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薄层色谱（TLC）

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主题：【资料】薄层色谱法 (thin layer chromatography＝TLC)

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熊猫宝宝

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发表于：2011/01/07 14:27:32 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

固定相（吸附剂或载体）涂布成一均匀薄层，点样，（密闭的容器中）展开，斑点显色，（与对照物质）比较进行定性定量。

薄层色谱法的特点：

1）速度快，需十至几十分钟，同时展开多个试样。

2）试样预处理简单，对试样限制少。

3）载样量比较大，适用于制备。

4）仪器简单，操作方便。

5）分离能力较强。

6）灵敏度较高。

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2011/1/7 14:27:55 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一、薄层色谱法的主要类型和原理

吸附薄层色谱法

原理：组分在薄层板上吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的过程。

吸附系数不等实现分离。

　　一般极性强的组分K大，Rf值小；极性弱的组分 K小，Rf值大。

分配薄层色谱法

原理：多次分配的过程，分配系数（溶解度）不等实现分离

分类：正相色谱、反相色谱

分配薄层色谱法

正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂为流动相。

极性强的组分K大， Rf值小。

反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水－有机溶剂为流动相。

极性强的组分K小， Rf值大。

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2011/1/7 14:28:23 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂

吸附剂

硅胶：多孔性微粒，表面带有硅醇基，呈弱酸性。

原理：硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键（吸附性）。

组分与硅醇基形成氢键（被吸附）的能力不同而分离。

应用：酸性和中性物质的分离，如有机酸酚类、醛类等

硅胶

活度与含水量的关系：含水量高，活性级高，活度低。

活化：加热至100℃左右，除去吸附水提高活度。（注意温度不可过高）

分离效率：与其粒度、孔径及表面积等有关。

常用硅胶：

硅胶H，不含黏合剂

硅胶G，含煅石膏

硅胶GF254，含煅石膏和一种无机荧光剂，即锰激活的硅酸锌，在254nm紫外光下呈强烈黄绿色荧光背景。

吸附剂

氧化铝

碱性氧化铝(pH9.0)——分离中性或碱性化合物，如生物碱、脂溶性维生素等；

中性氧化铝(pH7.5)——分离酸性及对碱不稳定的化合物；

酸性氧化铝(pH4.0)——酸性化合物的分离。

活度也与含水量有关。　

展开剂(流动相)

同吸附柱色谱

极性强的溶剂洗脱能力强

常用溶剂的极性强弱顺序：

水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正丙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿＞二氯甲烷＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞四氯化碳>环己烷>石油醚。

展开剂

选择原则：根据被分离物质的极性

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2011/1/7 14:30:22 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

展开剂

混合溶剂

先用单一溶剂展开，若Rf值太小，则加入一定量极性强的溶剂，如乙醇、丙酮等，如果Rf值太大，则加入适量极性弱的溶剂(如环己烷、石油醚等)，以降低极性。

可加入一定比例的酸或碱,使斑点集中。

三、薄层色谱操作方法

制板要均匀

点样要集中

展开前要预饱和

显色

四、定性和定量分析

定性分析

比较Rf值或Rr值、斑点颜色或荧光

常采用已知标准物质对照（同一板上展开）

多种展开系统的Rf值与对照品一致。

定量分析　

　洗脱法

　直接定量法

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