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主题：【已应助】求助：如何调整流动相梯度使氨基酸混标很好地分离？

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luxiaoyong
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发表于：2015/06/16 18:06:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在下现在在优化液相条件，用流动相为A：10mM甲酸铵水溶液，加0.1%甲酸；B：甲醇：水（95:5），加2mM甲酸铵和0.1%甲酸，测10种氨基酸的混标，试了很多种梯度都不能把样品很好地分开，而且峰形也很差，如图所示是其中一个梯度，实验室师姐之前用过的，我现在做也不行。求大神解答调整流动相梯度有没有什么规律可循，感激不尽！
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2015/6/16 18:10:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
峰型不好很正常，我们氨基酸用液相做
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luxiaoyong
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2015/6/16 18:11:56 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

这是自己胡乱试了一个梯度，效果更差。。。
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sukiliang
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2015/6/16 18:41:18 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以试试厂家氨基酸分析包里的流动相
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luxiaoyong
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2015/6/16 18:56:33 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sukiliang(sukiliang) 发表:
你可以试试厂家氨基酸分析包里的流动相
我们的机器是二手的，都不知道有没有这些，一般是附在说明书里的吧？回头找找，谢谢了
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sukiliang
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2015/6/16 19:11:06 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 luxiaoyong(v2979393) 发表:
我们的机器是二手的，都不知道有没有这些，一般是附在说明书里的吧？回头找找，谢谢了


= =！不知道楼主是什么仪器！
这个不在说明书里！
找有分析包的厂家要文献吧
一直都用这分析包来做氨基酸，效果挺不错，就是耗材贵了点
该帖子作者被版主 djj85411加 3积分， 2经验，加分理由：应助
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luxiaoyong
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2015/6/16 19:21:09 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sukiliang(sukiliang) 发表:
= =！不知道楼主是什么仪器！
这个不在说明书里！
找有分析包的厂家要文献吧
一直都用这分析包来做氨基酸，效果挺不错，就是耗材贵了点
好吧见笑了，我们的仪器是waters最古老的那种，没听说有分析包呢
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sukiliang
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2015/6/16 19:24:36 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 luxiaoyong(v2979393) 发表:
好吧见笑了，我们的仪器是waters最古老的那种，没听说有分析包呢


waters有氨基酸的分析包！
找他们销售要，之前想用waters的分析包，但是联系他们很久都不搭理，直接用第二个厂家的
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luxiaoyong
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2015/6/16 19:32:26 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原来是这样，了解了，多谢多谢！
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yinapple
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2015/6/16 21:23:35 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸用那个标准做呀？
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cxq19871003
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2015/6/16 21:29:58 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 luxiaoyong(v2979393) 发表:
在下现在在优化液相条件，用流动相为A：10mM甲酸铵水溶液，加0.1%甲酸；B：甲醇：水（95:5），加2mM甲酸铵和0.1%甲酸，测10种氨基酸的混标，试了很多种梯度都不能把样品很好地分开，而且峰形也很差，如图所示是其中一个梯度，实验室师姐之前用过的，我现在做也不行。求大神解答调整流动相梯度有没有什么规律可循，感激不尽！

楼主      针对氨基酸组分的检测：
            ①分离度一般用洗脱程序调节难度系数过大，但其分离度一般同流动相酸度、
              柱温箱温度关系较大；
            ②目前，氨基酸组分的检测主要采用的是HPLC柱前衍生法检测，效果不错，
                可同时检测多种(可达20多种)组分；
            ③看楼主给出的图谱，貌似使用液质检测吧，若使用液质，不衍生可直接检
              测氨基酸组分，即可定量、定性，其实不用太在乎分离度，关键是总离子
              谱图在选择离子谱图提取时，提取出的谱图能够分析，便于定量、定性即可。
         
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2015/6/17 9:43:24 Last edit by cxq19871003
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