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主题：【已应助】安捷伦1200液相—SEC色谱柱，分析单克隆抗体药物，拖尾严重现象，求助

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malibing
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发表于：2020/02/14 16:32:46 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱型号为TSKgel G3000SWXL，新买的，使用了两个月色谱峰形、分离度一直很好，之后妥善保存在20%色谱纯乙醇中。
一个月后再次使用，出现拖尾现象，但色谱柱压正常，用尿嘧啶进样也拖尾，而且尿嘧啶保留时间推后了2min左右。
在工程师的指导下，怀疑是色谱柱中杂质残留较多，故先后用水，20%乙腈，PB缓冲液，PH2.5溶液，PH7.5溶液冲洗色谱柱，且色谱柱和保护柱是分开冲洗的。
洗完之后，拖尾现象只有一点点改善，还是较严重。
目前推断，是单抗样品中杂质和固定相氢键吸附造成拖尾，但氢键吸附的解决方法是用一定浓度的表面活性剂清洗，这对色谱柱的伤害也很大。

请各位大神帮忙分析一下，除了氢键吸附还有什么可能的原因？该怎么处理呢？
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malibing
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2020/2/14 16:33:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个看来像是对称性的问题，杂质比较多，柱子部分位置分布不好有可能造成这个问题。多洗吧，没别的办法。如果不用表面活性剂起不到效果的话，那就用，伤柱子不至于一次就搞坏。
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