主题：【讨论】提问帖(3.1)：HPLC色谱柱性能的评价？

专业人员肯定有一套自己的标准
而使用者来说关注的也就是柱效和稳定性这几个了

看到一份资料，给大家分享一下。    色谱柱分离性能指标的评价

　　常用选择性、分辨率（分离度）、柱效率来表示柱子的分离效能。

其相关概念为：

　　1、分离因子：系指两组分保留值(TR或VR)之比值，常用来表示柱子的选择性。分离因子大，分离较好，这不是绝对的，柱效的好坏也影响分离因子的真假。

　　2、分离度：相邻的两个色谱峰中，小峰峰高和两峰交点的高度之差与小峰峰高之比值，分离度常用来描述未全分离色谱峰的分离程度。一般要求分离度大于0.5.

　　3、分离不纯度：表示一峰物质混入另一峰物质中的百分含量。

　　4、分配系数K：又称平衡常数，是指在一定温度和压力下，气_液相间达到平衡时，组分分配在液相中平均浓度与其分配或溶解在气相中的平均浓度之比值。分配系数只随柱温、柱压变化，与柱中气相、液相体积无关；如果两组分具有相同的K值，则它们的峰是重合的。反之，K值差别越大，则峰分离的越好。

　　5、分配比k：组分在固定相中的量与在流动相中的量之比，k值又称容量因子、容量比、分配容量。分配比是衡量柱子对组分的保留能力的参数。分配比越大，则保留时间越长，分配比为0，则表示组分在固定相中不溶解。

        6、分辨率R：它是指混合物中相邻两组分在色谱柱中的分离情况。相等于相邻两组分色谱保留值之差与此两组分色谱峰峰底宽度总和之半的比值。R=1.0，两组分稍有重迭；R=1.5，两组分基本分离。

　　7、总分离效能指标：指相邻两组分色谱保留值之差与此两组分半峰宽总和之半的比值。

　　8、柱效率：色谱柱在分离过程中由动力学因素所决定的色谱分离效率。

　　9、理论塔板高度：相当于一个理论塔板的高度，其值以柱长与理论塔板数之比来表示。

　　10、有效塔板高度：相当于一个有效理论塔板的高度。

　　11、理论塔板数：用来描述色谱柱效率的一个指标。

　　12、有效塔板数：指由调整保留值与色谱峰宽的比值。

色谱柱性能指标

一.某指定容量因子的理论塔板数N；
理论塔板数越大，柱效越高
N=16(Tr/W)*2
Tr:谱峰的保留时间
W：峰宽
*2：平方
提高理论塔板数的因素包括：
1.色谱柱填充良好，粒度分布范围越窄，填充色谱柱床的稳定性越好、柱效越高，同时压力降最小，一般要求粒度分布范围不超过平均值的正负50%；
2.增加色谱柱长度，长度一般在100--300mm；
3.采用较小微粒填料，用相对较小的填料，目前常用约5微米粒径固定相，也有1.5~3微米的多孔或无孔微粒；
4.采用低黏度流动相；
5.升高色谱柱温度；
6.采用小分子化合物测定。

二、峰不对称因子As，理想的As为0.95~1.1（绝对的对称峰值为1）；
三、两种不同溶质的选择性；
四、色谱柱的反压，用不同规则的微粒填充，色谱柱柱的压力可能会高；
五、保留之的重新性；
六、键和相的浓度；
七、色谱柱的稳定性。

原文由 省部重点实验室(gl19860312) 发表:
色谱柱性能指标

一.某指定容量因子的理论塔板数N；
理论塔板数越大，柱效越高
N=16(Tr/W)*2
Tr:谱峰的保留时间
W：峰宽
*2：平方
提高理论塔板数的因素包括：
1.色谱柱填充良好，粒度分布范围越窄，填充色谱柱床的稳定性越好、柱效越高，同时压力降最小，一般要求粒度分布范围不超过平均值的正负50%；
2.增加色谱柱长度，长度一般在100--300mm；
3.采用较小微粒填料，用相对较小的填料，目前常用约5微米粒径固定相，也有1.5~3微米的多孔或无孔微粒；
4.采用低黏度流动相；
5.升高色谱柱温度；
6.采用小分子化合物测定。

二、峰不对称因子As，理想的As为0.95~1.1（绝对的对称峰值为1）；
三、两种不同溶质的选择性；
四、色谱柱的反压，用不同规则的微粒填充，色谱柱柱的压力可能会高；
五、保留之的重新性；
六、键和相的浓度；
七、色谱柱的稳定性。

前面不都是有了吗

哈哈，看来应该集思广益，其实色谱柱研发人员最有发言权吧。

原文由 yifan1117(yifan1117) 发表:
哈哈，看来应该集思广益，其实色谱柱研发人员最有发言权吧。

我认为也是
毕竟使用者不一定懂的那么多

对，其实使用色谱柱时还是厂家推荐比较多。

原文由 yifan1117(yifan1117) 发表:
哈哈，看来应该集思广益，其实色谱柱研发人员最有发言权吧。

热切期盼色谱柱的研发人员来探讨交流。

真准备采购色谱柱，来学习一下。对其也不是特别懂，主要是觉得使用过程中还是要仔细保护、正确使用才能延长使用寿命。