主题:【已应助】想了解下化妆品3种致病菌的检测方法和判定方法

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pluto05
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想了解下化妆品3种致病菌的检测方法和判定方法,刚从事化妆品的检验工作,希望能得到有用的信息!
推荐答案:Star回复于2012/03/07
粪大肠菌群:
5 操作步骤
5.1 取10mL 1:10 稀释的检液,加到10mL 双倍乳糖胆盐(含中和剂)培养基中,置44℃±0.5℃培养箱中培养24h~48h,如不产酸也不产气,则报告为粪大肠菌群阴性。
5.2 如产酸产气,划线接种到伊红美蓝琼脂平板上,置36℃±1℃培养18h~24h。同时取该培养液1~2 滴接种到蛋白胨水中,置44℃±0.5℃培养24h±2h。
经培养后,在上述平板上观察有无典型菌落生长。粪大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽。也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉紫色,中心较深的菌落,亦常为粪大肠菌群,应注意挑选。
5.3 挑取上述可疑菌落,涂片作革兰氏染色镜检。
5.4 在蛋白胨水培养液中,加入靛基质试剂约0.5mL,观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色;阴性反应液面呈试剂本色。
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粪大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌

《化妆品卫生规范》(2007版)上面有具体的检测方法
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粪大肠菌群:
5 操作步骤
5.1 取10mL 1:10 稀释的检液,加到10mL 双倍乳糖胆盐(含中和剂)培养基中,置44℃±0.5℃培养箱中培养24h~48h,如不产酸也不产气,则报告为粪大肠菌群阴性。
5.2 如产酸产气,划线接种到伊红美蓝琼脂平板上,置36℃±1℃培养18h~24h。同时取该培养液1~2 滴接种到蛋白胨水中,置44℃±0.5℃培养24h±2h。
经培养后,在上述平板上观察有无典型菌落生长。粪大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽。也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉紫色,中心较深的菌落,亦常为粪大肠菌群,应注意挑选。
5.3 挑取上述可疑菌落,涂片作革兰氏染色镜检。
5.4 在蛋白胨水培养液中,加入靛基质试剂约0.5mL,观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色;阴性反应液面呈试剂本色。
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铜绿假单胞菌
5 操作步骤
5.1 增菌培养:取1:10 样品稀释液10mL 加到90mL SCDLP 液体培养基中,置36℃±1℃培养18h~24h。如有铜绿假单胞菌生长,培养液表面多有一层薄菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。
5.2 分离培养:从培养液的薄膜处挑取培养物,划线接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上,置36℃±1℃培养18h~24h。凡铜绿假单胞菌在此培养基上,其菌落扁平无定型,向周边扩散或略有蔓延,表面湿润,菌落呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素,此培养基选择性强,大肠艾希氏菌不能生长,革兰氏阳性菌生长较差。在缺乏十六烷三甲基溴化铵琼脂时也可用乙酰胺培养基进行分离,将菌液划线接种于平板上,放36℃±1℃培养24h±2h,铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色,其它菌不生长。
5.3 染色镜检:挑取可疑的菌落,涂片,革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性者应进行氧化酶试验。
5.4 氧化酶试验:取一小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内,用无菌玻璃棒挑取铜绿假单胞菌可疑菌落涂在滤纸片上,然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基对苯二胺试液,在15s~30s 之内,出现粉红色或紫红色时,为氧化酶试验阳性;若培养物不变色,为氧化酶试验阴性。
5.5 绿脓菌素试验:取可疑菌落2 个~3 个,分别接种在绿脓菌素测定培养基上,置36℃±1℃培养24h±2h,加入氯仿3mL~5mL,充分振荡使培养物中的绿脓菌素溶解于氯仿液内,待氯仿提取液呈蓝色时,用吸管将氯仿移到另一试管中并加入1mol/L 的盐酸1mL 左右,振荡后,静置片刻。如上层盐酸液内出现粉红色到紫红色时为阳性,表示被检物中有绿脓菌素存在。
