主题:【求助】求助恩诺沙星的出峰

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lucan31977044
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今天按照 农业部公告[2003]第236号《动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法-高效液相色谱法》  检测恩诺沙星
仪器 岛津LC-20AT 色谱条件如下
色谱柱:岛津  Inertsil ODS-SP  C18250mm×4.6mm(i.d),粒径5μm,

流动相:0.05mol/L磷酸溶液/三乙胺--乙睛(82+18)
流速:0.8mL/min
检测波长:激发波长280nm;发射波长
450nm
进样量
:20μL
温度:室温

做出来的恩诺沙星的标准的峰很不好看
不知道是什么原因

标1  0ug/mL  即乙腈


标2  0.00288ug/mL


标7  0.144ug/mL


标8  0.288ug/mL


标准比较

该帖子作者被版主 善良的鬼5积分, 2经验,加分理由:很好的实例
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样品是溶解在什么溶剂里,是流动相初始比例吗?感觉像是有机相多了
lucan31977044
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这个都是标准的出峰情况
标准配置都是按照方法来的
即标准品用0.03mol/L的NaOH溶解后 用乙腈逐级稀释
qinxp
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原文由 lucan31977044(lucan31977044) 发表:
今天按照 农业部公告[2003]第236号《动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法-高效液相色谱法》  检测恩诺沙星
仪器 岛津LC-20AT 色谱条件如下
色谱柱:岛津  Inertsil ODS-SP  C18250mm×4.6mm(i.d),粒径5μm,

流动相:0.05mol/L磷酸溶液/三乙胺--乙睛(82+18)
流速:0.8mL/min
检测波长:激发波长280nm;发射波长
450nm
进样量
:20μL
温度:室温

做出来的恩诺沙星的标准的峰很不好看
不知道是什么原因
quote]

哥们,您好。现在问题解决了吗?主要是什么问题呢?
我们也遇到类似的问题,同样的柱子,类似的流动相,测定环丙沙星。但目前也没找到问题,有没有可能是柱子不合适?
lucan31977044
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原文由 qinxp(qinxp) 发表:
原文由 lucan31977044(lucan31977044) 发表:
今天按照 农业部公告[2003]第236号《动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法-高效液相色谱法》  检测恩诺沙星
仪器 岛津LC-20AT 色谱条件如下
色谱柱:岛津  Inertsil ODS-SP  C18250mm×4.6mm(i.d),粒径5μm,

流动相:0.05mol/L磷酸溶液/三乙胺--乙睛(82+18)
流速:0.8mL/min
检测波长:激发波长280nm;发射波长
450nm
进样量
:20μL
温度:室温

做出来的恩诺沙星的标准的峰很不好看
不知道是什么原因
quote]

哥们,您好。现在问题解决了吗?主要是什么问题呢?
我们也遇到类似的问题,同样的柱子,类似的流动相,测定环丙沙星。但目前也没找到问题,有没有可能是柱子不合适?


我改用流动相稀释标样
没有前沿峰了
倒是有点拖尾
lucan31977044
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还有
我改用了Waters Symmetry C18的柱子
看到有的资料上说这种柱子对三乙胺之类有很好的作用
qinxp
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原文由 lucan31977044(lucan31977044) 发表:
还有
我改用了Waters Symmetry C18的柱子
看到有的资料上说这种柱子对三乙胺之类有很好的作用

我也换柱子了,A的C18柱可以。
但是在4min左右还是有个峰,我觉得是溶剂峰。(三乙胺可以改善拖尾,但可能对柱子不好)
我觉得你用紫外检测器可能会好些,不然基线太飘,个人建议。
对了,你是哪学校的?
lucan31977044
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原文由 qinxp(qinxp) 发表:
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还有
我改用了Waters Symmetry C18的柱子
看到有的资料上说这种柱子对三乙胺之类有很好的作用

我也换柱子了,A的C18柱可以。
但是在4min左右还是有个峰,我觉得是溶剂峰。(三乙胺可以改善拖尾,但可能对柱子不好)
我觉得你用紫外检测器可能会好些,不然基线太飘,个人建议。
对了,你是哪学校的?


用紫外的话灵敏度没有荧光高
有资料上说荧光检测器的灵敏度比紫外-可见光的灵敏度约高两个数量级
我做过确实如此

我在公司
zchlucky
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我流动相用的四丁基溴化铵
+乙腈(95+5),峰行还可以
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