reverse phase [参见参考文献 4 "一些反相分离
机理的创新想法"]。
固相萃取 [SPE] [Solid-phase Extraction [SPE]]
使用液相原理在微型色谱床实现从复杂体系的分离,富集和/或纯化分析物的样品制备技术。离线固相萃取使用[手动或自动]大颗粒独立塑料管或微型洗脱板,借助低压或真空辅助流动。在线固相萃取使用装填小颗粒的微型高效液相色谱柱,借助更高压力和转换阀变换固相萃取柱在线连接 HPLC 色谱柱或离线连接废液瓶。固相萃取方法使用分段梯度[参见"Gradient"]完成柱老化,进样,清洗和洗脱步骤。上样的液相条件通常是使重要分析物的 k 越高越好,因此分析物在上样和清洗步骤中会完全被保留。洗脱时则变为更强的溶剂混合物[参见"洗脱强度"]。目标是去除基质干扰,并分离出溶液中的分析物,使其达到一定浓度以适合后续分析工作。
固定相*[Stationary Phase*]
形成色谱系统的两相之一。它可以是固体,胶状或液体。如果是液体,它可以在分布固体上。这种固体对分离过程可有作用或可无作用。液体也可以和固体进行
化学键合[键合相]或固定在上面[固化相]。
超高效液相色谱 UPLC® 技术[UPLC® Technology]
装有亚 2 微米的颗粒柱,能够在非常高的压力下操作并经过整体设计的高性能液相色谱系统称为超高效液相色谱[UPLC 技术]。† 相比高效液相色谱,该技术主要的优越性是显著提高了分离度,以及/或在保持现有高效液相色谱分离的分离度时,获得更短分析时间。[/tr]