5.6 硝酸盐还原产气试验:挑取可疑的铜绿假单胞菌纯培养物,接种在硝酸盐胨水培养基中,置36℃±1℃培养24h±2h,观察结果。凡在硝酸盐胨水培养基内的小倒管中有气体者,即为阳性,表明该菌能还原硝酸盐,并将亚硝酸盐分解产生氮气。
5.7 明胶液化试验,取铜绿假单胞菌可疑菌落的纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置36℃±1℃培养24h±2h,取出放冰箱10min~30min,如仍呈溶解状或表面溶解时即为明胶液化试验阳性;如凝固不溶者为阴性。
5.8 42℃生长试验:挑取可疑的铜绿假单胞菌纯培养物,接种在普通琼脂斜面培养基上,放在42℃±1℃培养箱中,培养24h~48h,铜绿假单胞菌能生长,为阳性,而近似的荧光假单胞菌则不能生长。
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金黄色葡萄球菌
5 操作步骤
5.1 增菌:取1:10 稀释的样品接种到90mL SCDLP 液体培养基中,置36℃±1℃培养箱,培养24h±2h。注:如无此培养基也可用7.5%氯化钠肉汤。
5.2 分离:自上述增菌培养液中,取1~2 接种环,划线接种在Baird Parker 氏培养基,如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板,置36℃±1℃培养24h~48h。在血琼脂平板上菌落呈金黄色,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在Baird Parker 氏培养基上为圆形,光滑,凸起,湿润,直径为2mm~3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落,但无混浊带及透明带。挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上,置36℃±1℃培养24h±2h。
5.3 染色镜检:挑取分纯菌落,涂片,进行革兰氏染色,镜检。金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌,排列成葡萄状,无芽胞,无夹膜,致病性葡萄球菌,菌体较小,直径约为0.5μm~1μm。
5.4 甘露醇发酵试验:取上述分纯菌落接种到甘露醇发酵培养基中,在培养基液面上加入2mm~3mm 的灭菌液体石蜡,置36℃±1℃培养24h±2h,金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。
5.5 血浆凝固酶试验:吸取1:4 新鲜血浆0.5mL,放入灭菌小试管中,加入待检菌24h±2h肉汤培养物0.5mL。混匀,放36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中,每半小时观察一次,6h 之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各0.5mL,分别加入灭菌1:4 血浆0.5mL,混匀,作为对照。
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金黄色葡萄球菌
5 操作步骤
5.1 增菌:取1:10 稀释的样品接种到90mL SCDLP 液体培养基中,置36℃±1℃培养箱,培养24h±2h。注:如无此培养基也可用7.5%氯化钠肉汤。
5.2 分离:自上述增菌培养液中,取1~2 接种环,划线接种在Baird Parker 氏培养基,如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板,置36℃±1℃培养24h~48h。在血琼脂平板上菌落呈金黄色,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在Baird Parker 氏培养基上为圆形,光滑,凸起,湿润,直径为2mm~3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落,但无混浊带及透明带。挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上,置36℃±1℃培养24h±2h。
5.3 染色镜检:挑取分纯菌落,涂片,进行革兰氏染色,镜检。金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌,排列成葡萄状,无芽胞,无夹膜,致病性葡萄球菌,菌体较小,直径约为0.5μm~1μm。
5.4 甘露醇发酵试验:取上述分纯菌落接种到甘露醇发酵培养基中,在培养基液面上加入2mm~3mm 的灭菌液体石蜡,置36℃±1℃培养24h±2h,金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。
5.5 血浆凝固酶试验:吸取1:4 新鲜血浆0.5mL,放入灭菌小试管中,加入待检菌24h±2h肉汤培养物0.5mL。混匀,放36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中,每半小时观察一次,6h 之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各0.5mL,分别加入灭菌1:4 血浆0.5mL,混匀,作为对照。

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我想问下,化妆品对允差率有没有标准的,有标准的话是多少?
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