主题：【分享】文献检索任务二零五（205.1-205.10）

205.2 高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中粘杆菌素、多粘菌素B的残留量

苏萌[2] 艾连峰[1] 段文仲[1] 哈婧[2]
[1]河北出入境检验检疫局,石家庄050051 [2]河北科技大学化学与制药工程学院,石家庄050051
摘　　要：建立了动物源食品中粘杆菌素和多粘菌素B残留的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）测定方法。样品用V（10%三氯乙酸水溶液）：V（乙腈）=30：70提取,Oasis WCX SPE柱净化,LC-MS/MS电喷雾正离子多反应监测模式（ESI＋-MRM）检测。分析物在0～250μg/kg的浓度范围内呈良好线性,线性相关系数〉0.995。方法的定量限为10μg/kg。方法在三个添加水平的平均回收率在71.6%～78.9%之间,相对标准偏差在6.2%～12%之间。方法适用于动物源食品中粘杆菌素和多粘菌素B的定量及确证检测。
关 键 词：高效液相色谱-串联质谱法 粘杆菌素 多粘菌素B 动物源食品

205.3 太湖浮游细菌分子生态学及溶藻细菌的研究

田川 
【学位授予单位】：上海交通大学
【摘要】：太湖是中国第二大淡水湖，位于中国的东部，是一个典型的浅层淡水湖泊。近些年来，由于周边地区的工农业污染加重，太湖水体出现了非常严重的生态问题和环境问题。为了对太湖水体进行修复，收集水体中微生物群落的基本信息就显得十分重要。由于水生生态系统中的微生物群落多样性和群落结构是生物地球化学循环的重要影响因素，所以对它们的变化规律进行评价就具有很大的意义。另外，为了找到新的生物学方法和技术来控制太湖每年夏季的蓝藻水华爆发，对太湖水体中的溶藻细菌进行深入研究也具有很高的潜在应用价值。 为了深入探讨大型富营养淡水湖泊（太湖）水体中的浮游细菌群落多样性随时间空间的变化规律，我们使用了PCR-DGGE的方法来研究太湖水样。这些太湖水样取自三个不同的取样点（无锡、湖州和七都水域）和不同的月份，取样点的水体营养化程度从富营养到重度富营养逐渐变化。聚类分析和多维尺度分析表明浮游细菌群落多样性在时间维度上的变化主要受到蓝藻水华爆发的影响，两者之间有着紧密的联系。所有水样中的浮游细菌群落结构都可以被划分为冬季期、浅度水华爆发期和重度水华爆发期三大类。与此同时我们还发现三个取样点的水体中细菌群落多样性不仅存在时间上的变化，还存在空间维度上的差异，这种差异与三处取样点的富营养化程度密切相关。无锡、湖州和七都三处水体的富营养化程度呈现由超富营养到富营养的渐变规律，而这三处水体中的浮游细菌群落结构也呈现出了明显的渐变规律：无锡和七都两处水体中的细菌群落结构差异很大，而湖州水域的富营养化程度处于两者之间，与两者都有一定相似度。另外，某些特殊的DGGE条带也体现出了这种时间和空间上的变化。通过使用典型相关性分析进一步研究，我们发现太湖水体中的浮游细菌群落多样性主要受到温度、pH、总氮、总磷以及溶解氧浓度等因素的影响，其中总氮和总磷只在富营养化程度最高的无锡水样中表现出了对细菌群落的重要影响，而在另外两个富营养化程度相对较低的取样点样品中没有表现出这个规律。 前面的研究结果表明太湖浮游细菌群落和蓝藻水华爆发之间有着非常明显的相互影响关系，那么在太湖的浮游细菌群落中是否存在能够抑制蓝藻生长甚至杀灭蓝藻水华的细菌呢？为了对太湖溶藻细菌进行深入的研究并寻找利用溶藻细菌来控制蓝藻水华的生物学方法，我们摸索并且完善了一整套从富营养化水体中对溶藻细菌进行筛选、鉴定、溶藻特性研究、溶藻模式研究及分离、纯化、鉴定溶藻活性物质的方法。应用该方法，我们从太湖水体中筛选出了包括菌株A27在内的十株溶藻细菌，这十株溶藻细菌菌株分属古细菌、微小杆菌属、气单胞菌属和芽孢杆菌属，并且均对铜绿微囊藻PCC7806具有很强的溶藻效果，而铜绿微囊藻是太湖蓝藻水华爆发的优势藻类。通过16s rRNA基因序列分析，菌株A27属于厚壁菌门中的微小杆菌属，它对铜绿微囊藻、聚球藻、绿色微囊藻、色球藻、浮游颤藻、念珠藻、水华束丝藻、颤藻等多株蓝藻都表现出了很好的溶藻效果，但对两株真核藻株效果不明显，说明菌株A27的溶藻能力具有选择性，其对蓝藻的溶藻效果显著，在太湖蓝藻水华爆发的治理中是很有潜力的溶藻细菌菌株。研究表明微小杆菌A27的溶藻能力与细菌密度密切相关，其起效的细菌密度阈值约为4×108CFU/mL。同时，微小杆菌A27的溶藻效果受测试藻株所处的不同生长阶段影响较大（对数期≈延滞期平台期），而较少受到细菌本身所处的生长阶段的影响。 对微小杆菌A27的溶藻作用产生模式的研究表明其溶藻作用是通过分泌胞外活性溶藻物质来实现的。我们发现该菌株的发酵液中至少含有三种具有溶藻效果的物质。在后续的研究中我们通过有机溶剂抽提、硅胶吸附柱层析和HPLC等方法成功分离纯化出了其中的两种，质谱、核磁共振和红外光谱等检测结果表明这两种溶藻物质分别是一种分子量为1188.5Da的化合物和胸腺嘧啶。进一步的研究结果显示胸腺嘧啶在浓度达到100mg/L时对铜绿微囊藻PCC7806具有明显溶藻效果，同时，胸腺嘧啶也表现出了对另外两株分离自太湖的铜绿微囊藻9110和聚球藻BN60的明显溶藻效果（太湖蓝藻水华以微囊藻和聚球藻为主）。虽然胸腺嘧啶在菌株A27的溶藻作用过程中未必扮演了很重要的角色，可能只起到了部分作用甚至没有发挥作用，并且对铜绿微囊藻的溶藻效果需要在较高浓度下才能出现，但这个发现还是为细菌在蓝藻水华的快速消退过程中扮演的重要作用提出了一种新的思路和解释：在太湖蓝藻水华爆发的后期，在藻类密度非常高的局部水体中，由于藻类和其他生物的死亡向环境中释放了大量的胸腺嘧啶，导致这些局部水体中胸腺嘧啶的浓度超过了100mg/L的溶藻作用阈值，从而起到了溶藻的作用并导致蓝藻加速死亡。这又进一步提高了水体中的胸腺嘧啶的浓度，从而形成了一个恶性循环，最终导致了蓝藻水华的快速消退。当然，在自然水体中这个解释是否成立还需要进一步实验的证明。
【关键词】：太湖 富营养化 微生物群落 PCR-DGGE 溶藻细菌 铜绿微囊藻 溶藻物质 胸腺嘧啶

