主题:【求助】求助:关于薄层层析的问题?

浏览0 回复5 电梯直达
jiang992
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请教两个问题:1.我所要得到的目标物质A和B在荧光下显红色,展开后A在B的上面。我在硅胶板上依次点标准品A,样品,标准品B,展开后除标准品A 和B两个红点外,样品展开后也有一个红点,跟标准品B几乎在一条直线上,而且很亮,可是用高压液相去测,B的含量却很少,而A的含量却很高。2.我所用的展开剂的比率为8:2(弱极性:强极性)时,rf=0.4左右,我听说用硅胶柱时展开剂要稀释一倍,那应该是16:2,可是我用9:1的比率都洗不下来。
希望有高手帮我解释一下这个问题,不胜感激!多谢!
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cc
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对你的第一个问题我也纳闷;对于第二个问题我的想法是这样的,一般从薄层到柱色谱,应该把展开剂的极性调得极性略大些,这样有利于洗脱,而你反而把极性调小了,所以就洗不下来了。
吃饱不饿
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硅胶是极性的,要用极性大的洗脱剂才能把样品洗脱下来
liangzai
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用高压液相检测只有A和B物质吗?如果是的话那那个红点可能就是B,可以重新做一下薄层色谱看看
xiaopingzi66
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我做植物细胞膜脂肪酸薄层层析时,提取的脂肪酸里面经测定含有磷,那么里面就应该含有磷脂和糖脂的,可是在荧光灯下薄层板上看不到荧光斑点,请教一下是什么原因呢?
baoan__liu
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楼主可以从一下几个方面来考虑:
1.搞清楚A和B的理化性质:溶解度如何,薄层鉴别与含量测定是否处理方法相同,A和B用的是否是相同的溶剂;A和B的吸收光谱图如何,最大吸收波长分别是多少,薄层鉴别与含量测定时使用的波长又是多少.
2.B的荧光较A的强,并不能得出B的含量较A的含量高这一结论,因为还与各自的分子量有关.
3.分析一下你薄层样品的处理方法,是否对A的提取效果不好,是否可以导致A转化为B.
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