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主题：【求助】急需：谢谢帮忙！SN/T 1109-2002 新城疫微量红细胞凝集抑制试验操作规程

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kjwangxiwei
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发表于：2007/01/06 10:43:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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2017/2/17 10:54:53 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
试验材料：病毒抗原：疫苗株（鸡胚培养），冻存管
          鸡血红细胞：1%生理盐水稀释
          V型底96孔血凝板，V行，有小面积平底
实验过程：
血凝试验（确定抗原的凝集单位）
1.    两个平行孔，A1B1孔各加16倍稀释的抗原100ul，后面A2-A12，B2-B12孔各加50ulPBS，两倍稀释，最后两孔弃掉50ul液体
2.    每孔加入50ul1%鸡血红细胞，室温放置15-20分钟，观察凝集现象。
3.    没有红细胞沉淀的孔就是4个凝集单位，抗原按照4个凝集单位稀释好备用。
血凝抑制试验
1.    除第一列外，每孔加入50ulPBS缓冲液
2.    按照样品顺序，在第一列每孔中加入100ul抗体（六孔板转染上清）
3.    用多道加样器从第一列各孔中吸取50ul抗体，依次进行2倍稀释，由第一列至第10列，弃去第10列50ul样品
4.    每孔加50ul新鲜配制的4个凝集单位的抗原，第一列至第11列，第2列加PBS
5.    轻轻弹击血凝板，是抗原和抗体充分混合。
6.    室温孵育20分钟
7.    每孔加入50ul红细胞悬液，混匀。第1列至第12列
8.    室温孵育30分钟
9.    观察红细胞凝剂抑制试验结果
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fscmj
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2017/3/1 16:53:16 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谁来应助，本人有奖励。
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