205.4 HPLC法测定布洛芬颗粒的含量

卓芝  张伟  邬大玉  张晓松  邹玉明 
【作者单位】： 重庆市药品检验所
【摘要】：目的:建立布洛芬颗粒中布洛芬的含量测定方法。方法:用Diamonsil C_(18)(25cm×4.6mm×5μm)色谱柱,以0.01mol/L磷酸溶液～乙腈(37:63)为流动相,流速为1.5ml/min,检测波长220nm。结果:在0.04968～0.4968mg/ml范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为99.52％(RSD=0.32％,n=18)。结论:该法快速、简便、重现性好,可用于布洛芬颗粒中布洛芬的质量控制。
【关键词】： 布洛芬 高效液相色谱法

205.5 高效液相色谱法测定颠胃酸口服液中东莨菪碱的含量

陈芳  常明泉  肖琴  郝新才 
【作者单位】： 湖北医药学院附属太和医院;湖北医药学院;
【摘要】：目的:建立高效液相色谱法测定颠胃酸口服液中东莨菪碱含量的方法。方法:色谱柱为Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.25%十二烷基硫酸钠溶液(用磷酸调pH为2.5)-乙腈(60∶40),流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL,柱温30℃。结果:东莨菪碱在2.6～130.0μg/mL范围内线性关系良好,A=0.3075C-0.3101(r=0.9995),回收率为97.3%(RSD=0.93%,n=6)。结论:所建立的方法简便快捷,专属性强,重现性好,适用于颠胃酸口服液中东莨菪碱的含量测定。
【关键词】： 颠胃酸口服液 东莨菪碱 高效液相色谱法 含量测定

205.6 替米沙坦片的人体药动学和生物等效性

黄鹏  张红  徐文炜  李艳艳  熊玉卿 
【作者单位】： 江西医学院公共卫生学院流行病学教研室 江西医学院临床药理研究所
【摘要】：目的:建立测定替米沙坦血浆浓度的高效液相-荧光检测法(HPLC),考察替米沙坦的药代动力学及生物等效性.方法:24例健康受试者单剂量交叉口服40 mg替米沙坦片供试制剂或参比制剂后,用HPLC测定替米沙坦血药浓度并计算药动学及相对生物利用度,进而对主要药动学参数进行统计分析.色谱柱为D iamonsil C18柱(5μm,4.6 mm×150mm),以乙腈-磷酸二氢钾缓冲液(61∶39,磷酸调pH=3.74)为流动相,流速1.0 mL/m in,坎地沙坦为内标,荧光检测波长λEx=305 nm,λEm=365 nm.结果:测定替米沙坦的线性范围为0.5~144 ng/mL,r=0.9998,绝对回收率在79.62%~85.69%(n=5),相对回收率在101.92%~108.95%(n=5),日内和日间RSD分别为4.23%~9.80%和4.03%~9.95%(n=5).供试制剂与参比制剂的AUC0~96分别为888.90±406.49和895.03±364.53.结论:两种替米沙坦制剂均具有生物等效性.
【关键词】： 替米沙坦 色谱法 高压液相 生物等效性

205.7 高效液相色谱法测定止喘合剂中黄芩苷的含量

林晓珊  李国成  刘春霞  汪锦飘 
【作者单位】： 中山大学孙逸仙纪念医院药学部;
【摘要】：目的建立止喘合剂中黄芩苷含量的测定方法。方法色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-5.0%磷酸(60∶40),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm,柱温为25℃。结果黄芩苷的线性范围为0.952~6.664μg/ml,回归方程为y=48.13647x-9.74570(r=0.999 98),平均回收率为96.21%,相对标准偏差(RSD)为0.373 7%(n=6)。结论所建立方法简单、专属性强、重现性好,可用于止喘合剂中黄芩苷的测定。
【关键词】： 止喘合剂 黄芩苷 高效液相法

205.8 中药钩藤中钩藤碱含量的测定

刘明 汤建林 胡岚岚 周世文 
第三军医大学新桥医院临床药理基地 重庆400037
【摘　要】目的建立优化钩藤药材中钩藤碱的提取及含量测定方法。方法采用甲醇冷浸超声法处理钩藤药材,Diamonsil C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相及梯度：甲醇∶0.01mol/L醋酸铵缓冲液（氨水调pH=6.0）0～20min内比例由25∶75递增至50∶50;流速：1.0ml/min;柱温：25℃;检测波长：245nm;进样量：20μl。结果钩藤碱在0.25～64.0μg/ml范围内线性良好,回归方程为y=3.64×104x-2.13×104（r=0.9995）,相对回收率为95.95%～114.40%,重复性试验RSD为6.50%,稳定性试验钩藤碱高、中、低浓度溶液室温5d内RSD为4.62%、2.65%和4.58%。结论本测定方法准确可靠,重复性好,可应用于钩藤药材中钩藤碱含量的测定。 
【关键词】钩藤 钩藤碱 高效液相色谱法

205.9 RP-HPLC法测定男宝胶囊中淫羊藿苷和丹皮酚的含量

吴秀清  李远科  梁巍  黄玮 
【作者单位】： 资阳食品药品检验所;成都中医药大学药学院;
【摘要】：目的:建立RP-HPLC法同时测定男宝胶囊中淫羊藿苷和丹皮酚的含量。方法:采用高效液相色谱法测定6批不同药厂生产的男宝胶囊中淫羊藿苷和丹皮酚的含量。色谱系统:Diamonsil C8色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为25℃,检测波长为270 nm,流动相A和B分别为水和乙腈,梯度洗脱,流速:1.0 mL/min。结果:本法灵敏度高,重现性好,提取方法与色谱条件均较简单,能有效鉴别并测定男宝胶囊中淫羊藿苷和丹皮酚的含量。结论:该方法操作简便、灵敏,结果准确可靠。可用于男宝胶囊中淫羊藿苷和丹皮酚的含量测定。
【关键词】： 男宝胶囊 淫羊藿苷 丹皮酚 高效液相色谱法

205.10 RP-HPLC法测定马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的含量

温晓蓉  谈静 
【作者单位】： 成都铁路中心医院;成都中医药大学附属医院;
【摘要】：目的:建立自制中药制剂马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的RP-HPLC测定方法。方法:色谱柱:Diamonsi1 ODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙睛-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值2.8)(23:77),流速1.0 mL/min,检测波长260nm,柱温25℃。结果:士的宁与马钱子碱的线性范围分别是0.1226μg~2.452μg(r=0.99998)、0.1074μg~2.148μg(r=0.99994)。平均加样回收率分别为101.11%、99.83%,RSD分别是1.97%、2.13%。结论:本法操作简便、快速、准确、重现性好,可用于马钱子胶囊的质量控制。
【关键词】： 反相高效液相色谱法 士的宁 马钱子碱 马钱子胶囊